Blodplater i leverregenerering

Etterforskerne kunne tidligere vise at blodplateavledede vekstfaktorer som TSP-1 og 5-HT er av relevans i human leverregenerering. I dette prosjektet tar etterforskerne sikte på å belyse hvordan blodplater spesifikt frigjør granulene sine. Mens tette granuler lagret 5-HT induserer spredning av hepatocytter, reduserer alfa-granuler lagret TSP-1 deres spredningspotensial. Enda viktigere er at forskjellige pro-proliferative vekstfaktorer som VEGF også lagres i alfa-granuler. Derfor vil en systemisk reduksjon i antall blodplater redusere både pro- og antiproliferative faktorer. En høyt regulert granulafrigjøring har blitt postulert for å tillate blodplater å utøve spesifikke funksjoner. I 2008, Italiano et al. presentert overbevisende in vitro-bevis på at blodplater lagrer molekyler i separate granuler, som de er i stand til spesifikt å frigjøre ved blodplateaktivering. Videre støtter resultater fra andre grupper dette funnet.

Målet med dette prosjektet er å karakterisere blodplateaktivering hos pasienter med leverreseksjon og bestemme om spesifikke blodplateaktiveringsprofiler korrelerer med klinisk utfall.

Prosjektplan

Inkluderte pasienter:

Totalt 40 pasienter som gjennomgår hemihepatektomi vil bli inkludert. Pasientene vil bli nøye overvåket perioperativt. Plasma, serum, blodplater og vevsforberedelse vil bli utført som skissert nedenfor.

Hypotese nr. 1:

Sirkulerende blodplateaktiveringsmarkører øker etter leverreseksjon.

For å bekrefte etterforskernes første observasjon av spesifikk granulafrigjøring, vil blodplateaktivering overvåkes under leverregenerering. Spesielt vil etterforskerne evaluere blodplateaktiveringsmarkører i løpet av den perioperative perioden. På en beskrivende måte vil etterforskerne identifisere perioperative fluktuasjoner av blodplateaktivering som en refleksjon av fysiologiske prosesser under leverregenerering. Dette skulle gjøre det mulig for etterforskerne å belyse forekomsten av blodplateaktivering i menneskelige omgivelser, slik det er beskrevet i murine modeller. Enda viktigere er at etterforskernes analyse kan identifisere potensielle behandlingsmål hos pasienter med utilstrekkelig leverregenerering.

Hypotese nr. 2:

Innholdet av intraplategranula reduseres etter leverreseksjon.

Bioaktive molekyler lagret i blodplate-alfa-granulat (intra platelet - IP), vil bli evaluert i løpet av den perioperative perioden. Ettersom alle blodplater degranulerer under serumpreparering, vil IP-nivåer av granulatinnhold beregnes ved å trekke plasma fra serumvekstfaktorverdier. Videre for å bekrefte disse beregnede verdiene, vil blodplateekstrakter bli generert og sammenlignet analysert for IP-vekstfaktornivåer. Etterforskerne vil videre kunne identifisere perioperative fluktuasjoner av IP-vekstfaktorer som en refleksjon av spesifikk intrahepatisk frigjøring under leverregenerering, ved å sammenligne blodprøver før og én dag etter leverreseksjon.

Hypotese nr. 3:

Blodplater er lokalt beriket og aktivert på stedet for leverregenerering.

Under prosessen med en klassisk hemihepatektomi blir portvenen til svulsten som inneholder leverlappen initialt ligeret før mobilisering og disseksjon av leveren. Økningen av portaltrykket i den gjenværende leveren etter delvis hepatektomi antas å være den viktigste induseren av leverregenerering. (37-40) For å evaluere om blodplater spiller en kritisk rolle under prosessen med initiering av leverregenerering, vil vevsprøver bli tatt før portalveneligering og en time etter portalveneligering (på tidspunktet for initiering av leverregenerering)( studiedesign er illustrert i figur 3). Leverprøver vil deretter bli sammenlignet analysert for blodplateadhesjon og protein så vel som mRNA-ekspresjon.

For ytterligere å evaluere relevansen av blodplater i den tett regulerte prosessen med leverregenerering, vil blod bli samlet 1 time etter portalveneligering. Spesielt vil blod tas fra portvenen (før leveren) og fra en levervenen (etter leveren). Fra disse prøvene vil blodplater bli isolert og graden av aktivering vil bli evaluert (detaljer se nedenfor). Videre vil innholdet av IP-vekstfaktorer og blodplateekstrakter analyseres for å reflektere deres intrahepatiske frigjøring.

Hypotese nr. 4:

Perioperativ blodplateaktivering har innvirkning på postoperativt resultat

Det prediktive potensialet til blodplateaktiveringsmarkører og IP-vekstfaktorer for å identifisere pasienter med dårlig postoperativt klinisk resultat vil bli analysert. Som utfallsparametere vil postoperativ LD, morbiditet eller mortalitet bli evaluert. Disse analysene kan identifisere markører for å velge pasienter som ikke bør gjennomgå hepatektomi, men som er bedre tjent med alternative behandlinger. Videre kan potensielle behandlingsmål hos pasienter med utilstrekkelig leverregenerering identifiseres.