Klinische evaluatie van snelle RNA-test voor Covid-19 (CERrnaTc-19)

Een snelle, nauwkeurige diagnose van Covid-19 zou enorm helpen om de klinische behandeling van patiënten met symptomen van mogelijk Covid-19 te verbeteren. Momenteel duurt het 2-3 dagen voordat de resultaten van de standaardtest voor het virus worden gerapporteerd. Het University of Oxford Institute of Biomedical Engineering heeft een nieuwe test ontworpen, die binnen 30 minuten resultaten kan opleveren. Hierbij wordt een neus-/keeluitstrijkje gebruikt zoals de huidige standaardtest.

In de eerste fase van de proef werd het wattenstaafje in een droge buis naar het laboratorium gestuurd. In het laboratorium werd het wattenstaafje in een flesje met 1 ml water gedaan en een kleine hoeveelheid (25 µL) van het water werd in een reageerbuis gedaan. Deze reageerbuis bevatte materialen die de aanwezigheid van het nieuwe Coronavirus (SARS-CoV-2) kunnen detecteren. De reageerbuis wordt dan gewoon 30 minuten opgewarmd tot 65°C, en als het Coronavirus aanwezig is, zal het reagens van kleur veranderen van roze naar geel (positief). Als er geen virus in het monster aanwezig is, blijft de kleur roze (negatief). Dit is ontworpen als een zeer eenvoudige test waarvoor geen specialistische vaardigheden of apparatuur nodig zijn, en kan dus worden uitgevoerd in ziekenhuizen en zelfs in de eerstelijnszorg. In deze studie wilden we de nauwkeurigheid van deze nieuwe test evalueren. We waren van plan om een ​​tweede uitstrijkje te nemen van patiënten met verdenking op Covid-19 in het Watford General Hospital (die toch werden getest) en deze uitstrijkjes te gebruiken om de nieuwe test (in ideale laboratoriumomstandigheden) en de standaardtest uit te voeren. Omdat we niet zeker waren van de juistheid van de nieuwe test, werden de resultaten niet gebruikt om beslissingen te nemen over de behandeling van de patiënt. In het eerste cohort van 173 patiënten werden bij sommige monsters discrepanties opgemerkt in vergelijking met de resultaten van het referentielaboratorium. Vervolgens hebben we onderzocht of de patiënten die een positieve snelle RNA-test hadden, maar een negatieve "gouden standaard"-test, echt positief waren, door hen uit te nodigen voor een antilichaamtest. Hieruit bleek dat 20 van de 161 patiënten met een negatieve referentietest een vals positieve uitslag hadden op de sneltest. Deze valse positieven kunnen het gevolg zijn van storende stoffen in de klinische monsters, die de colorimetrische detectie op basis van pH-veranderingen beïnvloeden.

Met het oog op deze eerste resultaten en feedback heeft het Oxford-team een ​​aantal wijzigingen aangebracht aan de sneltest:

1. Virale inactivatie - het wattenstaafje wordt in een zoutoplossing geplaatst en gedurende 5 minuten verwarmd op 95°C - waardoor het virus wordt gedood en het veilig kan worden gebruikt op het zorgpunt
2. Het monster wordt 1 op 10 verdund om interactie met speeksel te voorkomen
3. Er is een "moleculaire schakelaar" toegevoegd om valse positieven te voorkomen.

De diagnostische nauwkeurigheid van de gewijzigde test werd vervolgens geëvalueerd. We nodigden patiënten die werden gescreend, en patiënten die waren gescreend en positief bevonden, uit om deel te nemen aan dit onderzoek. Omdat de prevalentie van COVID-19 onder geteste patiënten lager was dan we hadden ingeschat bij het berekenen van de steekproefomvang (slechts 12 van de 173 waren positief op de referentietest), werd de steekproef verhoogd met nog eens 300 patiënten. We wilden snel ontdekken of de aangepaste test klopt.

De snelle RNA-test heeft het potentieel om een ​​nuttig screeningsinstrument te zijn als het met een snelle en haalbare aanpak een vergelijkbare gevoeligheid krijgt voor de huidige "gouden standaard".