OSMFにおける上皮間葉転換マーカー
組織サンプルおよび唾液中の上皮間葉転換 (EMT) シグネチャを使用した口腔粘膜下線維症における悪性形質転換のリスク評価
口腔粘膜下線維症 (OSMF) は、本質的に、コラーゲン代謝と、アレカナッツを噛む習慣によって引き起こされる創傷治癒メカニズムとの間の不均衡です。 臨床的には、この疾患は段階的に進行し、灼熱感、辛い食べ物への不耐性、特に口蓋の小水疱、口の潰瘍化と乾燥、口腔粘膜の線維化、唇、舌、口蓋の硬直、そして最終的に開口障害を呈します。 この疾患は次第に衰弱し、悪性癌に変わる可能性があるため、早期診断のために評価できる組織または唾液マーカーが存在するかどうかを評価し、もしあれば悪性転換を示す研究が設計されました。
OSMFと習慣歴のある参加者、OSMFはないが習慣歴のある患者がケースグループを形成し、OSMFと習慣歴のない通常の患者は対照群でした。 研究への参加に同意した適格な候補者は、生検手順を受け、唾液サンプルも収集されました。 生検サンプルを免疫組織化学 (IHC) およびポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) にかけ、ビメンチン、e-カドヘリン、コラーゲン IV などの EMT マーカーを評価しました。 miRNA コピーを唾液から抽出し、RT-PCR にかけました。
リサーチクエスチョンは:
- EMT は OSMF の肯定的な署名ですか。
- OSMF の組織病理学的等級付けと異形成は、EMT と何らかの相関がありますか。
- 異常な EMT マーカーは、初期の悪性転換のリスク評価の信頼できる指標になり得るか。
- 唾液中の mi RNA 21 の発現は、疾患の重症度を予測し、さらに重要なことには、OSMF における初期の悪性転換のリスクを評価できます。
調査の概要
詳細な説明
上皮間葉転換 (EMT) は、細胞がその上皮特性を脱ぎ捨て、より間葉的で侵襲的な表現型を採用するプロセスを表します。 上皮細胞と間葉細胞の間の継続的な分子クロストークは、胚発生 (上皮間葉転換) 中に必要であり、おそらく創傷治癒や腫瘍進行などの病理学的プロセスで重要な役割を果たしています。 がんの発生は、標的上皮内の遺伝子変化によるものです。 正常な上皮が潜在的な悪性および扁平上皮癌に変換されると、間質も正常から活性化または間質反応と呼ばれる腫瘍関連に変化します。 10 EMT は、筋線維芽細胞に見られるように、α-平滑筋アクチン (αSMA) を発現する間葉系細胞を生成できます。 しかし、機能性筋線維芽細胞が線維症または上皮細胞または内皮細胞に由来する癌に見られるかどうかは不明です。
したがって、OSMFのEMTマーカーは、この研究で評価されました。 次のマーカーとして選択:
- miRNA-21 は、腫瘍の進行中の細胞増殖、アポトーシス、および上皮から間葉への移行を調節し、さまざまな癌でアップレギュレートされます。 OSMF における筋線維芽細胞の役割がわかっているため、mi RNA-21 の唾液発現をマーカーとして含めました。
- IV 型コラーゲンは、分子内共有結合を介して自己会合するという独自の特徴を持ち、基底膜にバリアおよび機械的強度特性を提供します。 永続的な筋線維芽細胞などの変化した微小環境または間質は、腫瘍形成および腫瘍進行をもたらすことが示されています
カドヘリンは、そのカルシウム依存性細胞間接着特性で知られるタイプ 1 膜貫通タンパク質のクラスです。 E-カドヘリンは、上皮細胞に見られるこのタンパク質ファミリーのメンバーであり、組織内の細胞が互いに結合することを保証することにより、細胞接着において重要な役割を果たします。 E-カドヘリンの機能または発現の喪失は、がんの進行と転移に関与しています。頭頸部上皮における E-カドヘリンの発現は、上皮組織の形態形成と恒常性に不可欠です。 カドヘリンを介した細胞間接触は、上皮細胞の足場依存性増殖に必要です。
したがって、E-カドヘリンの発現低下は、上皮の完全性の喪失の兆候です
- 中間径フィラメントタンパク質であるビメンチンは、細胞の挙動、形態、および機械的特性の調節に関与しています。 ビメンチンは、結合組織で発現する EMT マーカーです。 上皮におけるビメンチンの発現は EMT の正のサインであり、OSMF でのその評価は、口腔線維症における EMT サインの重要性を明らかにすることができます。
研究の種類
入学 (実際)
参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
包含基準:
- OSMFの臨床症状を伴うビンロウジュの咀嚼習慣の病歴がある患者。
- アレカナッツを噛む習慣が1年以上あり、OSMFの臨床症状がない患者。
- 抜歯の適応があり、OSMFの臨床的特徴がなく、習慣歴のない健康なボランティア
除外基準:
- 出血性疾患の患者
- 唾液の流れまたは組成を変化させる可能性のある唾液腺障害と診断された患者
研究計画
研究はどのように設計されていますか?
デザインの詳細
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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習慣があり、OSMF を持っている患者
形態や組成を問わず、アレカナッツを噛む習慣があり、現在の状態(OSMF)の治療を受けていない患者
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IHC 染色および PCR 用の生検サンプル
MiRNA 21 発現解析用の唾液サンプル
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習慣があり、OSMFの臨床症状のない患者
形態や組成を問わず、ビンロウジュを噛む習慣があり、臨床的に OSMF の症状がなかった患者
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IHC 染色および PCR 用の生検サンプル
MiRNA 21 発現解析用の唾液サンプル
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健康な人間のボランティア
アクナッツを噛む習慣がなく、OSMFの臨床症状がなかった患者
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IHC 染色および PCR 用の生検サンプル
MiRNA 21 発現解析用の唾液サンプル
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この研究は何を測定していますか?
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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IHCのすべてのグループにおけるE-カドヘリンレベルの発現の変化
時間枠:検体採取から10日
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IHCの場合:E-カドヘリン陽性細胞を定義するために使用された基準は、上皮細胞の細胞膜の茶色の染色でした。陽性に染色された細胞の割合は - 陽性細胞スコアのパーセンテージ 細胞なし 0 ≤ 10% 1 11% -50% 2 51%-80% 3 81%以上 4 陽性対照組織と比較して染色強度も評価し、それに応じてスコアを付けました 強度スコア マイナス 0 弱い 1 中程度 2 強い 3 |
検体採取から10日
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IHCのすべてのグループにおけるビメンチンレベルの発現の変化
時間枠:検体採取から10日
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ビメンチン陽性細胞は、上皮細胞の細胞質で茶色に染色されていました。陽性に染色された細胞の割合は - 陽性細胞スコアのパーセンテージ 細胞なし 0 ≤ 10% 1 11% -50% 2 51%-80% 3 81%以上 4 陽性対照組織と比較して染色強度も評価し、それに応じてスコアを付けました 強度スコア マイナス 0 弱い 1 中程度 2 強い 3 |
検体採取から10日
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IHCのすべてのグループにおけるコラーゲンIVレベルの発現の変化
時間枠:検体採取から10日
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コラーゲン IV 陽性細胞は、基底膜細胞で茶色に染色されていました。陽性に染色された細胞の割合は - 陽性細胞スコアのパーセンテージ 細胞なし 0 ≤ 10% 1 11% -50% 2 51%-80% 3 81%以上 4 陽性対照組織と比較して染色強度も評価し、それに応じてスコアを付けました 強度スコア マイナス 0 弱い 1 中程度 2 強い 3 |
検体採取から10日
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リアルタイム PCR を使用した 3 つのグループすべてにおける miRNA 21 の発現の変化
時間枠:検体採取から10日
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正常サンプル中のmiRNA21の発現量(N)を1として全サンプルの発現量を算出 使用した式はコピー数=(量*6.022x1023)/(長さ*1x109*650)
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検体採取から10日
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PCRにおけるEカドヘリンレベルの変化
時間枠:検体採取後20日
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生検サンプルから DNA を抽出した後、Primer Express ソフトウェアを使用して E-カドヘリンのプライマーを設計し、合成し、定量化のためのリアルタイム PCR 用に HPLC 精製しました。
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検体採取後20日
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PCRにおけるビメンチンレベルの変化
時間枠:検体採取後20日
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生検サンプルから DNA を抽出した後、Primer Express ソフトウェアを使用してビメンチンのプライマーを設計し、合成し、定量化のためのリアルタイム PCR 用に HPLC 精製しました。
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検体採取後20日
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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習慣のあるOSMF患者における臨床的に疾患カテゴリーに関するe-カドヘリン発現の変化
時間枠:サンプル採取から15日
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Kerrらの分類システムによる、疾患の異なる臨床的発現に関する組織サンプル中のEカドヘリンレベル。
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サンプル採取から15日
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習慣のあるOSMF患者における組織学的な疾患カテゴリーに関するe-カドヘリン発現の変化
時間枠:サンプル採取から15日
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Kanna および Andrade らの分類システムによる、疾患のさまざまな臨床的発現に関する組織サンプル中の E カドヘリン レベル。
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サンプル採取から15日
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習慣のあるOSMF患者における臨床的に疾患カテゴリーに関するビメンチン発現の変化
時間枠:サンプル採取から15日
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Kerrらの分類システムによる、異なる臨床発現に関する組織サンプル中のビメンチンレベル。
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サンプル採取から15日
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習慣のあるOSMF患者における組織学的な疾患カテゴリーに関するビメンチン発現の変化
時間枠:サンプル採取から15日
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Khanna および Andrade 分類システムによる、さまざまな組織学的発現に関する組織サンプル中のビメンチン レベル。
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サンプル採取から15日
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習慣のあるOSMF患者における臨床的に疾患カテゴリーに関するコラーゲンIV発現の変化
時間枠:サンプル採取から15日
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Kerr らの分類システムによる、異なる臨床発現カテゴリーに関する組織サンプル中のコラーゲン IV レベル。
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サンプル採取から15日
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習慣のあるOSMF患者における組織学的な疾患カテゴリーに関するコラーゲンIV発現の変化
時間枠:サンプル採取から15日
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Khanna および Andred らの分類システムによる、さまざまな組織学的発現に関する組織サンプル中のコラーゲン IV レベル。
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サンプル採取から15日
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習慣のあるOSMF患者における臨床的に疾患カテゴリーに関するmi RNA 21発現の変化
時間枠:サンプル採取から15日
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Kerrらの分類システムによるOSMFの異なる臨床発現に関する唾液サンプル中のmiRNA 21レベル。
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サンプル採取から15日
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習慣のあるOSMF患者における組織学的な疾患カテゴリーに関するmi RNA 21発現の変化
時間枠:サンプル採取から15日
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Khanna および Andred らの分類システムによる、異なる組織学的発現に関する唾液サンプル中の miRNA 21 レベル。
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サンプル採取から15日
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協力者と研究者
出版物と役立つリンク
一般刊行物
- Yang Y, Li YX, Yang X, Jiang L, Zhou ZJ, Zhu YQ. Progress risk assessment of oral premalignant lesions with saliva miRNA analysis. BMC Cancer. 2013 Mar 19;13:129. doi: 10.1186/1471-2407-13-129.
- Sawant SS, Vaidya Mm, Chaukar DA, Alam H, Dmello C, Gangadaran P, Kannan S, Kane S, Dange PP, Dey N, Ranganathan K, D'Cruz AK. Clinical significance of aberrant vimentin expression in oral premalignant lesions and carcinomas. Oral Dis. 2014 Jul;20(5):453-65. doi: 10.1111/odi.12151. Epub 2013 Jul 19.
- Pinto GA, Vassallo J, Andrade LA, Magna LA. Immunohistochemical study of basement membrane collagen IV in uterine cervix carcinoma. Sao Paulo Med J. 1998 Nov-Dec;116(6):1846-51. doi: 10.1590/s1516-31801998000600004.
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。
生検組織分析の臨床試験
-
Aquyre Bioscience, IncBoston University; Fox Chase Cancer Center; Johnson & Johnson募集
-
Aarhus University HospitalNovo Nordisk A/S; University of Aarhus; LifeCell完了