Ezt az oldalt automatikusan lefordították, és a fordítás pontossága nem garantált. Kérjük, olvassa el a angol verzió forrásszöveghez.

Epiteliális mezenchimális átmenet markerek az OSMF-ben

2018. november 4. frissítette: Dr. Shesha Prasad, The Oxford Dental College, Hospital and Research Center, Bangalore, India

A szájnyálkahártya alatti fibrózis rosszindulatú átalakulásának kockázatértékelése a szövetmintákban és a nyálban lévő epiteliális mezenchimális átmenet (EMT) aláírások felhasználásával

A szájnyálkahártya-fibrózis (OSMF) lényegében a kollagén anyagcsere és a sebgyógyulási mechanizmus közötti egyensúlyhiány, amelyet a rágási szokás vált ki. Klinikailag a betegség szakaszosan halad, a betegek égő érzéssel, fűszeres ételek intoleranciájával, hólyagokkal, különösen a szájpadláson, fekélyesedéssel és szájszárazsággal, a szájnyálkahártya fibrózisával, az ajkak, a nyelv és a szájpad merevségéhez, végül pedig triszmushoz vezetnek. Mivel a betegség fokozatosan legyengül, és potenciálisan rosszindulatú rákhoz vezethet, egy vizsgálatot terveztek annak felmérésére, hogy vannak-e olyan szövet- vagy nyálmarkerek, amelyek értékelhetők a korai diagnózis érdekében, és jelezhetik-e a rosszindulatú átalakulást, ha vannak ilyenek.

Azok a résztvevők, akiknek volt OSMF és szokástörténete, valamint OSMF nélküli, de szokástörténettel rendelkező betegek alkották azt az esetcsoportot, ahol az OSMF nélküli és szokástörténettel nem rendelkező normál betegek a kontrollcsoportba kerültek. A vizsgálatban részt vevő jogosult jelölteket biopsziás eljárásnak vetették alá, és nyálmintát is gyűjtöttek. A biopsziás mintákat immunhisztokémiának (IHC) és polimeráz láncreakciónak (PCR) vetették alá az EMT markerek, például a vimentin, az e-cadherin és a kollagén IV értékelésére. A miRNS másolatokat nyálból extraháltuk, és RT-PCR-nek vetettük alá.

A kutatás kérdése a következő volt:

  1. Az EMT pozitív aláírás az OSMF-ben?
  2. Van-e összefüggés az OSMF-ben a hisztopatológiai osztályozás és a diszplázia között az EMT-vel?
  3. Az aberráns EMT markerek megbízható indikátorok lehetnek-e a korai rosszindulatú átalakulás kockázatának felmérésére?
  4. Megjósolhatja-e a mi RNS 21 nyálban történő expressziója a betegség súlyosságát, és ami még fontosabb, felmérheti a korai rosszindulatú transzformáció kockázatát az OSMF-ben.

A tanulmány áttekintése

Részletes leírás

Az epiteliális-mezenchimális átmenet (EMT) azt a folyamatot írja le, amelynek során a sejtek feladják epiteliális tulajdonságaikat, és mezenchimálisabb és invazívabb fenotípust vesznek fel. Az embrionális fejlődés során (epiteliális mezenchimális átmenet) folyamatos molekuláris keresztbeszélgetésre van szükség a hám- és a mesenchymalis sejtek között, és valószínűleg fontos szerepet játszik a kóros folyamatokban, mint a sebgyógyulás és a tumor progressziója. A karcinómák kialakulását a célhámban végbemenő genetikai változások okozzák. Mivel a normál hám átalakul potenciálisan rosszindulatúvá és laphámsejtes karcinómává, a sztróma is átalakul normálból aktiválttá vagy daganathoz kapcsolódóvá, amelyet stroma reakciónak neveznek. 10 Az EMT olyan mezenchimális sejteket generálhat, amelyek α-simaizom aktint (αSMA) expresszálnak, amint az a miofibroblasztokban is látható. Nem világos azonban, hogy a fibrózisban vagy a rákban megfigyelhető funkcionális miofibroblasztok hám- vagy endoteliális sejtekből származnak

Ezért ebben a vizsgálatban az OSMF-ben az EMT markereket értékeltük. a következő jelzőket választották:

  1. A miRNS-21 szabályozza a sejtproliferációt, az apoptózist és az epithelialis-mezenchimális átmenetet a daganatos progresszió során, és számos rákos megbetegedésben fokozottan szabályozott. A miofibroblasztokban a miRNS-21 fokozott expressziója figyelhető meg.12 Mivel ismerjük a miofibroblasztok szerepét az OSMF-ben, a mi RNS-21 nyálban történő expresszióját bevontuk markerként.
  2. A IV-es típusú kollagén egyedülálló tulajdonsága, hogy intramolekuláris kovalens kötéseken keresztül öncsatlakozik, gátat és mechanikai szilárdsági tulajdonságokat biztosítva az alapmembránoknak. Az OSMF fokozott kollagénlerakódása számos fibroblasztot érint, amelyek a szövetminták szövettani metszeteiben található miofibroblasztokká alakulnak. a megváltozott mikrokörnyezet vagy sztróma, például a perzisztens myofibroblasztok daganatképződést és tumor progressziót eredményeznek
  3. A kadherinek az 1-es típusú transzmembrán fehérjék egy osztálya, amelyek kalciumfüggő sejt-sejt adhéziós tulajdonságairól ismertek. Az E-cadherinek a hámsejtekben található fehérjecsalád tagjai, amelyek fontos szerepet játszanak a sejtadhézióban azáltal, hogy biztosítják, hogy a szövetekben a sejtek egymáshoz kötődjenek. Az E-cadherin funkciójának vagy expressziójának elvesztése szerepet játszik a rák progressziójában és metasztázisában. Az E-cadherin expressziója a fej és a nyak epitéliumában elengedhetetlen az epiteliális szövetek morfogeneziséhez és homeosztázisához. A cadherin által közvetített sejt-sejt kapcsolatok szükségesek az epiteliális sejtek rögzítéstől függő növekedéséhez.

    Ezért az E-cadherin alacsonyabb expressziója az epiteliális integritás elvesztésének jele

  4. Az intermedier filamentum fehérje, a vimentin részt vesz a sejt viselkedésének, morfológiájának és mechanikai tulajdonságainak szabályozásában. A Vimentin egy kötőszövetben kifejeződő EMT-marker. A vimentin expressziója a hámban az EMT pozitív aláírása, és az OSMF-ben végzett értékelése feltárhatja az EMT aláírás fontosságát orális fibrózisban.

Tanulmány típusa

Megfigyelő

Beiratkozás (Tényleges)

185

Részvételi kritériumok

A kutatók olyan embereket keresnek, akik megfelelnek egy bizonyos leírásnak, az úgynevezett jogosultsági kritériumoknak. Néhány példa ezekre a kritériumokra a személy általános egészségi állapota vagy a korábbi kezelések.

Jogosultsági kritériumok

Tanulmányozható életkorok

18 év és régebbi (FELNŐTT, OLDER_ADULT)

Egészséges önkénteseket fogad

Igen

Tanulmányozható nemek

Összes

Mintavételi módszer

Valószínűségi minta

Tanulmányi populáció

Az alanyokat a Dental College OPD járóbeteg osztályáról választottuk ki

Leírás

Bevételi kritériumok:

  • Bármely olyan beteg, akinek a kórelőzményében az OSMF klinikai megnyilvánulásaival járó rágási szokás volt.
  • Azok a betegek, akiknek több mint 1 éve volt rágási szokása, és nem mutatkoztak az OSMF klinikai tünetei.
  • Egészséges önkéntesek, akiknél foghúzás javasolt, és nem mutatták ki az OSMF klinikai tüneteit, és nem volt szokásuk

Kizárási kritériumok:

  • Vérzési rendellenességben szenvedő betegek
  • betegek, akiknél nyálmirigy-rendellenességeket diagnosztizáltak, amelyek megváltoztathatják a nyáláramlást vagy a nyál összetételét

Tanulási terv

Ez a rész a vizsgálati terv részleteit tartalmazza, beleértve a vizsgálat megtervezését és a vizsgálat mérését.

Hogyan készül a tanulmány?

Tervezési részletek

Kohorszok és beavatkozások

Csoport / Kohorsz
Beavatkozás / kezelés
Türelmes szokásokkal és OSMF-mel
Olyan betegek, akiknek a kórelőzményében bármilyen formában és összetételű rágási szokás szerepelt, és akiket nem kezeltek jelenlegi állapotuk miatt, azaz OSMF
biopsziás minták IHC festéshez és PCR-hez
Nyálminták a miRNS 21 expressziós elemzéséhez
Azok a betegek, akiknek szokásaik vannak, és nem mutatkoztak az OSMF klinikai tünetei
Olyan betegek, akiknek a kórelőzményében bármilyen formában és összetételű rágási szokás szerepelt, és klinikailag nem voltak OSMF tüneteik
biopsziás minták IHC festéshez és PCR-hez
Nyálminták a miRNS 21 expressziós elemzéséhez
Egészséges emberi önkéntesek
olyan betegek, akiknek nem számoltak be a kórelőzményben a dió rágási szokásairól, és nem voltak OSMF klinikai tünetei
biopsziás minták IHC festéshez és PCR-hez
Nyálminták a miRNS 21 expressziós elemzéséhez

Mit mér a tanulmány?

Elsődleges eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
Az E-cadherin szintek expressziójának változása az IHC összes csoportjában
Időkeret: A mintavételtől számított 10 nap

IHC esetében: Az E-cadherin pozitív sejtek meghatározására használt kritérium a hámsejtek sejtmembránjának barna festődése volt; a pozitívan festődött sejtek százalékos arányát a következőképpen értékeltük:

A POZITÍV SEJTEK PONTJÁNAK százalékos aránya Nincs sejt 0 ≤ 10% 1 11% -50% 2 51%-80% 3

≥81% 4

A festődés intenzitását a pozitív kontrollszövettel összehasonlítva is értékeltük, és ennek megfelelően pontoztuk

INTENZITÁS PONT Negatív 0 Gyenge 1 Közepes 2 Erős 3

A mintavételtől számított 10 nap
A vimentin szintek expressziójának változása az IHC összes csoportjában
Időkeret: A mintavételtől számított 10 nap

a vimentin pozitív sejtek barna festődést mutattak az epiteliális sejtek citoplazmájában; a pozitívan festődött sejtek százalékos arányát a következőképpen értékeltük:

A POZITÍV SEJTEK PONTJÁNAK százalékos aránya Nincs sejt 0 ≤ 10% 1 11% -50% 2 51%-80% 3

≥81% 4

A festődés intenzitását a pozitív kontrollszövettel összehasonlítva is értékeltük, és ennek megfelelően pontoztuk

INTENZITÁS PONT Negatív 0 Gyenge 1 Közepes 2 Erős 3

A mintavételtől számított 10 nap
A IV. kollagén expressziójának változása az IHC összes csoportjában
Időkeret: A mintavételtől számított 10 nap

a kollagén IV pozitív sejtek barna festődést mutattak az alapmembrán sejtekben; a pozitívan festődött sejtek százalékos arányát a következőképpen értékeltük:

A POZITÍV SEJTEK PONTJÁNAK százalékos aránya Nincs sejt 0 ≤ 10% 1 11% -50% 2 51%-80% 3

≥81% 4

A festődés intenzitását a pozitív kontrollszövettel összehasonlítva is értékeltük, és ennek megfelelően pontoztuk

INTENZITÁS PONT Negatív 0 Gyenge 1 Közepes 2 Erős 3

A mintavételtől számított 10 nap
Változás a miRNS 21 expressziójában mindhárom csoportban Real Time-PCR alkalmazásával
Időkeret: A mintavételtől számított 10 nap
Ha a miRNS21 kifejeződését normál mintában (N) 1-nek tekintjük, az összes minta expresszióját kiszámítottuk. Az alkalmazott képlet: másolatok száma = (mennyiség * 6,022x1023) / (hossz * 1x109 * 650)
A mintavételtől számított 10 nap
Változás az E-kadherin szintjében a PCR-ben
Időkeret: 20 nappal a mintavétel után
A DNS biopsziás mintákból való extrahálása után az E-cadherin primereket Primer Express szoftverrel megterveztük, szintetizáltuk és HPLC-vel tisztítottuk valós idejű PCR-hez a mennyiségi meghatározáshoz.
20 nappal a mintavétel után
A vimentinszint változása PCR-ben
Időkeret: 20 nappal a mintavétel után
A biopsziás mintákból a DNS kivonása után a Vimentin primereket Primer Express szoftverrel megterveztük, szintetizáltuk és HPLC-vel tisztítottuk valós idejű PCR-hez a mennyiségi meghatározáshoz.
20 nappal a mintavétel után

Másodlagos eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
Az e-cadherin expressziójának változása a betegségkategóriához képest klinikailag a szokásokkal rendelkező OSMF-betegeknél
Időkeret: A mintavételtől számított 15 nap
E cadherin szint a szövetmintákban a betegség különböző klinikai kifejeződése tekintetében Kerr és munkatársai osztályozási rendszere szerint.
A mintavételtől számított 15 nap
Az e-cadherin expressziójának változása a betegségkategóriához képest szövettanilag szokásokkal rendelkező OSMF-betegeknél
Időkeret: A mintavételtől számított 15 nap
E cadherin szint a szövetmintákban a betegség különböző klinikai kifejeződése tekintetében Kanna és Andrade és munkatársai osztályozási rendszere szerint.
A mintavételtől számított 15 nap
A vimentin expresszió változása a betegségkategóriához képest klinikailag a szokásokkal rendelkező OSMF-betegeknél
Időkeret: A mintavételtől számított 15 nap
Vimentin szint a szövetmintákban a különböző klinikai expresszió tekintetében Kerr és munkatársai osztályozási rendszere szerint.
A mintavételtől számított 15 nap
A vimentin expresszió változása a betegség kategóriája szerint szövettanilag szokásokkal rendelkező OSMF-betegeknél
Időkeret: A mintavételtől számított 15 nap
Vimentin szint a szövetmintákban a különböző szövettani expresszió tekintetében Khanna és Andrade osztályozási rendszer szerint.
A mintavételtől számított 15 nap
A kollagén IV expresszió változása a betegségkategóriához képest klinikailag szokásokkal rendelkező OSMF-betegeknél
Időkeret: A mintavételtől számított 15 nap
Kollagén-IV szint a szövetmintákban a különböző klinikai expressziós kategóriák szerint Kerr és munkatársai osztályozási rendszere szerint.
A mintavételtől számított 15 nap
A kollagén IV expresszió változása a betegség kategóriája szerint szövettanilag szokásokkal rendelkező OSMF-betegeknél
Időkeret: A mintavételtől számított 15 nap
Kollagén-IV szint a szövetmintákban a különböző szövettani expresszió tekintetében Khanna és Andred és munkatársai osztályozási rendszere szerint.
A mintavételtől számított 15 nap
A mi RNS 21 expressziójának változása a betegségkategóriához képest klinikailag OSMF-betegeknél, akiknek szokásai vannak
Időkeret: A mintavételtől számított 15 nap
miRNS 21 szint a nyálmintákban az OSMF különböző klinikai expressziója tekintetében Kerr és munkatársai osztályozási rendszere szerint.
A mintavételtől számított 15 nap
A mi RNS 21 expressziójának változása a betegségkategóriához viszonyítva szövettanilag szokásokkal rendelkező OSMF-betegeknél
Időkeret: A mintavételtől számított 15 nap
miRNS 21 szint a nyálmintákban a különböző szövettani expresszió tekintetében Khanna és Andred és munkatársai osztályozási rendszere szerint.
A mintavételtől számított 15 nap

Együttműködők és nyomozók

Itt találhatja meg a tanulmányban érintett személyeket és szervezeteket.

Publikációk és hasznos linkek

A vizsgálattal kapcsolatos információk beviteléért felelős személy önkéntesen bocsátja rendelkezésre ezeket a kiadványokat. Ezek bármiről szólhatnak, ami a tanulmányhoz kapcsolódik.

Tanulmányi rekorddátumok

Ezek a dátumok nyomon követik a ClinicalTrials.gov webhelyre benyújtott vizsgálati rekordok és összefoglaló eredmények benyújtásának folyamatát. A vizsgálati feljegyzéseket és a jelentett eredményeket a Nemzeti Orvostudományi Könyvtár (NLM) felülvizsgálja, hogy megbizonyosodjon arról, hogy megfelelnek-e az adott minőség-ellenőrzési szabványoknak, mielőtt közzéteszik őket a nyilvános weboldalon.

Tanulmány főbb dátumok

Tanulmány kezdete (TÉNYLEGES)

2015. január 15.

Elsődleges befejezés (TÉNYLEGES)

2017. december 28.

A tanulmány befejezése (TÉNYLEGES)

2018. március 20.

Tanulmányi regisztráció dátumai

Először benyújtva

2018. október 27.

Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2018. november 4.

Első közzététel (TÉNYLEGES)

2018. november 7.

Tanulmányi rekordok frissítései

Utolsó frissítés közzétéve (TÉNYLEGES)

2018. november 7.

Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2018. november 4.

Utolsó ellenőrzés

2018. november 1.

Több információ

A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések

Egyéb vizsgálati azonosító számok

  • Oxford DC

Terv az egyéni résztvevői adatokhoz (IPD)

Tervezi megosztani az egyéni résztvevői adatokat (IPD)?

NEM

Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok

Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz

Nem

Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz

Nem

Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .

Klinikai vizsgálatok a Orális nyálkahártya alatti fibrózis

Klinikai vizsgálatok a Biopsziás szövetelemzés

3
Iratkozz fel