Przewidywanie złośliwej transformacji leukoplakii jamy ustnej za pomocą testu immunologicznego opartego na MAGE-A (PREDICT-OLP)

Rak płaskonabłonkowy jamy ustnej (OSCC) należy do najczęstszych nowotworów złośliwych na świecie. Pomimo wprowadzenia możliwości rekonstrukcji mikrochirurgicznej i postępu w multimodalnej terapii nowotworowej rokowanie nie uległo istotnej poprawie w ciągu ostatnich 30 lat.

Najważniejszym aspektem zwiększania przeżywalności jest wczesne wykrywanie OSCC i zmian prekursorowych. Do 67% OSCC rozwija się na podstawie leukoplakii jamy ustnej (OLP), która często występuje przed rozpoznaniem raka. Leczenie OLP uzależnione jest od ryzyka transformacji złośliwej. Podejścia terapeutyczne obejmują zarówno prostą obserwację, jak i całkowite wycięcie chirurgiczne OLP. Dowody naukowe dotyczące obchodzenia się z OLP są niewielkie. Bieżąca literatura przedstawia brakujące dowody w postępowaniu terapeutycznym OLP. Wczesna identyfikacja OLP z wysokim ryzykiem zwyrodnienia złośliwego jest istotnym zagadnieniem klinicznym, ponieważ ok. Każdego roku 2% OLP przechodzi transformację złośliwą. W zmianach z dysplazją odsetek ten wzrasta do około 17%.

Złotym standardem określania ryzyka transformacji złośliwej OLP jest histologiczne określenie stopnia dysplazji. Wraz ze wzrostem histologicznego stopnia dysplazji wzrasta ryzyko rozwoju PECM na podstawie OLP. Decyzja o leczeniu chirurgicznym lub zachowawczym zależy obecnie od stopnia dysplazji OLP. Ocena histopatologiczna stopnia dysplazji jest subiektywna i zależy od doświadczenia patologa dokonującego oceny. Jednak główną wadą oceny potencjału transformacji złośliwej tą metodą jest to, że wiele zmian prekursorowych nie odpowiada histopatologicznie określonemu stopniowi dysplazji. Tak więc 0-3% hiperplazji (D0) i do 30% łagodnych dysplazji (D1) przekształca się w OSCC. D0 OLP to zmiany, które zwykle obserwuje się tylko zgodnie z aktualnymi zaleceniami terapeutycznymi. Tym samym ocena godności OLP i długoterminowa prognoza ryzyka rozwoju OSCC nie są miarodajne. Należy zidentyfikować OLP o histopatologicznie niskim potencjale złośliwości, ale biologicznie komórkowo prawdopodobną transformację złośliwą, aby zapobiec niedostatecznemu leczeniu tych pacjentów.

Celem tego badania eksploracyjnego jest zbadanie, czy złośliwą transformację OLP można wiarygodnie przewidzieć za pomocą metod immunohistochemicznych i biologii molekularnej. Znaczący związek ekspresji MAGE-A ze złośliwą transformacją OLP do OSCC wykazano już w badaniach retrospektywnych. Obecnie konieczne jest dalsze rozwijanie tych dostępnych procedur testowych i ocena ich w badaniu prospektywnym w celu przeniesienia ich do rutyny klinicznej. Czułość i swoistość badanych markerów zostaną zbadane w prospektywnym, wieloośrodkowym układzie. Badana będzie niewyselekcjonowana grupa pacjentów. Celem jest ustanowienie procedury testowej, która może być stosowana w sposób efektywny kosztowo. Ekspresja MAGE-A powinna służyć jako wskaźnik i do zastosowania nowych, innowacyjnych koncepcji terapeutycznych, takich jak immunoterapia OLP.

Zostaną udzielone odpowiedzi na następujące pytania:

i) Czy OLP z transformacją złośliwą wykazuje zwiększoną ekspresję MAGE-A w przedziale czasowym 3 lat (okres obserwacji do 5 lat)? ii) Jak wysoka jest czułość i swoistość ekspresji MAGE-A jako predykcyjnego testu diagnostycznego? Czy wykrywanie MAGE-A metodą immunohistochemiczną lub biologii molekularnej (RT-PCR) lepiej nadaje się jako test diagnostyczny? iii) Czy MAGE-A może być z powodzeniem stosowany jako test diagnostyczny w praktyce? iv) Czy istnieje związek między ekspresją MAGE-A a zmianami immunologicznymi poprzedzającymi transformację złośliwą (polaryzacja makrofagów, naciek limfocytów T, ekspresja punktu kontrolnego, ekspresja TLR)? v) Czy zmiany immunologiczne w OLP są potencjalnie podatne na leczenie immunomodulujące?

Krótkie podsumowanie protokołu badania:

Po poinformowaniu pacjenta i włączeniu go do badania, pierwszym krokiem jest wykonanie dokumentacji fotograficznej, a następnie wykonanie biopsji nacięcia OLP. Lekarz prowadzący ma swobodę wyboru, czy pobrać próbkę z jednego, czy z kilku miejsc zmiany. Ta procedura jest zgodna ze standardowymi wytycznymi diagnostycznymi i nie jest środkiem specyficznym dla badania. W związku z tym nie ma odchyleń od rutyny klinicznej badania i nie jest wymagany żaden środek inwazyjny w badaniu. Pobrana próbka jest następnie dzielona. Całkowita ilość pobranej tkanki odpowiada ilości pobranej rutynowo poza badaniem. Jedna część próbki jest konwencjonalnie utrwalana w formalinie. Druga część (maks. 5x5x2mm) jest później konserwowana w RNA do późniejszej analizy PCR. Obie próbki zostaną przesłane do ośrodka badawczego w Erlangen. Tam ocena histologiczna tkanki odbywa się w Instytucie Patologii Szpitala Uniwersyteckiego Erlangen w ramach rutynowej diagnostyki. Wynik jest przekazywany lekarzowi prowadzącemu i ośrodku badawczemu. Analizy immunohistochemiczne i biologii molekularnej przeprowadzane są w laboratoriach Chirurgii Stomatologicznej i Szczękowo-Twarzowej Erlangen. Wyniki analiz nie są przekazywane lekarzowi prowadzącemu (zaślepienie). Decyzję o leczeniu podejmuje się wyłącznie na podstawie klinicznych i klasycznych parametrów histologicznych (stopień dysplazji). Monitorowane są uszkodzenia D0 i D1. Zmiany D2 i D3 leczy się operacyjnie lub koagulacją laserową w zależności od decyzji lekarza prowadzącego i pacjenta. Odpowiada to aktualnemu standardowi klinicznemu. Jeśli pacjent odrzuca leczenie zmiany i chce dalej obserwować jej postęp, pozostaje włączony do badania. Okres obserwacji w okresie badania wynosi 3 lata (oceny również po 2 latach). Po zakończeniu badania planowana jest dalsza 2-letnia obserwacja, aby uzyskać łączną 5-letnią obserwację.