Blutplättchen in der Leberregeneration

Die Forscher konnten zuvor zeigen, dass von Blutplättchen abgeleitete Wachstumsfaktoren wie TSP-1 und 5-HT für die menschliche Leberregeneration von Bedeutung sind. In diesem Projekt wollen die Forscher aufklären, wie Blutplättchen gezielt ihre Granula freisetzen. Während in dichtem Granulat gespeichertes 5-HT die Proliferation von Hepatozyten induziert, verringert in Alpha-Granula gespeichertes TSP-1 tatsächlich ihr proliferatives Potenzial. Noch wichtiger ist, dass verschiedene proproliferative Wachstumsfaktoren wie VEGF auch in Alpha-Granula gespeichert werden. Daher würde eine systemische Verringerung der Blutplättchenzahlen sowohl pro- als auch antiproliferative Faktoren verringern. Es wurde eine stark regulierte Granulafreisetzung postuliert, um es Blutplättchen zu ermöglichen, spezifische Funktionen auszuüben. Im Jahr 2008 stellten Italiano et al. präsentierten überzeugende In-vitro-Beweise dafür, dass Blutplättchen Moleküle in getrennten Granula speichern, die sie bei Aktivierung der Blutplättchen spezifisch freisetzen können. Darüber hinaus unterstützen Ergebnisse anderer Gruppen diesen Befund.

Ziel dieses Projekts ist es, die Thrombozytenaktivierung bei Patienten mit Leberresektion zu charakterisieren und festzustellen, ob spezifische Thrombozytenaktivierungsprofile mit dem klinischen Ergebnis korrelieren.

Projektplan

Eingeschlossene Patienten:

Insgesamt 40 Patienten, die sich einer Hemihepatektomie unterziehen, werden eingeschlossen. Die Patienten werden perioperativ engmaschig überwacht. Die Plasma-, Serum-, Blutplättchen- und Gewebepräparation wird wie unten beschrieben durchgeführt.

Hypothese Nr. 1:

Zirkulierende Thrombozytenaktivierungsmarker steigen nach Leberresektion an.

Um die anfängliche Beobachtung der Ermittler einer spezifischen Granulafreisetzung zu bestätigen, wird die Blutplättchenaktivierung während der Leberregeneration überwacht. Insbesondere werden die Prüfärzte während der perioperativen Phase Thrombozytenaktivierungsmarker auswerten. Auf anschauliche Weise werden die Forscher perioperative Schwankungen der Thrombozytenaktivierung als Spiegelung physiologischer Prozesse während der Leberregeneration identifizieren. Dies sollte es den Forschern ermöglichen, das Auftreten der Thrombozytenaktivierung im menschlichen Umfeld aufzuklären, wie es in murinen Modellen beschrieben wurde. Noch wichtiger ist, dass die Analysen der Forscher potenzielle Behandlungsziele bei Patienten mit unzureichender Leberregeneration identifizieren konnten.

Hypothese Nr. 2:

Der Inhalt der intrathrombozytären Granula nimmt nach Leberresektion ab.

Bioaktive Moleküle, die in Thrombozyten-Alpha-Granula (intra Thrombozyten - IP) gespeichert sind, werden während der perioperativen Phase bewertet. Da während der Serumpräparation alle Blutplättchen degranulieren, werden die IP-Spiegel des Granulainhalts durch Subtraktion des Plasmas von den Serumwachstumsfaktorwerten berechnet. Um diese berechneten Werte zu bestätigen, werden außerdem Thrombozytenextrakte erzeugt und vergleichend auf IP-Wachstumsfaktorspiegel analysiert. Die Forscher werden außerdem in der Lage sein, perioperative Schwankungen von IP-Wachstumsfaktoren als Widerspiegelung einer spezifischen intrahepatischen Freisetzung während der Leberregeneration zu identifizieren, indem sie Blutproben vor und einen Tag nach der Leberresektion vergleichen.

Hypothese Nr. 3:

Thrombozyten werden lokal am Ort der Leberregeneration angereichert und aktiviert.

Bei der klassischen Hemihepatektomie wird zunächst die Pfortader des tumortragenden Leberlappens ligiert, bevor die Leber mobilisiert und präpariert wird. Es wird angenommen, dass der Anstieg des Pfortaderdrucks innerhalb der verbleibenden Leber nach partieller Hepatektomie der Hauptauslöser der Leberregeneration ist. (37-40) Um zu beurteilen, ob Blutplättchen während des Prozesses der Einleitung der Leberregeneration eine entscheidende Rolle spielen, werden Gewebeproben vor der Pfortaderligatur und eine Stunde nach der Pfortaderligatur (zum Zeitpunkt der Einleitung der Leberregeneration) entnommen. Studiendesign ist in Abbildung 3 dargestellt). Leberproben werden dann vergleichend auf Thrombozytenadhäsion und Protein sowie mRNA-Expression analysiert.

Um die Relevanz von Blutplättchen im streng regulierten Prozess der Leberregeneration weiter zu bewerten, wird Blut 1 Stunde nach Pfortaderligatur entnommen. Insbesondere wird Blut aus der Pfortader (vor der Leber) und aus einer Lebervene (nach der Leber) entnommen. Aus diesen Proben werden Blutplättchen isoliert und der Grad der Aktivierung bestimmt (Details siehe unten). Darüber hinaus wird der Gehalt an IP-Wachstumsfaktoren und Thrombozytenextrakten analysiert, um deren intrahepatische Freisetzung widerzuspiegeln.

Hypothese Nr. 4:

Die perioperative Thrombozytenaktivierung hat einen Einfluss auf das postoperative Ergebnis

Das Vorhersagepotenzial von Thrombozytenaktivierungsmarkern und IP-Wachstumsfaktoren zur Identifizierung von Patienten mit schlechtem postoperativem klinischen Ergebnis wird analysiert. Als Outcome-Parameter werden postoperative LD, Morbidität oder Mortalität evaluiert. Diese Analysen könnten Marker identifizieren, um Patienten auszuwählen, die sich keiner Hepatektomie unterziehen sollten, aber mit alternativen Behandlungen besser bedient werden sollten. Darüber hinaus konnten potenzielle Behandlungsziele bei Patienten mit unzureichender Leberregeneration identifiziert werden.