Ostre działanie cierpkiej wiśni na kwas moczowy i biomarkery ryzyka CVD u zdrowych osób

Zdrowi, niepalący, dorośli ochotnicy (n = 15) zostaną zrekrutowani do dwukierunkowego, krzyżowego, randomizowanego, kontrolowanego placebo badania.

Wielkość próby 13 została obliczona na podstawie danych z White et al. (2018), wykorzystując główny wynik zmiany poziomu kwasu moczowego w surowicy. Ustalono, że międzyosobnicze różnice w stężeniu moczanów w surowicy wynosiły około 50 µmol/l. Zmienność wewnątrzosobnicza dla soku jabłkowego wynosiła około 35 µmol/l. Oszacowano, że sok wiśniowy spowoduje spadek stężenia moczanów w surowicy o około 15 µmol/l (Jacob i in., 2003). Dlatego potrzebnych będzie 13 uczestników, aby wykryć tę zmianę z mocą 80% na poziomie alfa 0,05.

Uczestnicy będą unikać forsownych ćwiczeń przez 72 godziny przed badaniem do 24 godzin po spożyciu testowanych napojów; zgodność zostanie oceniona poprzez wypełnienie dzienniczka aktywności fizycznej. Będą również przestrzegać diety o niskiej zawartości polifenoli przez 48 godzin przed badaniem do 24 godzin po spożyciu testowanych napojów; uczestnicy otrzymają listę produktów spożywczych/napojów, których należy unikać, a zgodność zostanie oceniona poprzez wypełnienie dzienniczka żywieniowego. Uczestnicy otrzymają instrukcje dotyczące pokarmów, których należy unikać oraz gotowego posiłku z makaronem o niskiej zawartości polifenoli, deseru i wody o niskiej zawartości azotanów do spożycia wieczorem poprzedzającym dzień badania.

Uczestnicy wezmą udział w laboratorium po całonocnym poście. Ciśnienie krwi (centralne i ramienne) oraz sztywność tętnic będą mierzone za pomocą nieinwazyjnego urządzenia Vicorder. Próbka krwi z nakłucia żyły zostanie pobrana przez badacza przeszkolonego w zakresie upuszczania krwi przed spożyciem napoju testowego. Podczas każdego nakłucia żyły zostanie pobrane około 10 ml krwi. Zostanie również pobrana próbka moczu. Uczestnicy wypijają 250 ml cierpkiego soku wiśniowego lub neutralnej kontroli (wody) dwukrotnie, w odstępie co najmniej jednego tygodnia; kolejność sekwencji będzie losowa. Sok wiśniowy zawiera 30 ml koncentratu wiśniowego rozcieńczonego w 220 ml wody. Kolejne próbki krwi żylnej zostaną pobrane 1 i 2 godziny po spożyciu. Zostaną one uzupełnione próbkami pobranymi z palca pobranymi 3, 5 i 24 godziny po wypiciu. Pomiary sztywności tętnic po spożyciu zostaną wykonane 1, 2, 3, 5 i 24 godziny po spożyciu. Dodatkowe próbki moczu zostaną również pobrane między 0-2, 2-4, 4-5, 5-8, 8-11 i 11-24 godzinami po spożyciu napojów testowych. Spożycie wody przez uczestników podczas każdej wizyty w laboratorium będzie standaryzowane na poziomie 500 ml. Uczestnicy otrzymają kanapkę o niskiej zawartości polifenoli, gotową kolację z makaronem, deser, przekąski i wodę o niskiej zawartości azotanów do spożycia po 5-godzinnych pomiarach. Uczestnicy wrócą do laboratorium następnego ranka po 12-godzinnym poście na 24-godzinne pomiary.

Krew będzie analizowana pod kątem stężenia kwasu moczowego i kreatyniny w surowicy we wszystkich punktach czasowych oraz CRP (miara stanu zapalnego) na początku badania, 2 i 5 godzin po wypiciu. Białe krwinki (limfocyty) zostaną oddzielone od próbek pełnej krwi żylnej pobranych na początku badania, 1 i 2 godziny po spożyciu napoju w celu analizy uszkodzeń oksydacyjnych DNA. Próbki moczu zostaną przeanalizowane pod kątem kwasu moczowego i kreatyniny w celu obliczenia frakcji wydalanej kwasu moczowego z moczem (za pomocą komercyjnego testu kolorymetrycznego). Metabolity polifenolowe z badanego napoju będą również analizowane w próbkach moczu.

Analiza danych: Wpływ traktowania (cierpka wiśnia w porównaniu z wodą) na wszystkie zmienne wynikowe zostanie przeanalizowany za pomocą dwukierunkowych ANOVA z powtarzanymi pomiarami. Zostanie ustawiony poziom istotności statystycznej P≤ 0,05.