Um estudo piloto de viabilidade da detecção de IL-11 e outras citocinas no condensado da respiração exalada (EBC) e no sangue de voluntários saudáveis

Foi comprovado que a IL-11 é altamente expressa nos pulmões de pacientes com fibrose pulmonar idiopática (FPI), um tipo de doença pulmonar intersticial (DPI). Foi demonstrado que um anticorpo neutralizador de IL-11 diminui a inflamação pulmonar e a fibrose no modelo de fibrose pulmonar induzida por bleomicina em camundongos. Neste estudo, a IL-11 também demonstrou ser expressa em amostras de pulmões humanos com FPI. O mecanismo demonstrou estar ligado à redução da proliferação e atividade dos fibroblastos.

A identificação de indivíduos com diferentes subtipos de fibrose pulmonar pode ser baseada em sintomas, testes de função pulmonar, radiologia ou mesmo biópsias pulmonares. No entanto, todos esses métodos são bastante subjetivos e às vezes invasivos, mas ainda inconclusivos. Portanto, para identificar pacientes individuais nos quais a IL-11 pode desempenhar um papel em seus processos de doença, os pesquisadores propõem usar IL-11 no EBC como um biomarcador para identificar esses pacientes.

O desenho deste estudo piloto é; estudo prospectivo, de braço único, não intervencional envolvendo investigações invasivas

1. Procedimentos/ investigações
2. Coleta de sangue (venopunção)
3. Método de coleta de condensado de respiração exalada (EBC) - envolvia inspirar e expirar por meio de um dispositivo descartável (semelhante a respirar em um vidro frio para produzir condensado) com um dispositivo de resfriamento externo. O kit inicial R Tube é um kit completo de coleta de EBC descartável aprovado pela FDA nos EUA. Tem sido usado em muitas investigações clínicas de pesquisa. Os investigadores preferem kits completamente descartáveis ​​(não apenas bocal).

Método laboratorial na detecção e quantificação de IL-11 (ELISA) - Os investigadores usarão o kit Human IL-11 Quantikine ELISA (#D1100, R&D Systems) para medir as concentrações de IL-11 no soro/plasma e EBC. Este imunoensaio foi usado pela equipe do Prof Cook para a quantificação precisa das concentrações de IL-11 dentro das faixas de ensaio de 31,2 - 2.000 pg/mL em estudos e possui uma faixa de detecção semelhante à de outro kit IL-11 ELISA usado em um publicação anterior que quantificou as concentrações de IL-11 no soro e EBC. Cada kit ELISA permite a detecção simultânea de até 96 amostras (incluindo duplicatas e padrões). O ensaio emprega a técnica quantitativa de sanduíche ELISA. Os investigadores também podem usar técnicas semelhantes para examinar toda a gama de outras interleucinas envolvidas na fibrose pulmonar.

O uso de EBC para detectar IL-11 já demonstrou ser viável e detectável em voluntários saudáveis. Nessa série, foi demonstrado que os níveis de IL-11 estavam significativamente aumentados em pacientes com CPNPC. Os investigadores primeiro precisam reproduzir a viabilidade da detecção de IL-11 em EBC de voluntários saudáveis ​​e usar isso como um intervalo de referência para os níveis de IL-11 em EBC de pacientes com fibrose. A IL-11 também demonstrou ser detectável no soro de pacientes humanos com pancreatite por kits ELISA. Se for esse o caso, os investigadores podem propor o uso de IL-11 como uma ferramenta de triagem para identificar pacientes que podem se beneficiar do anticorpo neutralizante de IL-11 quando disponível em humanos.

Outras interleucinas que demonstraram contribuir para a fibrose pulmonar são a IL-1B e a IL-5, em modelos animais de ratos, por promover a inflamação. Por outro lado, IL-9, IL-10 e IL-17 são protetores na fibrose pulmonar. A IL-12 inibe a síntese de colágeno. IL-2, IL-4, IL-6, IL-13, IL-18 e IL-37 também demonstraram contribuir para a fibrose pulmonar através da proliferação celular e ativação de fibroblastos, em vez de inflamação direta. Mais importante ainda, foi demonstrado que IL-2, IL-6, IL-8, IL-10 e IL-12 estão aumentados no soro de pacientes com FPI em comparação com voluntários saudáveis.