Plaquettes dans la régénération du foie

Les chercheurs ont pu montrer précédemment que les facteurs de croissance dérivés des plaquettes comme TSP-1 et 5-HT sont pertinents dans la régénération du foie humain. Dans ce projet, les chercheurs visent à élucider comment les plaquettes libèrent spécifiquement leurs granules. En effet, alors que les granules denses stockées en 5-HT induisent la prolifération des hépatocytes, les granules alpha stockées en TSP-1 réduisent leur potentiel prolifératif. Plus important encore, divers facteurs de croissance pro-prolifératifs comme le VEGF sont également stockés dans des granules alpha. Par conséquent, une réduction systémique du nombre de plaquettes réduirait à la fois les facteurs pro et antiprolifératifs. Une libération de granules hautement régulée a été postulée pour permettre aux plaquettes d'exercer des fonctions spécifiques. En 2008, Italiano et al. ont présenté des preuves in vitro convaincantes que les plaquettes stockent des molécules dans des granules séparés, qu'elles sont capables de libérer spécifiquement lors de l'activation des plaquettes. De plus, les résultats d'autres groupes appuient cette constatation.

L'objectif de ce projet est de caractériser l'activation plaquettaire chez les patients ayant subi une résection hépatique et de déterminer si des profils spécifiques d'activation plaquettaire sont corrélés avec les résultats cliniques.

Plan de projet

Patients inclus :

Au total, 40 patients subissant une hémihépatectomie seront inclus. Les patients seront étroitement surveillés en périopératoire. La préparation du plasma, du sérum, des plaquettes et des tissus sera effectuée comme indiqué ci-dessous.

Hypothèse n°1 :

Les marqueurs circulants d'activation plaquettaire augmentent après résection hépatique.

Pour confirmer l'observation initiale des enquêteurs de la libération de granules spécifiques, l'activation plaquettaire sera surveillée pendant la régénération du foie. En particulier, les chercheurs évalueront les marqueurs d'activation plaquettaire pendant la période périopératoire. De manière descriptive, les chercheurs identifieront les fluctuations périopératoires de l'activation plaquettaire comme reflet des processus physiologiques au cours de la régénération du foie. Cela devrait permettre aux chercheurs d'élucider la survenue d'une activation plaquettaire chez l'homme, telle qu'elle a été décrite dans des modèles murins. Plus important encore, les analyses des investigateurs pourraient identifier des cibles thérapeutiques potentielles chez les patients dont la régénération hépatique est insuffisante.

Hypothèse n°2 :

Le contenu des granules intraplaquettaires diminue après résection hépatique.

Les molécules bioactives stockées dans les granules alpha plaquettaires (intra plaquettaire - IP), seront évaluées pendant la période périopératoire. Comme lors de la préparation du sérum, toutes les plaquettes dégranulent, les niveaux IP du contenu des granules seront calculés en soustrayant le plasma des valeurs du facteur de croissance sérique. De plus, pour confirmer ces valeurs calculées, des extraits de plaquettes seront générés et analysés de manière comparative pour les niveaux de facteur de croissance IP. Les chercheurs pourront en outre identifier les fluctuations périopératoires des facteurs de croissance IP comme reflet de la libération intrahépatique spécifique pendant la régénération du foie, en comparant les échantillons de sang avant et un jour après la résection hépatique.

Hypothèse n°3 :

Les plaquettes sont localement enrichies et activées au site de régénération du foie.

Au cours du processus d'une hémihépatectomie classique, la veine porte de la tumeur contenant le lobe du foie est initialement ligaturée avant la mobilisation et la dissection du foie. On pense que l'augmentation de la pression portale dans le foie restant après une hépatectomie partielle est le principal inducteur de la régénération du foie. (37-40) Pour évaluer si les plaquettes jouent un rôle critique au cours du processus d'initiation de la régénération du foie, des échantillons de tissus seront prélevés avant la ligature de la veine porte et une heure après la ligature de la veine porte (au moment de l'initiation de la régénération du foie)( la conception de l'étude est illustrée à la figure 3). Les échantillons de foie seront ensuite analysés de manière comparative pour l'adhésion plaquettaire et les protéines ainsi que l'expression de l'ARNm.

Pour évaluer davantage la pertinence des plaquettes dans le processus étroitement régulé de régénération du foie, le sang sera prélevé 1 heure après la ligature de la veine porte. En particulier, le sang sera prélevé de la veine porte (avant le foie) et d'une veine hépatique (après le foie). A partir de ces échantillons, les plaquettes seront isolées et le degré d'activation sera évalué (détails voir ci-dessous). De plus, le contenu des facteurs de croissance IP et des extraits plaquettaires sera analysé pour refléter leur libération intrahépatique.

Hypothèse n°4 :

L'activation plaquettaire périopératoire a un impact sur les résultats postopératoires

Le potentiel prédictif des marqueurs d'activation plaquettaire et des facteurs de croissance IP pour identifier les patients présentant de mauvais résultats cliniques postopératoires sera analysé. Comme paramètres de résultats, la LD postopératoire, la morbidité ou la mortalité seront évaluées. Ces analyses pourraient identifier des marqueurs pour sélectionner les patients qui ne devraient pas subir d'hépatectomie mais qui seraient mieux servis avec des traitements alternatifs. De plus, des cibles thérapeutiques potentielles chez les patients dont la régénération hépatique est insuffisante ont pu être identifiées.