Клиническая оценка экспресс-теста РНК на Covid-19 (CERrnaTc-19)

Быстрая и точная диагностика Covid-19 в значительной степени поможет улучшить клиническое ведение пациентов с симптомами возможного Covid-19. В настоящее время результаты стандартного теста на вирус сообщаются через 2-3 дня. Институт биомедицинской инженерии Оксфордского университета разработал новый тест, результаты которого можно получить за 30 минут. При этом используется мазок из носа / горла, как и в текущем стандартном тесте.

На первом этапе исследования мазок отправляли в лабораторию в сухой пробирке. В лаборатории тампон помещали во флакон с водой объемом 1 мл, а небольшое количество (25 мкл) воды помещали в пробирку. Эта пробирка содержала материалы, которые могут обнаружить присутствие нового коронавируса (SARS-CoV-2). Затем пробирку просто нагревают до 65°C в течение 30 минут, и если коронавирус присутствует, реагент изменит цвет с розового на желтый (положительный результат). Если в образце нет вируса, цвет остается розовым (отрицательный). Это очень простой тест, не требующий специальных навыков или оборудования, поэтому его можно проводить в больницах и даже в учреждениях первичной медико-санитарной помощи. В этом исследовании мы стремились оценить точность этого нового теста. Мы планировали взять второй мазок у пациентов с подозрением на Covid-19 в больнице общего профиля Уотфорда (которых все равно проверяли) и использовать эти мазки для проведения нового теста (в идеальных лабораторных условиях), а также стандартного теста. Поскольку мы не были уверены в точности нового теста, его результаты не использовались для принятия решения о лечении пациента. В начальной группе из 173 пациентов были отмечены расхождения с некоторыми образцами по сравнению с результатами референсной лаборатории. Затем мы исследовали, были ли пациенты с положительным экспресс-тестом на РНК, но отрицательным тестом «золотого стандарта», действительно положительными, предложив им пройти тест на антитела. Это показало, что у 20 из 161 пациента с отрицательным эталонным тестом экспресс-тест дал ложноположительный результат. Эти ложноположительные результаты могут возникать из-за мешающих веществ в клинических образцах, которые влияют на колориметрическое определение, основанное на изменениях рН.

С учетом этих первых результатов и отзывов команда Оксфорда внесла ряд изменений в экспресс-тест:

1. Вирусная инактивация — тампон помещают в физиологический раствор и нагревают при 95°C в течение 5 минут, что убивает вирус и делает его безопасным для использования в местах оказания медицинской помощи.
2. Образец разводят 1 к 10, чтобы избежать взаимодействия со слюной.
3. Был добавлен «молекулярный переключатель», чтобы избежать ложных срабатываний.

Затем оценивали диагностическую точность модифицированного теста. Мы пригласили пациентов, которые проходили скрининг, и пациентов, которые прошли скрининг и оказались положительными, принять участие в этом исследовании. Поскольку распространенность COVID-19 среди протестированных пациентов была ниже, чем мы предполагали при расчете размера выборки (только 12 из 173 дали положительный результат в контрольном тесте), выборка была увеличена еще на 300 пациентов. Мы стремились быстро выяснить, является ли модифицированный тест точным.

Экспресс-тест на РНК потенциально может стать полезным инструментом скрининга, если он приобретет чувствительность, сравнимую с текущим «золотым стандартом», при быстром и осуществимом подходе.