Пилотное технико-экономическое обоснование обнаружения ИЛ-11 и других цитокинов в конденсате выдыхаемого воздуха (КВД) и крови здоровых добровольцев

Было доказано, что IL-11 в высокой степени экспрессируется в легких пациентов с идиопатическим легочным фиброзом (IPF), типом интерстициального заболевания легких (ILD). Было показано, что нейтрализующее антитело к IL-11 уменьшает воспаление легких и фиброз при блеомицин-индуцированном фиброзе легких на модели мышей. В этом исследовании также было показано, что IL-11 экспрессируется в образцах легких человека с ИЛФ. Было показано, что этот механизм связан со снижением пролиферации и активности фибробластов.

Идентификация людей с различными подтипами фиброза легких может быть основана на симптомах, функциональных тестах легких, рентгенологических исследованиях или даже биопсии легких. Однако все эти методы довольно субъективны, а иногда и инвазивны, но пока безрезультатны. Таким образом, для выявления отдельных пациентов, у которых IL-11 может играть роль в их патологических процессах, исследователи предлагают использовать IL-11 в EBC в качестве биомаркера для идентификации этих пациентов.

Дизайн этого пилотного исследования таков; проспективное, одногрупповое, неинтервенционное исследование, включающее инвазивные исследования

1. Процедуры/расследования
2. Взятие крови (венепункция)
3. Метод сбора конденсата выдыхаемого воздуха (КВВ) — он включал вдох и выдох через одноразовое устройство (аналогично дыханию на холодное стекло для получения конденсата) с внешним охлаждающим устройством. Стартовый набор R Tube представляет собой полный одноразовый набор для сбора EBC, одобренный FDA в США. Он использовался во многих клинических исследованиях. Следователи предпочитают полностью одноразовые комплекты (а не только мундштук).

Лабораторный метод обнаружения и количественного определения IL-11 (ELISA). Исследователи будут использовать набор Human IL-11 Quantikine ELISA (#D1100, R&D Systems) для измерения концентрации IL-11 в сыворотке/плазме и EBC. Этот иммуноанализ использовался группой проф. Кука для точного количественного определения концентраций IL-11 в пределах диапазонов анализа от 31,2 до 2000 пг/мл в исследованиях, и его диапазон обнаружения аналогичен диапазону другого набора IL-11 ELISA, используемого в исследованиях. предыдущая публикация, в которой количественно определялись концентрации IL-11 в сыворотке и EBC. Каждый набор ELISA позволяет одновременно обнаруживать до 96 образцов (включая дубликаты и стандарты). В анализе используется количественный сэндвич-метод ELISA. Исследователи также могут использовать подобную технику для изучения целого ряда других интерлейкинов, участвующих в фиброзе легких.

Ранее было показано, что использование EBC для обнаружения IL-11 возможно и обнаруживается у здоровых добровольцев. В этой серии было продемонстрировано, что уровни IL-11 были значительно повышены у пациентов с НМРЛ. Исследователям сначала необходимо воспроизвести возможность обнаружения IL-11 в EBC у здоровых добровольцев и использовать это в качестве эталонного диапазона для уровней IL-11 в EBC у пациентов с фиброзом. Ранее было показано, что IL-11 также обнаруживается в сыворотке пациентов с панкреатитом с помощью наборов ELISA. Если это так, исследователи могут предложить использовать IL-11 в качестве инструмента скрининга для выявления пациентов, которым могут помочь нейтрализующие антитела к IL-11, когда они доступны для людей.

Другими интерлейкинами, которые, как было показано, способствуют фиброзу легких, являются IL-1B и IL-5 в моделях на крысах, способствуя воспалению. IL-9, IL-10 и IL-17, с другой стороны, защищают от фиброза легких. IL-12 ингибирует синтез коллагена. Также было показано, что ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-13, ИЛ-18 и ИЛ-37 способствуют фиброзу легких посредством пролиферации клеток и активации фибробластов, а не прямого воспаления. Что еще более важно, было показано, что ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10 и ИЛ-12 повышены в сыворотке пациентов с ИЛФ по сравнению со здоровыми добровольцами.