Trombocyter i leverregenerering

Utredarna kunde tidigare visa att blodplättshärledda tillväxtfaktorer som TSP-1 och 5-HT är av relevans för mänsklig leverregenerering. I detta projekt syftar utredarna till att belysa hur blodplättar specifikt frigör sina granuler. Medan täta granuler lagrade 5-HT inducerar proliferation av hepatocyter, minskar alfa-granuler lagrade TSP-1 deras proliferativa potential. Ännu viktigare är att olika pro-proliferativa tillväxtfaktorer som VEGF också lagras i alfa-granuler. Därför skulle en systemisk minskning av trombocytantalet minska både pro- och antiproliferativa faktorer. En mycket reglerad granulafrisättning har postulerats för att tillåta blodplättar att utöva specifika funktioner. År 2008, Italiano et al. presenterade övertygande in vitro-bevis för att blodplättar lagrar molekyler i separata granuler, som de specifikt kan frigöra vid trombocytaktivering. Dessutom stöder resultat från andra grupper detta fynd.

Syftet med detta projekt är att karakterisera trombocytaktivering hos patienter med leverresektion och avgöra om specifika trombocytaktiveringsprofiler korrelerar med kliniskt utfall.

Projekt plan

Inkluderade patienter:

Totalt kommer 40 patienter som genomgår hemihepatektomi att inkluderas. Patienterna kommer att övervakas noggrant perioperativt. Plasma-, serum-, trombocyt- och vävnadsberedning kommer att utföras enligt nedan.

Hypotes nr 1:

Cirkulerande trombocytaktiveringsmarkörer ökar efter leverresektion.

För att bekräfta utredarnas första observation av specifik granulafrisättning kommer trombocytaktivering att övervakas under leverregenerering. I synnerhet kommer utredarna att utvärdera trombocytaktiveringsmarkörer under den perioperativa perioden. På ett beskrivande sätt kommer utredarna att identifiera perioperativa fluktuationer av trombocytaktivering som en återspegling av fysiologiska processer under leverregenerering. Detta bör göra det möjligt för utredarna att klarlägga förekomsten av blodplättsaktivering i den mänskliga miljön, som det har beskrivits i murina modeller. Ännu viktigare är att utredarnas analyser kunde identifiera potentiella behandlingsmål hos patienter med otillräcklig leverregenerering.

Hypotes nr 2:

Innehållet av blodplättsgranula minskar efter leverresektion.

Bioaktiva molekyler lagrade i blodplätts-alfagranulat (intra blodplätt - IP), kommer att utvärderas under den perioperativa perioden. Eftersom alla blodplättar degranuleras under serumberedning kommer IP-nivåer av granulatinnehåll att beräknas genom subtraktion av plasma från serumtillväxtfaktorvärden. Dessutom för att bekräfta dessa beräknade värden kommer trombocytextrakt att genereras och jämförande analyseras för IP-tillväxtfaktornivåer. Utredarna kommer vidare att kunna identifiera perioperativa fluktuationer av IP-tillväxtfaktorer som en återspegling av specifik intrahepatisk frisättning under leverregenerering, genom att jämföra blodprover före och en dag efter leverresektion.

Hypotes nr 3:

Blodplättar berikas lokalt och aktiveras på platsen för leverregenerering.

Under processen med en klassisk hemihepatektomi ligeras portalvenen hos den tumörinnehållande leverloben initialt före mobilisering och dissektion av levern. Ökningen av portaltrycket i den återstående levern efter partiell hepatektomi tros vara den huvudsakliga induceraren av leverregenerering. (37-40) För att utvärdera om blodplättar spelar en avgörande roll under processen för initiering av leverregenerering, kommer vävnadsprover att tas före portalvenligering och en timme efter portalvenligering (vid tidpunkten för initiering av leverregenerering)( studiedesign illustreras i figur 3). Leverprover kommer sedan att analyseras jämförande för trombocytvidhäftning och protein samt mRNA-uttryck.

För att ytterligare utvärdera trombocyternas relevans i den hårt reglerade processen för leverregenerering, kommer blod att samlas in 1 timme efter portalvenligering. I synnerhet kommer blod att tas från portvenen (före levern) och från en leverven (efter levern). Från dessa prover kommer blodplättar att isoleras och graden av aktivering kommer att utvärderas (detaljer se nedan). Dessutom kommer innehållet av IP-tillväxtfaktorer och blodplättsextrakt att analyseras för att återspegla deras intrahepatiska frisättning.

Hypotes nr 4:

Peroperativ trombocytaktivering har en inverkan på postoperativt resultat

Den prediktiva potentialen för trombocytaktiveringsmarkörer och IP-tillväxtfaktorer för att identifiera patienter med dåligt postoperativt kliniskt resultat kommer att analyseras. Som resultatparametrar kommer postoperativ LD, morbiditet eller mortalitet att utvärderas. Dessa analyser kan identifiera markörer för att välja patienter som inte bör genomgå hepatektomi utan vara bättre betjänta av alternativa behandlingar. Dessutom kunde potentiella behandlingsmål hos patienter med otillräcklig leverregenerering identifieras.