Pilotażowe studium wykonalności wykrywania IL-11 i innych cytokin w kondensacie wydychanego powietrza (EBC) i krwi zdrowych ochotników

Udowodniono, że IL-11 ulega silnej ekspresji w płucach pacjentów z idiopatycznym włóknieniem płuc (IPF), typem śródmiąższowej choroby płuc (ILD). Wykazano, że przeciwciało neutralizujące IL-11 zmniejsza zapalenie płuc i zwłóknienie w indukowanym bleomycyną zwłóknieniu płuc w modelu mysim. W tym badaniu wykazano również, że IL-11 ulega ekspresji w próbkach ludzkich płuc z IPF. Wykazano, że mechanizm ten jest powiązany ze zmniejszeniem proliferacji i aktywności fibroblastów.

Identyfikacja osób z różnymi podtypami zwłóknienia płuc może opierać się na objawach, testach czynnościowych płuc, radiologii, a nawet biopsjach płuc. Jednak wszystkie te metody są raczej subiektywne, a czasem inwazyjne, ale niejednoznaczne. Aby więc zidentyfikować poszczególnych pacjentów, u których IL-11 może odgrywać rolę w ich procesach chorobowych, badacze proponują wykorzystanie IL-11 w EBC jako biomarkera do identyfikacji tych pacjentów.

Projekt tego badania pilotażowego jest; prospektywne, jednoramienne, nieinterwencyjne badanie obejmujące badania inwazyjne

1. Procedury/dochodzenia
2. Pobieranie krwi (nakłucie żyły)
3. Metoda zbierania kondensatu wydychanego powietrza (EBC) – polegała na wdychaniu i wydychaniu przez jednorazowe urządzenie (podobnie jak oddychanie na zimną szybę w celu wytworzenia kondensatu) z zewnętrznym urządzeniem chłodzącym. Zestaw startowy R Tube to kompletny jednorazowy zestaw do pobierania EBC, zatwierdzony przez FDA w USA. Został użyty w wielu badaniach klinicznych. Badacze preferują zestawy całkowicie jednorazowe (nie tylko ustnik).

Laboratoryjna metoda wykrywania i oznaczania ilościowego IL-11 (ELISA) — Badacze użyją zestawu Human IL-11 Quantikine ELISA (nr D1100, R&D Systems) do pomiaru stężeń IL-11 w surowicy/osoczu i EBC. Ten test immunologiczny został wykorzystany przez zespół prof. wcześniejsza publikacja, w której określono ilościowo stężenia IL-11 w surowicy i EBC. Każdy zestaw ELISA pozwala na jednoczesną detekcję do 96 próbek (w tym duplikatów i wzorców). W teście zastosowano ilościową technikę kanapkowego testu ELISA. Badacze mogą również zastosować podobną technikę do zbadania całej gamy innych interleukin, które biorą udział w zwłóknieniu płuc.

Wcześniej wykazano, że zastosowanie EBC do wykrywania IL-11 jest wykonalne i wykrywalne u zdrowych ochotników. W tej serii wykazano, że poziomy IL-11 były znacząco podwyższone u pacjentów z NSCLC. Badacze muszą najpierw odtworzyć wykonalność wykrywania IL-11 w EBC zdrowych ochotników i wykorzystać to jako zakres odniesienia dla poziomów IL-11 w EBC pacjentów ze zwłóknieniem. Wcześniej wykazano, że IL-11 jest wykrywalna w surowicy ludzkich pacjentów z zapaleniem trzustki również za pomocą zestawów ELISA. W takim przypadku badacze mogą zaproponować wykorzystanie IL-11 jako narzędzia przesiewowego w celu zidentyfikowania pacjentów, którzy mogą odnieść korzyści z przeciwciała neutralizującego IL-11, jeśli jest ono dostępne u ludzi.

Inne interleukiny, które, jak wykazano, przyczyniają się do zwłóknienia płuc, to IL-1B i IL-5, w szczurzych modelach zwierzęcych, przez promowanie stanu zapalnego. Z drugiej strony IL-9, IL-10 i IL-17 działają ochronnie przy zwłóknieniu płuc. IL-12 hamuje syntezę kolagenu. Wykazano również, że IL-2, IL-4, IL-6, IL-13, IL-18 i IL-37 przyczyniają się do zwłóknienia płuc poprzez proliferację komórek i aktywację fibroblastów, a nie bezpośrednie zapalenie. Co ważniejsze, wykazano, że IL-2, IL-6, IL-8, IL-10 i IL-12 są podwyższone w surowicach pacjentów z IPF w porównaniu ze zdrowymi ochotnikami.