肝再生における血小板

研究者らは以前、TSP-1 や 5-HT などの血小板由来の成長因子がヒトの肝臓再生に関連していることを示すことができました。 このプロジェクトでは、研究者は、血小板が具体的にどのように顆粒を放出するかを解明することを目指しています. 実際、5-HT を保存した高密度顆粒は肝細胞の増殖を誘導しますが、TSP-1 を保存したα-顆粒はその増殖能力を低下させます。 さらに重要なことに、VEGF などのさまざまな増殖促進因子もα顆粒に保存されます。 したがって、血小板数の全身的な減少は、増殖促進因子と抗増殖因子の両方を減少させます。 高度に調節された顆粒放出は、血小板が特定の機能を発揮できるようにするために仮定されています。 2008年、イタリアーノら。は、血小板が分子を別々の顆粒に保存し、血小板が活性化されると特異的に放出できるという説得力のある in vitro 証拠を提示しました。 さらに、他のグループによる結果もこの発見を裏付けています。

このプロジェクトの目的は、肝切除を受けた患者の血小板活性化を特徴付け、特定の血小板活性化プロファイルが臨床転帰と相関するかどうかを判断することです。

プロジェクト計画

含まれる患者:

片側肝切除を受ける合計 40 人の患者が含まれます。 患者は周術期に綿密に監視されます。 血漿、血清、血小板、および組織の調製は、以下に概説するように実施されます。

仮説1：

循環血小板活性化マーカーは、肝切除後に増加します。

特定の顆粒放出の研究者の最初の観察を確認するために、血小板の活性化は肝臓の再生中に監視されます。 特に、研究者は周術期に血小板活性化マーカーを評価します。 説明的な方法で、研究者は、肝再生中の生理学的プロセスの反映として、血小板活性化の周術期の変動を特定します。 これは、研究者がマウスモデルで説明されているように、人間の環境での血小板活性化の発生を解明できるようにする必要があります。 さらに重要なことは、研究者らの分析により、肝再生が不十分な患者の潜在的な治療標的を特定できる可能性があることです。

仮説2：

肝臓切除後、血小板顆粒内含有量は減少する。

血小板アルファ顆粒 (血小板内 - IP) に保存されている生理活性分子は、周術期に評価されます。 血清調製中にすべての血小板が脱顆粒するため、顆粒内容物の IP レベルは、血清成長因子値から血漿を差し引くことによって計算されます。 さらに、これらの計算値を確認するために、血小板抽出物が生成され、IP 成長因子レベルについて比較分析されます。 研究者はさらに、肝臓切除前と翌日の血液サンプルを比較することにより、肝臓再生中の特定の肝臓内放出の反映として、IP 成長因子の周術期変動を特定することができます。

仮説3：

血小板は、肝臓の再生部位で局所的に濃縮および活性化されます。

古典的な半肝切除の過程で、肝葉を含む腫瘍の門脈は、動員および肝臓の解剖の前に最初に結紮される。 部分肝切除後の残りの肝臓内の門脈圧の増加は、肝再生の主要な誘導因子であると考えられています。 (37-40) 肝再生の開始過程で血小板が重要な役割を果たしているかどうかを評価するために、門脈結紮の前と門脈結紮の 1 時間後 (肝再生の開始時) に組織標本を採取します (研究デザインを図 3 に示します)。 次いで、肝臓標本を、血小板接着およびタンパク質ならびにｍＲＮＡ発現について比較分析する。

厳しく規制された肝臓再生のプロセスにおける血小板の関連性をさらに評価するために、門脈結紮の1時間後に血液を採取します。 特に、血液は門脈 (肝臓の前) と肝静脈 (肝臓の後) から引き出されます。 これらのサンプルから血小板が分離され、活性化の程度が評価されます (詳細は以下を参照)。 さらに、IP成長因子と血小板抽出物の含有量を分析して、それらの肝内放出を反映します。

仮説4：

周術期の血小板活性化は術後転帰に影響を与える

術後の臨床転帰が不良な患者を特定するための血小板活性化マーカーとIP成長因子の予測可能性が分析されます。 結果パラメータとして、術後のLD、罹患率または死亡率が評価されます。 これらの分析は、肝切除を受けるべきではないが、代替治療により役立つ患者を選択するためのマーカーを特定する可能性があります。 さらに、肝再生が不十分な患者の潜在的な治療標的を特定することができました。