Predikce maligní transformace orální leukoplakie pomocí imunoskóre na bázi MAGE-A (PREDICT-OLP)

Skvamocelulární karcinomy ústní dutiny (OSCC) patří celosvětově mezi nejčastější malignity. Přes zavedení možností mikrochirurgické rekonstrukce a pokroky v multimodální terapii nádorů se prognóza v posledních 30 letech výrazně nezlepšila.

Nejdůležitější aspekt pro zvýšení míry přežití je spatřován v časné detekci OSCC a jeho prekurzorových lézí. Až 67 % OSCC vzniká na podkladě orální leukoplakie (OLP), která se často vyskytuje před diagnózou karcinomu. Léčba OLP závisí na riziku maligní transformace. Terapeutické přístupy sahají od jednoduchého pozorování až po kompletní chirurgickou excizi OLP. Vědecké důkazy týkající se zacházení s OLP jsou nízké. Současná literatura nastiňuje chybějící důkazy v terapeutickém managementu OLP. Včasná identifikace OLP s vysokým rizikem maligní degenerace je relevantní klinickou otázkou, protože cca. 2 % OLP se každý rok maligně transformují. U lézí s dysplazií se tato míra zvyšuje na asi 17 %.

Zlatým standardem pro stanovení rizika maligní transformace OLP je histologické stanovení stupně dysplazie. Se zvyšujícím se histologickým stupněm dysplazie roste i riziko rozvoje PECM na podkladě OLP. Rozhodnutí pro chirurgickou nebo konzervativní terapii v současnosti závisí na stupni dysplazie OLP. Histopatologické hodnocení stupně dysplazie je subjektivní a závisí na zkušenostech patologa, který hodnotí. Hlavní nevýhodou při hodnocení potenciálu maligní transformace touto metodou je však to, že mnoho prekurzorových lézí nesleduje histopatologicky stanovený stupeň dysplazie. Tedy 0-3 % hyperplazií (D0) a až 30 % mírných dysplazií (D1) se transformují na OSCC. D0 OLP jsou léze, které jsou obvykle pozorovány pouze podle současných terapeutických doporučení. Posouzení důstojnosti OLP a dlouhodobá predikce rizika pro rozvoj OSCC tedy nejsou spolehlivé. Aby se zabránilo nedostatečné léčbě těchto pacientů, musí být identifikována OLP s histopatologicky nízkým maligním potenciálem, ale s buněčně biologicky pravděpodobnou maligní transformací.

Cílem této explorativní studie je zjistit, zda lze pomocí imunohistochemických a molekulárně biologických metod spolehlivě předpovědět maligní transformaci OLP. Významná asociace exprese MAGE-A s maligní transformací OLP na OSCC již byla prokázána v retrospektivních studiích. Nyní je nutné tyto dostupné testovací postupy dále rozvíjet a vyhodnocovat v prospektivní studii, aby byly převedeny do klinické rutiny. Senzitivita a specificita vyšetřovaných markerů bude zkoumána v prospektivním, multicentrickém prostředí. Bude vyšetřena nevybraná skupina pacientů. Cílem je stanovit zkušební postup, který lze použít nákladově efektivní. Exprese MAGE-A by měla sloužit jako indikátor a pro aplikaci nových, inovativních terapeutických konceptů, jako je imunoterapie OLP.

Budou zodpovězeny následující otázky:

i) Vykazuje OLP s maligní transformací zvýšenou expresi MAGE-A v časovém intervalu 3 let (sledování až 5 let)? ii) Jak vysoká je senzitivita a specificita exprese MAGE-A jako prediktivního diagnostického testu? Je imunohistochemická nebo molekulárně biologická (RT-PCR) detekce MAGE-A vhodnější jako diagnostický test? iii) Lze MAGE-A úspěšně použít jako diagnostický test v praxi? iv) Existuje souvislost mezi expresí MAGE-A a imunologickými změnami předcházejícími maligní transformaci (polarizace makrofágů, infiltrace T lymfocytů, exprese kontrolního bodu, exprese TLR)? v) Jsou imunologické změny v OLP potenciálně přístupné imunomodulační léčbě?

Krátké shrnutí protokolu studie:

Po informování a zařazení pacienta do studie je prvním krokem fotodokumentace a následně biopsie řezu OLP. Ošetřující lékař se může svobodně rozhodnout, zda odebere vzorek z jednoho nebo více míst léze. Tento postup je v souladu se standardními diagnostickými pokyny a není opatřením specifickým pro studii. Neexistuje tedy žádná odchylka od klinické rutiny pro studii a žádná invazivní opatření, která studie vyžaduje. Odebraný vzorek se pak rozdělí. Celkové množství odebrané tkáně odpovídá množství odebranému v rutině mimo studii. Jedna část vzorku je konvenčně fixována ve formalínu. Druhá část (max. 5x5x2mm) je uchován v RNA později pro pozdější PCR analýzu. Oba vzorky budou zaslány do studijního centra v Erlangenu. Tam probíhá histologické hodnocení tkáně v Patologickém ústavu FN Erlangen v rámci rutinní diagnostiky. Výsledek je sdělen ošetřujícímu lékaři a studijnímu centru. Imunohistochemické a molekulárně biologické analýzy jsou prováděny v laboratořích ústní a čelistní chirurgie Erlangen. Výsledky rozborů se nesdělují ošetřujícímu lékaři (zaslepení). Rozhodnutí o terapii se provádí pouze na základě klinických a klasických histologických parametrů (stupeň dysplazie). Léze D0 a D1 jsou monitorovány. Léze D2 a D3 se léčí chirurgicky nebo laserkoagulací v závislosti na rozhodnutí ošetřujícího lékaře a pacienta. To odpovídá současnému klinickému standardu. Pokud pacient odmítne léčbu léze a přeje si nadále pozorovat její průběh, zůstává zařazen do studie. Doba sledování po dobu studia je 3 roky (hodnocení i po 2 letech). Po dokončení studie je plánováno další sledování v délce 2 let, aby bylo dosaženo celkového sledování 5 let.