Denna sida har översatts automatiskt och översättningens korrekthet kan inte garanteras. Vänligen se engelsk version för en källtext.

Epiteliala mesenkymala övergångsmarkörer i OSMF

4 november 2018 uppdaterad av: Dr. Shesha Prasad, The Oxford Dental College, Hospital and Research Center, Bangalore, India

Riskbedömning av malign transformation i oral submukös fibros med epitelial mesenkymal övergång (EMT) signaturer i vävnadsprover och saliv

Oral Sub mucous Fibrosis (OSMF) är i huvudsak en obalans mellan kollagenmetabolism och sårläkningsmekanism inducerad av arecanut tuggar vana. Kliniskt fortskrider sjukdomen i etapper med patienter som uppvisar en brännande känsla, intolerans mot kryddig mat, vesiklar i synnerhet i gommen, sårbildning och muntorrhet, fibros i munslemhinnan, vilket leder till stelhet i läppar, tunga och gom och slutligen trismus. Eftersom sjukdomen är progressivt försvagande och har potential att övergå till malign cancer utformades en studie för att bedöma om det finns några vävnads- eller salivmarkörer som kan bedömas för tidig diagnos och indikera eventuell malign transformation.

Deltagare som hade OSMF och vanahistoria, patienter utan OSMF men vanahistoria utgjorde fallgruppen där som normala patienter utan OSMF och ingen vanahistoria var i kontrollgruppen. Berättigade kandidater som samtyckte till att delta i studien utsattes för biopsiprocedur och även deras salivprover samlades in. Biopsiprover utsattes för immunhistokemi (IHC) och polymeraskedjereaktion (PCR) för att bedöma EMT-markörerna som vimentin, e-cadherin och kollagen IV. miRNA-kopior extraherades från saliv och utsattes för RT-PCR.

Forskningsfrågan var:

  1. Är EMT en positiv signatur i OSMF.
  2. Har histopatologisk gradering och dysplasi i OSMF någon korrelation med EMT.
  3. Kan avvikande EMT-markörer vara en tillförlitlig indikator för riskbedömning av tidig malign transformation.
  4. Kan uttryck av mi RNA 21 i saliv förutsäga sjukdomens svårighetsgrad och ännu viktigare bedöma risken för tidig malign transformation i OSMF.

Studieöversikt

Detaljerad beskrivning

Epitelial-mesenkymal övergång (EMT) beskriver processen där celler tappar sina epitelegenskaper och antar en mer mesenkymal och invasiv fenotyp. En kontinuerlig molekylär korsning mellan epitelceller och mesenkymala celler krävs under embryonal utveckling (epitelial mesenkymal övergång) och spelar förmodligen en viktig roll i patologisk process som sårläkning och tumörprogression. Utvecklingen av karcinom beror på de genetiska förändringarna inom målepitelet. Eftersom det sker omvandling av normalt epitel till potentiellt malignt och till skivepitelcancer, ändras stromat också från normalt till aktiverat eller tumörassocierat kallas stromal reaktion. 10 EMT kan generera mesenkymala celler som uttrycker α-slätmuskelaktin (αSMA), som ses i myofibroblaster. Det är dock oklart om funktionella myofibroblaster ses vid fibros eller cancer härrörande från epitel- eller endotelceller

Därför utvärderades EMT-markörer i OSMF i denna studie. följande markörer valda som:

  1. miRNA-21 reglerar cellproliferation, apoptos och epitel- till mesenkymal övergång under neoplastisk progression och uppregleras i en mängd olika cancerformer. Ett ökat uttryck av miRNA-21 ses i myofibroblaster.12 Eftersom vi känner till rollen för myofibroblaster i OSMF inkluderades salivuttryck av mi RNA-21 som markör.
  2. Typ IV-kollagen har den unika egenskapen att självassociera genom intramolekylära kovalenta bindningar, vilket ger barriär- och mekaniska hållfasthetsegenskaper till basalmembranen. Den ökade kollagenavsättningen i OSMF involverar många fibroblaster som omvandlas till myofibroblaster som finns i histologiska sektioner av vävnadsprover. en förändrad mikromiljö eller stroma såsom ihållande myofibroblaster har visat sig resultera i tumörbildning och tumörprogression
  3. Cadheriner är en klass av typ 1-transmembranproteiner kända för dess kalciumberoende cell-celladhesionsegenskap. E-cadheriner är medlemmar av denna proteinfamilj som finns i epitelceller som fyller viktiga roller i cellvidhäftning genom att säkerställa att celler i vävnader binds samman. Förlusten av E-cadherins funktion eller uttryck har varit inblandat i cancerprogression och metastaser. E-cadherin-uttryck i huvud- och nackepitel är väsentligt för morfogenesen och homeostasen av epitelvävnader. De cadherin-medierade cell-cell-kontakterna krävs för förankringsberoende tillväxt av epitelceller.

    Därför är lägre uttryck av E-cadherin ett tecken på förlust av epitelial integritet

  4. Det intermediära filamentproteinet vimentin är involverat i regleringen av cellbeteende, morfologi och mekaniska egenskaper. Vimentin är en EMT-markör som uttrycks i bindväv. Uttryck av vimentin i epitel är en positiv signatur av EMT, och dess utvärdering i OSMF kan avslöja vikten av EMT-signatur vid oral fibros.

Studietyp

Observationell

Inskrivning (Faktisk)

185

Deltagandekriterier

Forskare letar efter personer som passar en viss beskrivning, så kallade behörighetskriterier. Några exempel på dessa kriterier är en persons allmänna hälsotillstånd eller tidigare behandlingar.

Urvalskriterier

Åldrar som är berättigade till studier

18 år och äldre (VUXEN, OLDER_ADULT)

Tar emot friska volontärer

Ja

Kön som är behöriga för studier

Allt

Testmetod

Sannolikhetsprov

Studera befolkning

Försökspersoner valdes från öppenvårdsavdelningen vid Dental College OPD

Beskrivning

Inklusionskriterier:

  • Varje patient som har haft en historia av tuggvana på nötter med kliniska manifestationer av OSMF.
  • Patienter som hade en historia av en tuggvana på nötter på mer än 1 år och inte hade några kliniska symtom på OSMF.
  • Friska frivilliga frivilliga som är indicerade för tandutdragning och som inte hade några kliniska kännetecken för OSMF och inte hade någon vanehistoria

Exklusions kriterier:

  • Patienter som hade blödningsrubbningar
  • patienter som får diagnosen spottkörtelstörningar som kan förändra spottflödet eller sammansättningen

Studieplan

Det här avsnittet ger detaljer om studieplanen, inklusive hur studien är utformad och vad studien mäter.

Hur är studien utformad?

Designdetaljer

Kohorter och interventioner

Grupp / Kohort
Intervention / Behandling
Patient med vanor och med OSMF
Patienter som har haft en historia av tuggvana på nötter i någon form och sammansättning och som inte genomgått någon behandling för sitt nuvarande tillstånd, dvs OSMF
biopsiprover för IHC-färgning och PCR
Salivprover för miRNA 21-expressionsanalys
Patienter med vanor och hade inga kliniska symtom på OSMF
Patienter som hade en historia av tuggvana av arecanut i någon form och sammansättning och som inte hade några symtom på OSMF kliniskt
biopsiprover för IHC-färgning och PCR
Salivprover för miRNA 21-expressionsanalys
Friska mänskliga volontärer
patienter som inte rapporterade någon historia av areacnöttuggvanor och som inte hade några kliniska symtom på OSMF
biopsiprover för IHC-färgning och PCR
Salivprover för miRNA 21-expressionsanalys

Vad mäter studien?

Primära resultatmått

Resultatmått
Åtgärdsbeskrivning
Tidsram
Förändring i uttryck av E-cadherinnivåer i alla grupper i IHC
Tidsram: 10 dagar från provtagning

För IHC: Kriterierna som användes för att definiera E-cadherinpositiva celler var brunfärgning i cellmembranet hos epitelceller; procentandelen positivt färgade celler poängsattes som -

Procentandel av POSITIVA CELLER PÅGÅNG Inga celler 0 ≤ 10% 1 11% -50 % 2 51%-80% 3

≥81 % 4

Färgningsintensiteten bedömdes också i jämförelse med den positiva kontrollvävnaden och poängsattes därefter

INTENSITETSPOÄNG Negativt 0 Svagt 1 Måttligt 2 Starkt 3

10 dagar från provtagning
Förändring i uttryck av vimentinnivåer i alla grupper i IHC
Tidsram: 10 dagar från provtagning

vimentinpositiva celler var brunfärgad i cytoplasman hos epitelceller; procentandelen positivt färgade celler poängsattes som -

Procentandel av POSITIVA CELLER PÅGÅNG Inga celler 0 ≤ 10% 1 11% -50 % 2 51%-80% 3

≥81 % 4

Färgningsintensiteten bedömdes också i jämförelse med den positiva kontrollvävnaden och poängsattes därefter

INTENSITETSPOÄNG Negativt 0 Svagt 1 Måttligt 2 Starkt 3

10 dagar från provtagning
Förändring i uttryck av kollagen IV-nivåer i alla grupper i IHC
Tidsram: 10 dagar från provtagning

kollagen IV-positiva celler var brunfärgning i basalmembranceller; procentandelen positivt färgade celler poängsattes som -

Procentandel av POSITIVA CELLER PÅGÅNG Inga celler 0 ≤ 10% 1 11% -50 % 2 51%-80% 3

≥81 % 4

Färgningsintensiteten bedömdes också i jämförelse med den positiva kontrollvävnaden och poängsattes därefter

INTENSITETSPOÄNG Negativt 0 Svagt 1 Måttligt 2 Starkt 3

10 dagar från provtagning
Förändring i uttryck av miRNA 21 i alla tre grupper med hjälp av Real Time-PCR
Tidsram: 10 dagar från provtagning
Med tanke på uttrycket av miRNA21 i normalt prov (N) som 1, beräknades uttrycket för alla prover. Den använda formeln är: antal kopior = (mängd * 6,022x1023) / (längd * 1x109 * 650)
10 dagar från provtagning
Förändring i E-cadherinnivåer i PCR
Tidsram: 20 dagar efter provtagning
Efter extraktion av DNA från biopsiprover designades primrarna för E-cadherin med användning av Primer Express-mjukvara, syntetiserades och HPLC-renades för realtids-PCR för kvantifiering.
20 dagar efter provtagning
Förändring i vimentinnivåer i PCR
Tidsram: 20 dagar efter provtagning
Efter extraktion av DNA från biopsiproverna designades primrarna för Vimentin med hjälp av programvaran Primer Express, syntetiserades och HPLC-renades för realtids-PCR för kvantifiering
20 dagar efter provtagning

Sekundära resultatmått

Resultatmått
Åtgärdsbeskrivning
Tidsram
Förändring i uttryck av e-cadherin med avseende på sjukdomskategori kliniskt hos OSMF-patienter med vanor
Tidsram: 15 dagar från provtagning
E cadherinnivå i vävnadsprover med avseende på olika Kliniskt uttryck av sjukdom enligt Kerr et al klassificeringssystem.
15 dagar från provtagning
Förändring i e-cadherin-uttryck med avseende på sjukdomskategori histologiskt hos OSMF-patienter med vanor
Tidsram: 15 dagar från provtagning
E cadherinnivå i vävnadsprover med avseende på olika Kliniskt uttryck av sjukdom enligt Kanna och Andrade et al klassificeringssystem.
15 dagar från provtagning
Förändring i vimentinuttryck med avseende på sjukdomskategori kliniskt hos OSMF-patienter med vanor
Tidsram: 15 dagar från provtagning
Vimentinnivå i vävnadsprover med avseende på olika kliniska uttryck enligt Kerr et al klassificeringssystem.
15 dagar från provtagning
Förändring i vimentinuttryck med avseende på sjukdomskategori histologiskt hos OSMF-patienter med vanor
Tidsram: 15 dagar från provtagning
Vimentinnivå i vävnadsprover med avseende på olika histologiska uttryck enligt Khanna och Andrades klassificeringssystem.
15 dagar från provtagning
Förändring i kollagen IV-uttryck med avseende på sjukdomskategori kliniskt hos OSMF-patienter med vanor
Tidsram: 15 dagar från provtagning
Kollagen-IV nivå i vävnadsprover med avseende på olika kliniska uttryckskategorier enligt Kerr et al klassificeringssystem.
15 dagar från provtagning
Förändring i kollagen IV-uttryck med avseende på sjukdomskategori hstologiskt hos OSMF-patienter med vanor
Tidsram: 15 dagar från provtagning
Kollagen-IV-nivå i vävnadsprover med avseende på olika histologiska uttryck enligt Khanna och Andred et al klassificeringssystem.
15 dagar från provtagning
Förändring i uttryck av mi RNA 21 med avseende på sjukdomskategori kliniskt hos OSMF-patienter med vanor
Tidsram: 15 dagar från provtagning
miRNA 21 nivå i salivprover med avseende på olika kliniska uttryck av OSMF enligt Kerr et al klassificeringssystem.
15 dagar från provtagning
Förändring i uttryck av mi RNA 21 med avseende på sjukdomskategori histologiskt hos OSMF-patienter med vanor
Tidsram: 15 dagar från provtagning
miRNA 21-nivå i salivprover med avseende på olika histologiska uttryck enligt Khanna och Andred et al klassificeringssystem.
15 dagar från provtagning

Samarbetspartners och utredare

Det är här du hittar personer och organisationer som är involverade i denna studie.

Publikationer och användbara länkar

Den som ansvarar för att lägga in information om studien tillhandahåller frivilligt dessa publikationer. Dessa kan handla om allt som har med studien att göra.

Studieavstämningsdatum

Dessa datum spårar framstegen för inlämningar av studieposter och sammanfattande resultat till ClinicalTrials.gov. Studieposter och rapporterade resultat granskas av National Library of Medicine (NLM) för att säkerställa att de uppfyller specifika kvalitetskontrollstandarder innan de publiceras på den offentliga webbplatsen.

Studera stora datum

Studiestart (FAKTISK)

15 januari 2015

Primärt slutförande (FAKTISK)

28 december 2017

Avslutad studie (FAKTISK)

20 mars 2018

Studieregistreringsdatum

Först inskickad

27 oktober 2018

Först inskickad som uppfyllde QC-kriterierna

4 november 2018

Första postat (FAKTISK)

7 november 2018

Uppdateringar av studier

Senaste uppdatering publicerad (FAKTISK)

7 november 2018

Senaste inskickade uppdateringen som uppfyllde QC-kriterierna

4 november 2018

Senast verifierad

1 november 2018

Mer information

Termer relaterade till denna studie

Andra studie-ID-nummer

  • Oxford DC

Plan för individuella deltagardata (IPD)

Planerar du att dela individuella deltagardata (IPD)?

NEJ

Läkemedels- och apparatinformation, studiedokument

Studerar en amerikansk FDA-reglerad läkemedelsprodukt

Nej

Studerar en amerikansk FDA-reglerad produktprodukt

Nej

Denna information hämtades direkt från webbplatsen clinicaltrials.gov utan några ändringar. Om du har några önskemål om att ändra, ta bort eller uppdatera dina studieuppgifter, vänligen kontakta register@clinicaltrials.gov. Så snart en ändring har implementerats på clinicaltrials.gov, kommer denna att uppdateras automatiskt även på vår webbplats .

Kliniska prövningar på Oral submukös fibros

Kliniska prövningar på Biopsivävnadsanalys

3
Prenumerera