Evaluación clínica de la prueba rápida de ARN para Covid-19 (CERrnaTc-19)

Un diagnóstico rápido y preciso de Covid-19 ayudaría enormemente a mejorar el manejo clínico de los pacientes que presentan síntomas de posible Covid-19. Actualmente, los resultados de la prueba estándar para el virus tardan de 2 a 3 días en informarse. El Instituto de Ingeniería Biomédica de la Universidad de Oxford ha diseñado una nueva prueba que puede producir resultados en 30 minutos. Esto utiliza un hisopo nasal/garganta como la prueba estándar actual.

En la primera fase del ensayo, el hisopo se envió al laboratorio en un tubo seco. En el laboratorio, el hisopo se puso en un vial de 1 mL de agua y una pequeña cantidad (25 µL) del agua se puso en un tubo de ensayo. Este tubo de ensayo contenía materiales que pueden detectar la presencia del nuevo coronavirus (SARS-CoV-2). Luego, el tubo de ensayo simplemente se calienta a 65°C durante 30 minutos, y si el coronavirus está presente, el reactivo cambiará de color de rosa a amarillo (positivo). Si no hay virus presente en la muestra, el color permanece rosa (negativo). Está diseñado para ser una prueba muy simple que no necesita habilidades o equipos especializados, por lo que podría llevarse a cabo en hospitales e incluso en atención primaria. En este estudio nuestro objetivo fue evaluar la precisión de esta nueva prueba. Planeamos tomar un segundo hisopo de pacientes con sospecha de Covid-19 en el hospital Watford General (que de todos modos estaban siendo evaluados) y usar estos hisopos para realizar la nueva prueba (en condiciones ideales de laboratorio), así como la prueba estándar. Como no estábamos seguros de la precisión de la nueva prueba, sus resultados no se utilizaron para tomar decisiones sobre el tratamiento del paciente. En la cohorte inicial de 173 pacientes, se observaron discrepancias con algunas muestras en comparación con los resultados del laboratorio de referencia. Luego investigamos si los pacientes que tenían una prueba rápida de ARN positiva, pero una prueba "estándar de oro" negativa, eran verdaderos positivos, invitándolos a hacerse una prueba de anticuerpos. Esto reveló que 20 de 161 pacientes con una prueba de referencia negativa tuvieron un resultado falso positivo en la prueba rápida. Estos falsos positivos pueden deberse a sustancias que interfieren en las muestras clínicas, lo que afecta la detección colorimétrica basada en cambios de pH.

En vista de estos primeros resultados y comentarios, el equipo de Oxford realizó una serie de modificaciones en la prueba rápida:

1. Inactivación viral: el hisopo se coloca en solución salina y se calienta a 95 °C durante 5 minutos, lo que elimina el virus y lo hace seguro para su uso en el punto de atención.
2. La muestra se diluye 1 en 10 para evitar la interacción con la saliva.
3. Se agregó un "interruptor molecular" para evitar falsos positivos.

Luego se evaluó la precisión diagnóstica de la prueba modificada. Invitamos a los pacientes que estaban siendo evaluados y a los pacientes que habían sido evaluados y resultaron positivos a participar en este estudio. Como la prevalencia de COVID-19 entre los pacientes analizados fue menor de lo que habíamos estimado al calcular el tamaño de la muestra (solo 12 de 173 dieron positivo en la prueba de referencia), la muestra se incrementó en 300 pacientes más. Nuestro objetivo era descubrir rápidamente si la prueba modificada es precisa.

La prueba rápida de ARN tiene el potencial de ser una herramienta de detección útil si adquiere una sensibilidad comparable al "estándar de oro" actual con un enfoque rápido y factible.