- ICH GCP
- Реестр клинических исследований США
- Клиническое испытание NCT03732872
Эпителиально-мезенхимальные маркеры перехода в OSMF
Оценка риска злокачественной трансформации при подслизистом фиброзе полости рта с использованием признаков эпителиально-мезенхимального перехода (ЭМП) в образцах тканей и слюне
Оральный подслизистый фиброз (OSMF) представляет собой дисбаланс между метаболизмом коллагена и механизмом заживления ран, вызванный привычкой жевать арекан. Клинически болезнь прогрессирует поэтапно, у пациентов появляются чувство жжения, непереносимость острой пищи, везикулы, особенно на небе, изъязвление и сухость во рту, фиброз слизистой оболочки полости рта, что приводит к ригидности губ, языка и неба и, наконец, к тризму. Поскольку болезнь постепенно изнурительна и потенциально может превратиться в злокачественный рак, исследование было разработано для оценки наличия каких-либо маркеров ткани или слюны, которые можно оценить для ранней диагностики и указать на злокачественную трансформацию, если таковая имеется.
Участники, у которых был OSMF и история привычки, пациенты без OSMF, но история привычки сформировали группу случаев, тогда как нормальные пациенты без OSMF и без истории привычки были в контрольной группе. Подходящим кандидатам, давшим согласие на участие в исследовании, была проведена процедура биопсии, а также были взяты образцы их слюны. Образцы биопсии подвергали иммуногистохимии (ИГХ) и полимеразной цепной реакции (ПЦР) для оценки маркеров ЭМП, таких как виментин, е-кадгерин и коллаген IV. Копии миРНК выделяли из слюны и подвергали ОТ-ПЦР.
Вопрос исследования был:
- Является ли ЕМТ положительной подписью в OSMF.
- Имеет ли гистопатологическая классификация и дисплазия в OSMF какую-либо корреляцию с ЕМТ.
- Могут ли аберрантные маркеры ЕМТ быть надежным индикатором для оценки риска ранней злокачественной трансформации?
- Может ли экспрессия mi RNA 21 в слюне предсказывать тяжесть заболевания и, что более важно, оценивать риск ранней злокачественной трансформации при OSMF.
Обзор исследования
Статус
Условия
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Эпителиально-мезенхимальный переход (ЕМТ) описывает процесс, при котором клетки теряют свои эпителиальные свойства и принимают более мезенхимальный и инвазивный фенотип. Непрерывный молекулярный перекрестный контакт между эпителиальными и мезенхимальными клетками необходим во время эмбрионального развития (эпителиально-мезенхимальный переход) и, вероятно, играет важную роль в патологических процессах, таких как заживление ран и прогрессирование опухоли. Развитие карциномы связано с генетическими изменениями в эпителии-мишени. Поскольку происходит превращение нормального эпителия в потенциально злокачественный и в плоскоклеточный рак, строма также изменяется от нормальной к активированной или связанной с опухолью, что называется стромальной реакцией. 10 ЕМТ может генерировать мезенхимальные клетки, которые экспрессируют α-актин гладких мышц (αSMA), как видно из миофибробластов. Однако неясно, происходят ли функциональные миофибробласты при фиброзе или раке из эпителиальных или эндотелиальных клеток.
Следовательно, в этом исследовании оценивались маркеры EMT в OSMF. следующие маркеры, выбранные в качестве:
- миРНК-21 регулирует клеточную пролиферацию, апоптоз и переход от эпителия к мезенхиме во время опухолевой прогрессии и повышается при различных видах рака. Повышенная экспрессия миРНК-21 наблюдается в миофибробластах.12 Поскольку мы знаем роль миофибробластов в OSMF, экспрессия mi RNA-21 в слюне была включена в качестве маркера.
- Коллаген типа IV обладает уникальной особенностью самоассоциации посредством внутримолекулярных ковалентных связей, обеспечивающих барьерные и механические прочностные свойства базальных мембран. Повышенное отложение коллагена в OSMF включает многочисленные фибробласты, которые превращаются в миофибробласты, обнаруживаемые в гистологических срезах образцов тканей. Было показано, что измененная микросреда или строма, такие как персистирующие миофибробласты, приводят к онкогенезу и прогрессированию опухоли.
Кадгерины представляют собой класс трансмембранных белков типа 1, известных своим свойством кальций-зависимой межклеточной адгезии. E-кадгерины являются членами этого семейства белков, обнаруживаемых в эпителиальных клетках, которые играют важную роль в клеточной адгезии, обеспечивая связывание клеток в тканях. Потеря функции или экспрессии E-кадгерина связана с прогрессированием рака и метастазированием. Экспрессия E-кадгерина в эпителии головы и шеи необходима для морфогенеза и гомеостаза эпителиальных тканей. Опосредованные кадгерином межклеточные контакты необходимы для зависящего от закрепления роста эпителиальных клеток.
Следовательно, более низкая экспрессия E-кадгерина является признаком потери целостности эпителия.
- Белок промежуточного филамента виментин участвует в регуляции поведения, морфологии и механических свойств клеток. Виментин является маркером ЭМП, экспрессируемым в соединительной ткани. Экспрессия виментина в эпителии является положительным сигнатурой ЕМТ, и его оценка в OSMF может выявить важность сигнатуры ЕМТ при оральном фиброзе.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- Любой пациент, имевший в анамнезе привычку жевать орех арекана с клиническими проявлениями OSMF.
- Пациенты со стажем жевания ареканута в анамнезе более 1 года и не имевшие клинических симптомов OSMF.
- Здоровые люди-добровольцы, которым показано удаление зуба, у которых не было клинических признаков OSMF и не было привычки в анамнезе.
Критерий исключения:
- Пациенты с нарушением свертываемости крови
- пациенты, у которых диагностированы заболевания слюнных желез, которые могут изменить поток или состав слюны
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
---|---|
Пациент с привычками и наличие OSMF
Пациенты, у которых в анамнезе была привычка жевать орех арекана в любой форме и составе, и которые не проходили какое-либо лечение по поводу своего текущего состояния, т. Е. OSMF.
|
образцы биопсии для окрашивания ИГХ и ПЦР
Образцы слюны для анализа экспрессии miRNA 21
|
Пациенты с привычками и без клинических симптомов ОСМП
Пациенты, у которых в анамнезе была привычка жевать орех арекана в любой форме и составе, и у которых не было клинических симптомов OSMF.
|
образцы биопсии для окрашивания ИГХ и ПЦР
Образцы слюны для анализа экспрессии miRNA 21
|
Здоровые люди-добровольцы
пациенты, которые не сообщали о привычках жевания ареакната в анамнезе и не имели клинических симптомов OSMF
|
образцы биопсии для окрашивания ИГХ и ПЦР
Образцы слюны для анализа экспрессии miRNA 21
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
---|---|---|
Изменение уровня экспрессии Е-кадгерина во всех группах ИГХ
Временное ограничение: 10 дней с момента сбора образцов
|
Для ИГХ: критерием, используемым для определения положительных по Е-кадгерину клеток, было коричневое окрашивание клеточной мембраны эпителиальных клеток; процент положительно окрашенных клеток оценивали как - Процент ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК ОЦЕНКА Нет клеток 0 ≤ 10 % 1 11 % -50 % 2 51 % -80 % 3 ≥81% 4 Интенсивность окрашивания также оценивали по сравнению с тканью положительного контроля и оценивали соответственно. ОЦЕНКА ИНТЕНСИВНОСТИ Отрицательно 0 Слабо 1 Умеренно 2 Сильно 3 |
10 дней с момента сбора образцов
|
Изменение уровня экспрессии виментина во всех группах ИГХ
Временное ограничение: 10 дней с момента сбора образцов
|
виментин-положительные клетки — бурое окрашивание цитоплазмы эпителиоцитов; процент положительно окрашенных клеток оценивали как - Процент ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК ОЦЕНКА Нет клеток 0 ≤ 10 % 1 11 % -50 % 2 51 % -80 % 3 ≥81% 4 Интенсивность окрашивания также оценивали по сравнению с тканью положительного контроля и оценивали соответственно. ОЦЕНКА ИНТЕНСИВНОСТИ Отрицательно 0 Слабо 1 Умеренно 2 Сильно 3 |
10 дней с момента сбора образцов
|
Изменение уровня экспрессии коллагена IV во всех группах ИГХ
Временное ограничение: 10 дней с момента сбора образцов
|
клетки, положительные по коллагену IV, окрашивались в коричневый цвет в клетках базальной мембраны; процент положительно окрашенных клеток оценивали как - Процент ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК ОЦЕНКА Нет клеток 0 ≤ 10 % 1 11 % -50 % 2 51 % -80 % 3 ≥81% 4 Интенсивность окрашивания также оценивали по сравнению с тканью положительного контроля и оценивали соответственно. ОЦЕНКА ИНТЕНСИВНОСТИ Отрицательно 0 Слабо 1 Умеренно 2 Сильно 3 |
10 дней с момента сбора образцов
|
Изменение экспрессии микроРНК 21 во всех трех группах с использованием ПЦР в реальном времени
Временное ограничение: 10 дней с момента сбора образцов
|
Принимая за 1 экспрессию miRNA21 в нормальном образце (N), рассчитывали экспрессию всех образцов. Используемая формула: количество копий = (количество * 6,022x1023) / (длина * 1x109 * 650)
|
10 дней с момента сбора образцов
|
Изменение уровня Е-кадгерина в ПЦР
Временное ограничение: 20 дней после сбора проб
|
После выделения ДНК из образцов биопсии праймеры для E-кадгерина были разработаны с использованием программного обеспечения Primer Express, синтезированы и очищены ВЭЖХ для ПЦР в реальном времени для количественного определения.
|
20 дней после сбора проб
|
Изменение уровня виментина в ПЦР
Временное ограничение: 20 дней после сбора проб
|
После выделения ДНК из образцов биопсии праймеры для виментина были разработаны с использованием программного обеспечения Primer Express, синтезированы и очищены ВЭЖХ для ПЦР в реальном времени для количественного определения.
|
20 дней после сбора проб
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
---|---|---|
Изменение экспрессии е-кадгерина в зависимости от категории заболевания клинически у пациентов с OSMF с привычками
Временное ограничение: 15 дней с момента сбора образцов
|
Уровень Е-кадгерина в образцах тканей по отношению к различным клиническим проявлениям заболевания в соответствии с системой классификации Kerr et al.
|
15 дней с момента сбора образцов
|
Изменение экспрессии е-кадгерина в зависимости от категории заболевания гистологически у пациентов с OSMF с привычками
Временное ограничение: 15 дней с момента сбора образцов
|
Уровень Е-кадгерина в образцах тканей по отношению к различным клиническим проявлениям заболевания в соответствии с системой классификации Канна и Андраде и др.
|
15 дней с момента сбора образцов
|
Изменение экспрессии виментина в зависимости от категории заболевания клинически у пациентов с OSMF с привычками
Временное ограничение: 15 дней с момента сбора образцов
|
Уровень виментина в образцах тканей по отношению к разным клиническим проявлениям в соответствии с системой классификации Kerr et al.
|
15 дней с момента сбора образцов
|
Изменение экспрессии виментина в зависимости от категории заболевания гистологически у пациентов с OSMF с привычками
Временное ограничение: 15 дней с момента сбора образцов
|
Уровень виментина в образцах тканей по отношению к различной гистологической экспрессии по системе классификации Ханны и Андраде.
|
15 дней с момента сбора образцов
|
Изменение экспрессии коллагена IV в зависимости от категории заболевания клинически у пациентов с ОСМФ с привычками
Временное ограничение: 15 дней с момента сбора образцов
|
Уровень коллагена-IV в образцах тканей по отношению к разным категориям клинической экспрессии в соответствии с системой классификации Kerr et al.
|
15 дней с момента сбора образцов
|
Изменение экспрессии коллагена IV в зависимости от категории заболевания гистологически у больных OSMF с привычками
Временное ограничение: 15 дней с момента сбора образцов
|
Уровень коллагена-IV в образцах тканей по отношению к различному гистологическому выражению в соответствии с системой классификации Ханны и Андреда и др.
|
15 дней с момента сбора образцов
|
Изменение экспрессии mi RNA 21 в зависимости от категории заболевания клинически у пациентов с OSMF с привычками
Временное ограничение: 15 дней с момента сбора образцов
|
Уровень миРНК 21 в образцах слюны по отношению к разным клиническим проявлениям OSMF в соответствии с системой классификации Kerr et al.
|
15 дней с момента сбора образцов
|
Изменение экспрессии mi RNA 21 в зависимости от категории заболевания гистологически у пациентов с OSMF с привычками
Временное ограничение: 15 дней с момента сбора образцов
|
Уровень миРНК 21 в образцах слюны по отношению к различной гистологической экспрессии в соответствии с системой классификации Khanna and Andred et al.
|
15 дней с момента сбора образцов
|
Соавторы и исследователи
Публикации и полезные ссылки
Общие публикации
- Yang Y, Li YX, Yang X, Jiang L, Zhou ZJ, Zhu YQ. Progress risk assessment of oral premalignant lesions with saliva miRNA analysis. BMC Cancer. 2013 Mar 19;13:129. doi: 10.1186/1471-2407-13-129.
- Sawant SS, Vaidya Mm, Chaukar DA, Alam H, Dmello C, Gangadaran P, Kannan S, Kane S, Dange PP, Dey N, Ranganathan K, D'Cruz AK. Clinical significance of aberrant vimentin expression in oral premalignant lesions and carcinomas. Oral Dis. 2014 Jul;20(5):453-65. doi: 10.1111/odi.12151. Epub 2013 Jul 19.
- Pinto GA, Vassallo J, Andrade LA, Magna LA. Immunohistochemical study of basement membrane collagen IV in uterine cervix carcinoma. Sao Paulo Med J. 1998 Nov-Dec;116(6):1846-51. doi: 10.1590/s1516-31801998000600004.
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Первичное завершение (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Завершение исследования (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- Oxford DC
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .
Клинические исследования Анализ ткани биопсии
-
Vanderbilt University Medical Center4DMedicalЗавершенный
-
Guna S.p.aПрекращеноБольшой вертельный болевой синдром | Чрезвертельный перелом | Ягодичный тендинит | GTPS - Большой вертельный болевой синдром | Заболевание сухожилий | Ягодичные мышцыИталия
-
M3 HealthIrmandade da Santa Casa de Misericordia de Sao PauloЕще не набираютГрыжа диска поясничного отделаБразилия
-
Zimmer BiometОтозван
-
University of MiamiАктивный, не рекрутирующий
-
NeoDynamics ABРекрутингРак молочной железыСоединенное Королевство
-
Michael RosenЗавершенныйВентральная грыжаСоединенные Штаты
-
ASTORA Women's HealthПрекращеноПролапс тазовых органовСоединенные Штаты
-
LifeCellПрекращено
-
J. Peter Rubin, MDЗавершенныйАмпутация | Раненый воин | Укорочение конечностейСоединенные Штаты