Klinisk evaluering av rask RNA-test for Covid-19 (CERrnaTc-19)

Rask, nøyaktig diagnose av Covid-19 vil i stor grad bidra til å forbedre den kliniske behandlingen av pasienter som har symptomer på mulig Covid-19. For øyeblikket tar det 2-3 dager før resultatene av standardtesten for viruset rapporteres. University of Oxford Institute of Biomedical Engineering har designet en ny test, som kan gi resultater på 30 minutter. Dette bruker en nese-/halspinne som den gjeldende standardtesten.

I den første fasen av forsøket ble vattpinnen sendt til laboratoriet i et tørt rør. I laboratoriet ble vattpinnen satt i et hetteglass med 1 ml vann, og en liten mengde (25 µL) av vannet ble lagt i et reagensrør. Dette reagensrøret inneholdt materialer som kan oppdage tilstedeværelsen av det nye koronaviruset (SARS-CoV-2). Reagensrøret varmes så enkelt opp til 65°C i 30 minutter, og hvis koronaviruset er tilstede, vil reagensen endre farge fra rosa til gul (positiv). Hvis det ikke er noe virus i prøven, forblir fargen rosa (negativ). Dette er designet for å være en veldig enkel test som ikke trenger spesialkompetanse eller utstyr, og som kan utføres på sykehus og til og med i primærhelsetjenesten. I denne studien hadde vi som mål å evaluere nøyaktigheten til denne nye testen. Vi planla å ta en ny vattpinne fra pasienter med mistenkt Covid-19 ved Watford General Hospital (som ble testet uansett) og å bruke disse vattpinneprøvene til å utføre den nye testen (under ideelle laboratorieforhold) så vel som standardtesten. Siden vi ikke var sikre på nøyaktigheten til den nye testen, ble ikke resultatene brukt til å ta beslutninger om behandling for pasienten. I den første kohorten på 173 pasienter ble det notert avvik med noen prøver sammenlignet med referanselaboratorieresultater. Vi undersøkte deretter om pasientene som hadde en positiv rask RNA-test, men en negativ «gullstandard»-test, var sanne positive, ved å invitere dem til en antistofftest. Dette avdekket at 20 av 161 pasienter med negativ referansetest hadde falskt positivt resultat på hurtigtesten. Disse falske positive kan skyldes forstyrrende stoffer i de kliniske prøvene, som påvirker den kolorimetriske deteksjonen basert på pH-endringer.

Med tanke på disse første resultatene og tilbakemeldingene, gjorde Oxford-teamet en rekke endringer i hurtigtesten:

1. Viral inaktivering - vattpinne legges i saltvann og varmes opp ved 95 °C i 5 minutter - som dreper viruset og gjør det trygt å bruke på pleiepunktet
2. Prøven fortynnes 1 av 10 for å unngå interaksjon med spytt
3. En "molekylær bryter" ble lagt til for å unngå falske positiver.

Den diagnostiske nøyaktigheten til den modifiserte testen ble deretter evaluert. Vi inviterte pasienter som ble screenet, og pasienter som hadde blitt screenet og funnet å være positive, til å delta i denne studien. Ettersom prevalensen av COVID-19 blant testede pasienter var lavere enn vi hadde estimert ved beregning av prøvestørrelsen (bare 12 av 173 var positive på referansetesten), ble utvalget økt med ytterligere 300 pasienter. Vi hadde som mål å raskt finne ut om den modifiserte testen er nøyaktig.

Den raske RNA-testen har potensial til å være et nyttig screeningsverktøy hvis den oppnår sammenlignbar følsomhet med dagens "gullstandard" med en rask og gjennomførbar tilnærming.