Blodplader i leverregenerering

Forskerne kunne tidligere vise, at blodpladeafledte vækstfaktorer som TSP-1 og 5-HT er relevante i human leverregenerering. I dette projekt sigter efterforskerne på at belyse, hvordan blodplader specifikt frigiver deres granula. Faktisk, mens tætte granulat lagret 5-HT inducerer proliferation af hepatocytter, reducerer alfa-granulat lagret TSP-1 deres proliferative potentiale. Endnu vigtigere er forskellige pro-proliferative vækstfaktorer som VEGF også lagret i alfa-granulat. Derfor vil en systemisk reduktion i blodpladetal reducere både pro- og anti-proliferative faktorer. En højt reguleret granulafrigivelse er blevet postuleret for at tillade blodplader at udøve specifikke funktioner. I 2008, Italiano et al. præsenteret overbevisende in vitro-bevis på, at blodplader opbevarer molekyler i separate granula, som de er i stand til specifikt at frigive ved blodpladeaktivering. Desuden understøtter resultater fra andre grupper denne konstatering.

Det er formålet med dette projekt at karakterisere trombocytaktivering hos patienter med leverresektion og afgøre, om specifikke trombocytaktiveringsprofiler korrelerer med det kliniske resultat.

Projektplan

Inkluderede patienter:

I alt 40 patienter, der gennemgår hemihepatektomi, vil blive inkluderet. Patienterne vil blive nøje overvåget perioperativt. Plasma-, serum-, blodplade- og vævsforberedelse vil blive udført som beskrevet nedenfor.

Hypotese nr. 1:

Cirkulerende blodpladeaktiveringsmarkører stiger efter leverresektion.

For at bekræfte efterforskernes første observation af specifik granulafrigivelse vil blodpladeaktivering blive overvåget under leverregenerering. Især vil efterforskerne evaluere blodpladeaktiveringsmarkører i den perioperative periode. På en beskrivende måde vil efterforskerne identificere perioperative fluktuationer af blodpladeaktivering som en afspejling af fysiologiske processer under leverregenerering. Dette skulle gøre det muligt for efterforskerne at belyse forekomsten af ​​blodpladeaktivering i menneskelige omgivelser, som det er blevet beskrevet i murine modeller. Endnu vigtigere er det, at efterforskernes analyser kunne identificere potentielle behandlingsmål hos patienter med utilstrækkelig leverregenerering.

Hypotese nr. 2:

Intra blodpladegranulaindhold falder efter leverresektion.

Bioaktive molekyler lagret i blodplade-alfa-granulat (intra blodplade - IP), vil blive evalueret i den perioperative periode. Da alle blodplader degranulerer under serumpræparation, vil IP-niveauer af granulatindhold blive beregnet ved subtraktion af plasma fra serumvækstfaktorværdier. For at bekræfte disse beregnede værdier vil blodpladeekstrakter blive genereret og sammenlignet analyseret for IP-vækstfaktorniveauer. Forskerne vil yderligere være i stand til at identificere perioperative fluktuationer af IP-vækstfaktorer som en afspejling af specifik intrahepatisk frigivelse under leverregenerering ved at sammenligne blodprøver før og en dag efter leverresektion.

Hypotese nr. 3:

Blodplader beriges lokalt og aktiveres på stedet for leverregenerering.

Under processen med en klassisk hemihepatektomi ligeres portvenen i den tumorholdige leverlap indledningsvis før mobilisering og dissektion af leveren. Forøgelsen af ​​portaltrykket i den resterende lever efter partiel hepatektomi menes at være den vigtigste inducer af leverregenerering. (37-40) For at vurdere, om blodplader spiller en kritisk rolle under processen med påbegyndelse af leverregenerering, vil vævsprøver blive indsamlet før portalveneligering og en time efter portalveneligaring (på tidspunktet for initiering af leverregenerering)( studiedesign er illustreret i figur 3). Leverprøver vil derefter blive sammenlignet analyseret for blodpladeadhæsion og protein samt mRNA-ekspression.

For yderligere at evaluere relevansen af ​​blodplader i den stramt regulerede proces med leverregenerering, vil der blive opsamlet blod 1 time efter portalvene ligering. Især vil der blive udtaget blod fra portvenen (før leveren) og fra en levervene (efter leveren). Fra disse prøver vil blodplader blive isoleret, og graden af ​​aktivering vil blive evalueret (detaljer se nedenfor). Endvidere vil indholdet af IP vækstfaktorer og blodpladeekstrakter blive analyseret for at afspejle deres intrahepatiske frigivelse.

Hypotese nr. 4:

Perioperativ blodpladeaktivering har en indvirkning på postoperativt resultat

Det forudsigelige potentiale af blodpladeaktiveringsmarkører og IP-vækstfaktorer til at identificere patienter med dårligt postoperativt klinisk resultat vil blive analyseret. Som udfaldsparametre vil postoperativ LD, morbiditet eller mortalitet blive evalueret. Disse analyser kan identificere markører til at udvælge patienter, der ikke bør gennemgå hepatektomi, men være bedre tjent med alternative behandlinger. Desuden kunne potentielle behandlingsmål hos patienter med utilstrækkelig leverregenerering identificeres.