Molekylær diagnose af hjerte-allotransplantatafstødning ved hjælp af Intra-Graft-målrettet genekspressionsprofilering. (Nano-Heart)

Hjertetransplantation (HTx) er fortsat den mest værdifulde terapeutiske mulighed for patienter med hjertesvigt i slutstadiet, som er modstandsdygtige over for optimal medicinsk behandling. På trods af store forbedringer inden for immunsuppression og transplantationsbehandling er akutte og kroniske afstødningsinducerede allograftskader fortsat en af ​​de førende årsager til dødelighed og sygelighed efter hjertetransplantation, hvilket begrænser modtagernes forventede levetid. En forbedring i den overordnede håndtering af afvisning er fortsat et udækket medicinsk behov. Som et første skridt er en præcis diagnose af afvisning afgørende for at vejlede patientbehandling og optimere håndteringen.

I dag er diagnosen hjerteafstødning udelukkende baseret på patologisk vurdering af endomyokardiebiopsier (EMB'er) ved at identificere og klassificere cellulære infiltrater og myokardieskader. Mens der er gjort vigtige fremskridt i standardiseringen af ​​afvisningsdiagnosen, forbliver patologi en ufuldkommen guldstandard, især på grund af inter-observatørvariabiliteten, prøvebias og brugen af ​​kvalitative eller semikvantitative skalaer, der oversimplifiserer komplekse fænotyper. Derudover er sygdommens sværhedsgrad, graden af ​​myokardiebeskadigelse og progressionsstadiet afgørende informationer, som er dårligt fanget af de nuværende arbejdsformuleringer. Alle disse grænser repræsenterer store barrierer for at opnå en præcis og pålidelig diagnose af afvisning.

I denne sammenhæng opstod genekspressionsprofileringsanalyse af friske myokardieprøver hentet under en ekstrakernebiopsi og ved hjælp af en hel transkriptomtilgang som et potentielt objektivt patologiværktøj til at forfine diagnosen af ​​afstødning. Imidlertid har vigtige ulemper begrænset den rutinemæssige kliniske anvendelighed af hel-transkriptom-baseret molekylær diagnose, herunder ekstra-kerne prøveudtagningsbias, lav reproducerbarhed, teknisk og analytisk tyngde, med omkostninger og prøvetur-around, der ikke er forenelig med en klinisk indstilling.

Nyere teknologier kan overvinde denne begrænsning ved at tillade analyse af det samme væv, der bruges til histologisk vurdering. Målrettet molekylær profilering gældende for formalinfikserede paraffinindlejrede (FFPE) endomyokardiebiopsier kan tillade implementering af molekylær diagnose i den kliniske rutine. For nylig har vi vist, at Banff Human Organ Transplant Panel (B-HOT) panelet, et konsortium-godkendt konsensuelt målrettet panel med 770 gener, udviklet af Banff Molecular Diagnostics Working Group, nøjagtigt fangede centrale molekylære mønstre af antistof-medieret afstødning ( AMR) i hjerte-allotransplantatbiopsier og kan tjene som en proxy til hel transkriptom-baseret analyse.

Formålet med nærværende undersøgelse er derfor at identificere genekspressionssignaturer for AMR og akut cellulær afstødning ved hjertetransplantation og at udvikle og validere et molekylært hjerteafstødningsdiagnostisk system baseret på målrettet transkriptom som et nyt monitoreringsværktøj til præcisionsdiagnostik af hjerteallotransplantat FFPE-EMB.