Klinisk utvärdering av Rapid RNA-test för Covid-19 (CERrnaTc-19)

Snabb och korrekt diagnos av Covid-19 skulle i hög grad hjälpa till att förbättra den kliniska hanteringen av patienter som uppvisar symptom på eventuell Covid-19. För närvarande tar det 2-3 dagar innan resultatet av standardtestet för viruset rapporteras. University of Oxford Institute of Biomedical Engineering har designat ett nytt test som kan ge resultat på 30 minuter. Detta använder en näs-/halspinne som det nuvarande standardtestet.

I den första fasen av försöket skickades provpinnen till laboratoriet i ett torrt rör. I laboratoriet lades pinnen i en flaska med 1 ml vatten och en liten mängd (25 µL) av vattnet placerades i ett provrör. Detta provrör innehöll material som kan upptäcka närvaron av det nya Coronaviruset (SARS-CoV-2). Provröret värms sedan helt enkelt upp till 65°C i 30 minuter, och om coronaviruset är närvarande kommer reagenset att ändra färg från rosa till gult (positivt). Om det inte finns något virus i provet förblir färgen rosa (negativ). Detta är utformat för att vara ett mycket enkelt test som inte kräver specialistkunskaper eller utrustning, och kan därför utföras på sjukhus och till och med i primärvården. I denna studie syftade vi till att utvärdera noggrannheten av detta nya test. Vi planerade att ta en andra pinne från patienter med misstänkt Covid-19 på Watford General Hospital (som testades ändå) och att använda dessa pinnprover för att utföra det nya testet (under idealiska laboratorieförhållanden) såväl som standardtestet. Eftersom vi inte var säkra på riktigheten av det nya testet användes dess resultat inte för att fatta beslut om behandling för patienten. I den initiala kohorten på 173 patienter noterades avvikelser med några prover jämfört med referenslabbresultat. Vi undersökte sedan om de patienter som hade ett positivt snabbt RNA-test, men ett negativt "gold standard"-test, var sant positiva, genom att bjuda in dem till ett antikroppstest. Detta avslöjade att 20 av 161 patienter med ett negativt referenstest hade ett falskt positivt resultat på snabbtestet. Dessa falska positiva resultat kan bero på störande substanser i de kliniska proverna, vilket påverkar den kolorimetriska detektionen baserat på pH-förändringar.

Med tanke på dessa första resultat och feedback gjorde Oxford-teamet ett antal ändringar av snabbtestet:

1. Viral inaktivering - pinnen placeras i saltlösning och värms upp till 95°C i 5 minuter - vilket dödar viruset och gör det säkert att använda vid vårdplatsen
2. Provet späds 1 på 10 för att undvika interaktion med saliv
3. En "molekylär switch" lades till för att undvika falska positiva resultat.

Den diagnostiska noggrannheten för det modifierade testet utvärderades sedan. Vi bjöd in patienter som screenades, och patienter som hade screenats och befunnits vara positiva, att delta i denna studie. Eftersom prevalensen av covid-19 bland testade patienter var lägre än vad vi hade uppskattat vid beräkning av provstorleken (endast 12 av 173 var positiva på referenstestet), ökades urvalet med ytterligare 300 patienter. Vi strävade efter att snabbt upptäcka om det modifierade testet är korrekt.

Det snabba RNA-testet har potential att bli ett användbart screeningverktyg om det får jämförbar känslighet med den nuvarande "guldstandarden" med ett snabbt och genomförbart tillvägagångssätt.