Epiteliale mesenkymale overgangsmarkører i OSMF
Risikovurdering av ondartet transformasjon i oral submukøs fibrose ved bruk av epitelial mesenkymal overgang (EMT) signaturer i vevsprøver og spytt
Oral sub mucous fibrose (OSMF) er i hovedsak en ubalanse mellom kollagenmetabolisme og sårhelingsmekanisme indusert av arecanut tyggevaner. Klinisk utvikler sykdommen seg i stadier med pasienter med brennende følelse, intoleranse mot krydret mat, vesikler spesielt på ganen, sårdannelse og munntørrhet, fibrose i munnslimhinnen, noe som fører til stivhet i lepper, tunge og gane og til slutt trismus. Siden sykdommen er progressivt svekkende og har potensial til å gå over til ondartet kreft, ble det utviklet en studie for å vurdere om det er noen vevs- eller spyttmarkører som kan vurderes for tidlig diagnose og indikere malign transformasjon hvis noen.
Deltakere som hadde OSMF og vanehistorie, pasienter uten OSMF men vanehistorie utgjorde casegruppen der som normale pasienter uten OSMF og ingen vanehistorie var i kontrollgruppen. Kvalifiserte kandidater som samtykket til å delta i studien ble utsatt for biopsiprosedyre og også spyttprøvene deres ble samlet inn. Biopsiprøver ble utsatt for immunhistokjemi (IHC) og polymerasekjedereaksjon (PCR) for å vurdere EMT-markørene som vimentin, e-cadherin og kollagen IV. miRNA-kopier ble ekstrahert fra spytt og ble utsatt for RT-PCR.
Forskningsspørsmålet var:
- Er EMT en positiv signatur i OSMF.
- Har histopatologisk gradering og dysplasi i OSMF noen sammenheng med EMT.
- Kan avvikende EMT-markører være en pålitelig indikator for risikovurdering av tidlig malign transformasjon.
- Kan uttrykk for mi RNA 21 i spytt forutsi alvorlighetsgraden av sykdommen og enda viktigere vurdere risikoen for tidlig ondartet transformasjon i OSMF.
Studieoversikt
Status
Forhold
Intervensjon / Behandling
Detaljert beskrivelse
Epitel-mesenkymal overgang (EMT) beskriver prosessen der celler mister sine epiteliale egenskaper og adopterer en mer mesenkymal og invasiv fenotype. En kontinuerlig molekylær krysstale mellom epitel- og mesenkymale celler er nødvendig under embryonal utvikling (epitelial mesenkymal overgang) og spiller sannsynligvis en viktig rolle i patologisk prosess som sårheling og tumorprogresjon. Utviklingen av karsinomer skyldes de genetiske endringene i målepitelet. Ettersom det er konvertering av normalt epitel til potensielt ondartet og til plateepitelkarsinom, endres stroma også fra normalt til aktivert eller svulst assosiert kalt stromal reaksjon. 10 EMT kan generere mesenkymale celler som uttrykker α-glattmuskelaktin (αSMA), som sett i myofibroblaster. Det er imidlertid uklart om funksjonelle myofibroblaster sett i fibrose eller kreft avledet fra epitel- eller endotelceller
Derfor ble EMT-markører i OSMF vurdert i denne studien. følgende markører valgt som:
- miRNA-21 regulerer celleproliferasjon, apoptose og epitel- til mesenkymal overgang under neoplastisk progresjon og er oppregulert i en rekke kreftformer. Et økt uttrykk av miRNA-21 sees i myofibroblaster.12 Siden vi kjenner rollen til myofibroblaster i OSMF, ble spyttekspresjon av mi RNA-21 inkludert som markør.
- Type IV kollagen har den unike egenskapen til å assosiere seg selv gjennom intramolekylære kovalente bindinger, og gir barriere- og mekanisk styrkeegenskaper til basalmembraner. Den økte kollagenavsetningen i OSMF involverer mange fibroblaster som omdannes til myofibroblaster som finnes i histologiske seksjoner av vevsprøver. et endret mikromiljø eller stroma som vedvarende myofibroblaster har vist seg å resultere i tumorgenese og tumorprogresjon
Cadheriner er en klasse av type-1 transmembranproteiner kjent for sin kalsiumavhengige cellecelleadhesjonsegenskap. E-cadheriner er medlemmer av denne proteinfamilien som finnes i epitelceller som tjener viktige roller i celleadhesjon ved å sikre at celler i vev er bundet sammen. Tapet av E-cadherin-funksjon eller uttrykk har vært involvert i kreftprogresjon og metastase. E-cadherin-uttrykk i hode- og nakkeepitel er avgjørende for morfogenese og homeostase av epitelvev. De cadherin-medierte celle-celle-kontaktene er nødvendige for den forankringsavhengige veksten av epitelceller.
Derfor er lavere ekspresjon av E-cadherin et tegn på tap av epitelial integritet
- Mellomfilamentproteinet vimentin er involvert i reguleringen av celleadferd, morfologi og mekaniske egenskaper. Vimentin er en EMT-markør uttrykt i bindevev. Ekspresjon av vimentin i epitel er en positiv signatur av EMT, og evalueringen i OSMF kan avsløre viktigheten av EMT-signatur ved oral fibrose.
Studietype
Registrering (Faktiske)
Deltakelseskriterier
Kvalifikasjonskriterier
Alder som er kvalifisert for studier
Tar imot friske frivillige
Kjønn som er kvalifisert for studier
Prøvetakingsmetode
Studiepopulasjon
Beskrivelse
Inklusjonskriterier:
- Enhver pasient som har hatt en historie med tyggevaner for nøtt med kliniske manifestasjoner av OSMF.
- Pasienter som hadde en historie på en tyggevane på nøtt i mer enn 1 år og som ikke hadde noen kliniske symptomer på OSMF.
- Friske frivillige som er indisert for tanntrekking og hadde ingen kliniske trekk ved OSMF og hadde ingen vanehistorie
Ekskluderingskriterier:
- Pasienter som hadde blødningsforstyrrelser
- pasienter som er diagnostisert med spyttkjertellidelser som kan endre spyttstrømmen eller sammensetningen
Studieplan
Hvordan er studiet utformet?
Designdetaljer
Kohorter og intervensjoner
Gruppe / Kohort |
Intervensjon / Behandling |
|---|---|
|
Pasient med vaner og med OSMF
Pasienter som har hatt en historie med tyggevaner for nøtt i noen form og sammensetning og som ikke har gjennomgått noen behandling for sin nåværende tilstand, dvs. OSMF
|
biopsiprøver for IHC-farging og PCR
Spyttprøver for miRNA 21-ekspresjonsanalyse
|
|
Pasienter med vaner og hadde ingen kliniske symptomer på OSMF
Pasienter som hadde en historie med tyggevaner av arecanut i noen form og sammensetning og som ikke hadde kliniske symptomer på OSMF
|
biopsiprøver for IHC-farging og PCR
Spyttprøver for miRNA 21-ekspresjonsanalyse
|
|
Friske frivillige mennesker
pasienter som ikke rapporterte noen historie med areanøtttyggevaner og som ikke hadde noen kliniske symptomer på OSMF
|
biopsiprøver for IHC-farging og PCR
Spyttprøver for miRNA 21-ekspresjonsanalyse
|
Hva måler studien?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Endring i uttrykk for E-cadherinnivåer i alle gruppene i IHC
Tidsramme: 10 dager fra prøvetaking
|
For IHC: Kriteriene som ble brukt for å definere E-cadherin-positive celler var brunfarging i cellemembranen til epitelceller; prosentandelen av positivt fargede celler ble skåret som - Prosentandel av POSITIVE CELLER POENG Ingen celler 0 ≤ 10 % 1 11 % -50 % 2 51 %-80 % 3 ≥81 % 4 Fargingsintensitet ble også vurdert sammenlignet med det positive kontrollvevet og skåret deretter INTENSITETSPOENGING Negativ 0 Svak 1 Moderat 2 Sterk 3 |
10 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i uttrykk for vimentinnivåer i alle gruppene i IHC
Tidsramme: 10 dager fra prøvetaking
|
vimentin-positive celler var brunfarging i cytoplasma til epitelceller; prosentandelen av positivt fargede celler ble skåret som - Prosentandel av POSITIVE CELLER POENG Ingen celler 0 ≤ 10 % 1 11 % -50 % 2 51 %-80 % 3 ≥81 % 4 Fargingsintensitet ble også vurdert sammenlignet med det positive kontrollvevet og skåret deretter INTENSITETSPOENGING Negativ 0 Svak 1 Moderat 2 Sterk 3 |
10 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i uttrykk for kollagen IV-nivåer i alle gruppene i IHC
Tidsramme: 10 dager fra prøvetaking
|
kollagen IV positive celler var brunfarging i basalmembranceller; prosentandelen av positivt fargede celler ble skåret som - Prosentandel av POSITIVE CELLER POENG Ingen celler 0 ≤ 10 % 1 11 % -50 % 2 51 %-80 % 3 ≥81 % 4 Fargingsintensitet ble også vurdert sammenlignet med det positive kontrollvevet og skåret deretter INTENSITETSPOENGING Negativ 0 Svak 1 Moderat 2 Sterk 3 |
10 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i uttrykk for miRNA 21 i alle tre gruppene ved bruk av Real Time-PCR
Tidsramme: 10 dager fra prøvetaking
|
Tatt i betraktning uttrykket av miRNA21 i normal prøve (N) som 1, ble uttrykket for alle prøvene beregnet. Formelen som brukes er: antall kopier = (mengde * 6,022x1023) / (lengde * 1x109 * 650)
|
10 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i E cadherin nivåer i PCR
Tidsramme: 20 dager etter prøvetaking
|
Etter ekstraksjon av DNA fra biopsiprøver ble primerne for E-cadherin designet ved bruk av Primer Express-programvare, syntetisert og HPLC-renset for sanntids PCR for kvantifisering.
|
20 dager etter prøvetaking
|
|
Endring i vimentinnivåer i PCR
Tidsramme: 20 dager etter prøvetaking
|
Etter ekstraksjon av DNA fra biopsiprøvene ble primerne for Vimentin designet ved bruk av Primer Express-programvare, syntetisert og HPLC-renset for sanntids PCR for kvantifisering
|
20 dager etter prøvetaking
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Endring i e-cadherin-uttrykk med hensyn til sykdomskategori klinisk hos OSMF-pasienter med vaner
Tidsramme: 15 dager fra prøvetaking
|
E cadherin nivå i vevsprøver med hensyn til ulike kliniske uttrykk for sykdom i henhold til Kerr et al klassifiseringssystem.
|
15 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i e-cadherin-uttrykk med hensyn til sykdomskategori histologisk hos OSMF-pasienter med vaner
Tidsramme: 15 dager fra prøvetaking
|
E cadherinnivå i vevsprøver med hensyn til ulike kliniske uttrykk for sykdom i henhold til klassifiseringssystem Kanna og Andrade et al.
|
15 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i vimentinuttrykk med hensyn til sykdomskategori klinisk hos OSMF-pasienter med vaner
Tidsramme: 15 dager fra prøvetaking
|
Vimentinnivå i vevsprøver med hensyn til forskjellig klinisk uttrykk i henhold til Kerr et al klassifiseringssystem.
|
15 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i vimentinekspresjon med hensyn til sykdomskategori histologisk hos OSMF-pasienter med vaner
Tidsramme: 15 dager fra prøvetaking
|
Vimentinnivå i vevsprøver med hensyn til forskjellig histologisk uttrykk i henhold til Khanna og Andrade klassifiseringssystem.
|
15 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i kollagen IV-uttrykk med hensyn til sykdomskategori klinisk hos OSMF-pasienter med vaner
Tidsramme: 15 dager fra prøvetaking
|
Kollagen-IV-nivå i vevsprøver med hensyn til ulike kliniske uttrykkskategorier i henhold til Kerr et al klassifiseringssystem.
|
15 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i kollagen IV-uttrykk med hensyn til sykdomskategori hstologisk hos OSMF-pasienter med vaner
Tidsramme: 15 dager fra prøvetaking
|
Kollagen-IV nivå i vevsprøver med hensyn til forskjellig histologisk uttrykk i henhold til Khanna og Andred et al klassifiseringssystem.
|
15 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i mi RNA 21-ekspresjon med hensyn til sykdomskategori klinisk hos OSMF-pasienter med vaner
Tidsramme: 15 dager fra prøvetaking
|
miRNA 21-nivå i spyttprøver med hensyn til forskjellige kliniske uttrykk av OSMF i henhold til Kerr et al klassifiseringssystem.
|
15 dager fra prøvetaking
|
|
Endring i mi RNA 21-ekspresjon med hensyn til sykdomskategori histologisk hos OSMF-pasienter med vaner
Tidsramme: 15 dager fra prøvetaking
|
miRNA 21-nivå i spyttprøver med hensyn til forskjellig histologisk uttrykk i henhold til Khanna og Andred et al klassifiseringssystem.
|
15 dager fra prøvetaking
|
Samarbeidspartnere og etterforskere
Samarbeidspartnere
Publikasjoner og nyttige lenker
Generelle publikasjoner
- Yang Y, Li YX, Yang X, Jiang L, Zhou ZJ, Zhu YQ. Progress risk assessment of oral premalignant lesions with saliva miRNA analysis. BMC Cancer. 2013 Mar 19;13:129. doi: 10.1186/1471-2407-13-129.
- Sawant SS, Vaidya Mm, Chaukar DA, Alam H, Dmello C, Gangadaran P, Kannan S, Kane S, Dange PP, Dey N, Ranganathan K, D'Cruz AK. Clinical significance of aberrant vimentin expression in oral premalignant lesions and carcinomas. Oral Dis. 2014 Jul;20(5):453-65. doi: 10.1111/odi.12151. Epub 2013 Jul 19.
- Pinto GA, Vassallo J, Andrade LA, Magna LA. Immunohistochemical study of basement membrane collagen IV in uterine cervix carcinoma. Sao Paulo Med J. 1998 Nov-Dec;116(6):1846-51. doi: 10.1590/s1516-31801998000600004.
Studierekorddatoer
Studer hoveddatoer
Studiestart (FAKTISKE)
Primær fullføring (FAKTISKE)
Studiet fullført (FAKTISKE)
Datoer for studieregistrering
Først innsendt
Først innsendt som oppfylte QC-kriteriene
Først lagt ut (FAKTISKE)
Oppdateringer av studieposter
Sist oppdatering lagt ut (FAKTISKE)
Siste oppdatering sendt inn som oppfylte QC-kriteriene
Sist bekreftet
Mer informasjon
Begreper knyttet til denne studien
Nøkkelord
Ytterligere relevante MeSH-vilkår
Andre studie-ID-numre
- Oxford DC
Plan for individuelle deltakerdata (IPD)
Planlegger du å dele individuelle deltakerdata (IPD)?
Legemiddel- og utstyrsinformasjon, studiedokumenter
Studerer et amerikansk FDA-regulert medikamentprodukt
Studerer et amerikansk FDA-regulert enhetsprodukt
Denne informasjonen ble hentet direkte fra nettstedet clinicaltrials.gov uten noen endringer. Hvis du har noen forespørsler om å endre, fjerne eller oppdatere studiedetaljene dine, vennligst kontakt register@clinicaltrials.gov. Så snart en endring er implementert på clinicaltrials.gov, vil denne også bli oppdatert automatisk på nettstedet vårt. .