Diagnosi molecolare del rigetto dell'allotrapianto cardiaco mediante profilazione dell'espressione genica mirata all'interno dell'innesto. (Nano-Heart)

Il trapianto di cuore (HTx) rimane l’opzione terapeutica più valida per i pazienti con insufficienza cardiaca allo stadio terminale refrattari alla terapia medica ottimale. Nonostante i notevoli miglioramenti nell’immunosoppressione e nella cura dei trapianti, le lesioni da rigetto acuto e cronico indotte da allotrapianto rimangono una delle principali cause di mortalità e morbilità dopo il trapianto di cuore, limitando così l’aspettativa di vita dei riceventi. Un miglioramento nella gestione complessiva del rigetto rimane un’esigenza medica insoddisfatta. Come primo passo, una diagnosi precisa di rigetto è fondamentale per guidare la cura del paziente e ottimizzare la gestione.

Al giorno d'oggi, la diagnosi di rigetto cardiaco si basa esclusivamente sulla valutazione patologica delle biopsie endomiocardiche (EMB) identificando e classificando gli infiltrati cellulari e il danno miocardico. Sebbene siano stati compiuti importanti progressi nella standardizzazione della diagnosi di rigetto, la patologia rimane un gold standard imperfetto, in particolare a causa della variabilità tra osservatori, della distorsione del campione e dell’uso di scale qualitative o semiquantitative che semplificano eccessivamente fenotipi complessi. Inoltre, la gravità della malattia, il grado di lesione miocardica e lo stadio di progressione sono informazioni cruciali scarsamente catturate dalle attuali formulazioni funzionanti. Tutti questi limiti rappresentano i principali ostacoli per ottenere una diagnosi precisa e affidabile di rigetto.

In questo contesto, l'analisi del profilo di espressione genica di campioni miocardici freschi recuperati durante una biopsia extra-core e l'utilizzo di un approccio con trascrittoma intero si sono rivelati un potenziale strumento complementare obiettivo della patologia per affinare la diagnosi di rigetto. Tuttavia, importanti inconvenienti hanno limitato l’applicabilità clinica di routine della diagnosi molecolare basata sull’intero trascrittoma, inclusi bias di campionamento extra-core, bassa riproducibilità, pesantezza tecnica e analitica, con costi e turnaround del campione non compatibili con un contesto clinico.

Le tecnologie recenti possono superare questa limitazione consentendo l'analisi dello stesso tessuto utilizzato per la valutazione istologica. La profilazione molecolare mirata applicabile alle biopsie endomiocardiche fissate in formalina e incluse in paraffina (FFPE) può consentire l'implementazione della diagnosi molecolare nella routine clinica. Recentemente, abbiamo dimostrato che il pannello Banff Human Organ Transplant Panel (B-HOT), un pannello mirato consensuale approvato dal consorzio comprendente 770 geni, sviluppato dal Banff Molecular Diagnostics Working Group, ha catturato accuratamente i modelli molecolari chiave del rigetto mediato da anticorpi ( AMR) nelle biopsie di allotrapianti cardiaci e può fungere da proxy per l'analisi basata sull'intero trascrittoma.

Lo scopo del presente studio è quindi quello di identificare le firme di espressione genica per la resistenza antimicrobica e il rigetto cellulare acuto nel trapianto di cuore e di sviluppare e convalidare un sistema diagnostico molecolare del rigetto cardiaco basato sul trascrittoma mirato come nuovo strumento di monitoraggio per la diagnostica di precisione dell'allotrapianto cardiaco applicabile a FFPE-EMB.