Suun leukoplakian pahanlaatuisen transformaation ennustaminen käyttämällä MAGE-A-pohjaista immunoscorea (PREDICT-OLP)

Suun okasolusyöpä (OSCC) on yksi yleisimmistä pahanlaatuisista kasvaimista maailmanlaajuisesti. Huolimatta mikrokirurgisten jälleenrakennusvaihtoehtojen käyttöönotosta ja multimodaalisen kasvainhoidon edistymisestä, ennuste ei ole parantunut merkittävästi viimeisen 30 vuoden aikana.

Tärkein näkökohta eloonjäämisasteen lisäämisessä on OSCC:n ja sen esiastevaurioiden varhainen havaitseminen. Jopa 67 % OSCC:stä kehittyy suun leukoplakian (OLP) perusteella, joka esiintyy usein ennen karsinooman diagnosointia. OLP-hoito riippuu pahanlaatuisen transformaation riskistä. Terapeuttiset lähestymistavat vaihtelevat yksinkertaisesta tarkkailusta OLP:n täydelliseen kirurgiseen poistoon. Tieteellinen näyttö OLP:n käsittelystä on vähäistä. Nykyisessä kirjallisuudessa esitetään puuttuvia todisteita OLP:n terapeuttisesta hoidosta. Korkean pahanlaatuisen rappeutumisen riskin omaavan OLP:n varhainen tunnistaminen on olennainen kliininen kysymys, koska noin. 2 % OLP:ista muuttuu pahanlaatuiseksi joka vuosi. Dysplasiasta kärsivissä leesioissa tämä osuus nousee noin 17 prosenttiin.

Kultastandardi OLP:n pahanlaatuisen transformaation riskin määrittämisessä on dysplasian asteen histologinen määritys. Dysplasian histologisen asteen kasvaessa lisääntyy myös PECM:n kehittymisen riski OLP:n perusteella. Päätös kirurgisesta tai konservatiivisesta hoidosta riippuu tällä hetkellä OLP:n dysplasian asteesta. Dysplasian asteen histopatologinen arviointi on subjektiivinen ja riippuu arvioinnin tekevän patologin kokemuksesta. Suurin haitta arvioitaessa pahanlaatuisen transformaatiopotentiaalia tällä menetelmällä on kuitenkin se, että monet prekursorileesiot eivät noudata histopatologisesti määritettyä dysplasian astetta. Siten 0-3 % hyperplasioista (D0) ja jopa 30 % lievistä dysplasioista (D1) muuttuvat OSCC:ksi. D0 OLP ovat leesioita, joita yleensä havaitaan vain nykyisten hoitosuositusten mukaisesti. Näin ollen OLP:n arvokkuuden arviointi ja OSCC:n kehittymisen riskin pitkän aikavälin ennuste eivät ole luotettavia. OLP, jolla on histopatologisesti alhainen pahanlaatuisuuspotentiaali, mutta solubiologisesti todennäköinen pahanlaatuinen transformaatio, on tunnistettava, jotta voidaan estää näiden potilaiden alihoito.

Tämän tutkivan tutkimuksen tavoitteena on selvittää, voidaanko OLP:n pahanlaatuinen transformaatio luotettavasti ennustaa immunohistokemiallisilla ja molekyylibiologisilla menetelmillä. MAGE-A:n ilmentymisen merkittävä yhteys OLP:n pahanlaatuiseen transformaatioon OSCC:ksi on jo osoitettu retrospektiivisissä tutkimuksissa. Nyt on tarpeen kehittää näitä saatavilla olevia testimenetelmiä edelleen ja arvioida niitä tulevassa tutkimuksessa, jotta ne voidaan siirtää kliiniseen rutiiniin. Tutkittujen markkerien herkkyyttä ja spesifisyyttä tutkitaan prospektiivisessa, monikeskusympäristössä. Ei-valittu potilasryhmä tutkitaan. Tavoitteena on luoda kustannustehokkaasti käytettävä testausmenettely. MAGE-A-ilmentymän tulisi toimia indikaattorina ja uusien, innovatiivisten hoitokonseptien, kuten OLP:n immunoterapian, soveltamisessa.

Seuraaviin kysymyksiin vastataan:

i) Osoittaako OLP, jossa on pahanlaatuinen transformaatio, lisääntynyttä MAGE-A-ekspressiota 3 vuoden aikavälillä (seuranta 5 vuoteen asti)? ii) Kuinka korkea on MAGE-A:n ilmentymisen herkkyys ja spesifisyys ennustavana diagnostisena testinä? Soveltuuko MAGE-A:n immunohistokemiallinen tai molekyylibiologinen (RT-PCR) havaitseminen paremmin diagnostiseksi testiksi? iii) Voidaanko MAGE-A:ta käyttää menestyksekkäästi diagnostisena testinä käytännössä? iv) Onko MAGE-A:n ilmentymisen ja pahanlaatuista transformaatiota edeltävien immunologisten muutosten välillä yhteyttä (makrofagien polarisaatio, T-solujen infiltraatio, tarkistuspisteen ilmentyminen, TLR-ilmentyminen)? v) Ovatko OLP:n immunologiset muutokset mahdollisesti soveltuvia immunomoduloivaan hoitoon?

Lyhyt yhteenveto tutkimusprotokollasta:

Kun potilas on informoitu ja otettu mukaan tutkimukseen, ensimmäinen vaihe on valokuvadokumentaatio ja sitten OLP:n viiltobiopsia. Hoitava lääkäri voi vapaasti valita, ottaako hän näytteen yhdestä vai useammasta leesion kohdasta. Tämä toimenpide on standardidiagnostisten ohjeiden mukainen, eikä se ole tutkimuskohtainen toimenpide. Siten tutkimuksen kliinisestä rutiinista ei poikkea eikä tutkimuksessa vaadita invasiivista toimenpidettä. Sitten otettu näyte jaetaan. Otetun kudoksen kokonaismäärä vastaa rutiinissa tutkimuksen ulkopuolelta otettua määrää. Yksi osa näytteestä on perinteisesti kiinnitetty formaliiniin. Toinen osa (max. 5x5x2mm) säilytetään RNA:ssa myöhemmin myöhempää PCR-analyysiä varten. Molemmat näytteet lähetetään Erlangeniin tutkimuskeskukseen. Siellä kudoksen histologinen arviointi tapahtuu Erlangenin yliopistollisen sairaalan patologiisessa instituutissa rutiinidiagnostiikan puitteissa. Tulos välitetään hoitavalle lääkärille ja tutkimuskeskukselle. Immunohistokemialliset ja molekyylibiologiset analyysit tehdään Erlangenin suu- ja leukakirurgian laboratorioissa. Analyysin tuloksia ei ilmoiteta hoitavalle lääkärille (sokeutus). Hoitopäätös tehdään vain kliinisten ja klassisten histologisten parametrien (dysplasian aste) perusteella. D0- ja D1-leesioita seurataan. D2- ja D3-leesiot hoidetaan kirurgisesti tai laserkoagulaatiolla hoitavan lääkärin ja potilaan päätöksestä riippuen. Tämä vastaa nykyistä kliinistä standardia. Jos potilas hylkää leesion hoidon ja haluaa jatkaa sen etenemisen seurantaa, hän pysyy mukana tutkimuksessa. Opintojakson seuranta-aika on 3 vuotta (arvioinnit myös 2 vuoden kuluttua). Tutkimuksen päätyttyä suunnitellaan 2 vuoden lisäseurantaa, jotta kokonaisseuranta olisi 5 vuotta.