Klinisk evaluering af hurtig RNA-test for Covid-19 (CERrnaTc-19)

Hurtig, præcis diagnose af Covid-19 ville i høj grad bidrage til at forbedre den kliniske behandling af patienter med symptomer på mulig Covid-19. I øjeblikket tager resultaterne af standardtesten for virussen 2-3 dage at blive rapporteret. University of Oxford Institute of Biomedical Engineering har designet en ny test, som kan give resultater på 30 minutter. Dette bruger en næse-/halspodning som den nuværende standardtest.

I den første fase af forsøget blev podepinden sendt til laboratoriet i et tørt rør. I laboratoriet blev podepinden sat i et hætteglas med 1 ml vand, og en lille mængde (25 µL) af vandet blev sat i et reagensglas. Dette reagensglas indeholdt materialer, som kan påvise tilstedeværelsen af ​​den nye Coronavirus (SARS-CoV-2). Reagensglasset opvarmes derefter blot til 65°C i 30 minutter, og hvis Coronavirus er til stede, vil reagenset skifte farve fra pink til gul (positiv). Hvis der ikke er nogen virus til stede i prøven, forbliver farven lyserød (negativ). Dette er designet til at være en meget enkel test, der ikke kræver specialistfærdigheder eller udstyr, og som derfor kunne udføres på hospitaler og endda i primærpleje. I denne undersøgelse havde vi til formål at evaluere nøjagtigheden af ​​denne nye test. Vi planlagde at tage en ny podning fra patienter med mistanke om Covid-19 på Watford General Hospital (som alligevel blev testet) og at bruge disse podninger til at udføre den nye test (under ideelle laboratorieforhold) såvel som standardtesten. Da vi ikke var sikre på nøjagtigheden af ​​den nye test, blev dens resultater ikke brugt til at træffe beslutninger om behandling af patienten. I den indledende kohorte på 173 patienter blev der noteret uoverensstemmelser med nogle prøver sammenlignet med referencelaboratorieresultater. Vi undersøgte derefter, om de patienter, der havde en positiv hurtig RNA-test, men en negativ "guldstandard"-test, var sande positive, ved at invitere dem til en antistoftest. Dette afslørede, at 20 ud af 161 patienter med en negativ referencetest havde et falsk positivt resultat på hurtigstesten. Disse falske positive kan skyldes forstyrrende stoffer i de kliniske prøver, som påvirker den kolorimetriske detektion baseret på pH-ændringer.

I lyset af disse første resultater og feedback foretog Oxford-teamet en række ændringer af den hurtige test:

1. Viral inaktivering - podepinden anbringes i saltvand og opvarmes til 95°C i 5 minutter - hvilket dræber virussen og gør den sikker at bruge på plejestedet
2. Prøven fortyndes 1 ud af 10 for at undgå interaktion med spyt
3. En "molekylær switch" blev tilføjet for at undgå falske positiver.

Den diagnostiske nøjagtighed af den modificerede test blev derefter evalueret. Vi inviterede patienter, der blev screenet, og patienter, der var blevet screenet og fundet positive, til at deltage i denne undersøgelse. Da prævalensen af ​​COVID-19 blandt testede patienter var lavere, end vi havde estimeret ved beregning af stikprøvestørrelsen (kun 12 af 173 var positive på referencetesten), blev stikprøven øget med yderligere 300 patienter. Vi havde til formål hurtigt at opdage, om den modificerede test er nøjagtig.

Den hurtige RNA-test har potentiale til at være et nyttigt screeningsværktøj, hvis den opnår sammenlignelig følsomhed med den nuværende "guldstandard" med en hurtig og gennemførlig tilgang.