Pilotti toteutettavuustutkimus IL-11:n ja muiden sytokiinien havaitsemiseksi uloshengityshengityksen kondensaatista (EBC) ja terveiden vapaaehtoisten verestä

IL-11:n on osoitettu ilmentyvän voimakkaasti potilaiden keuhkoissa, joilla on idiopaattinen keuhkofibroosi (IPF), eräänlainen interstitiaalinen keuhkosairaus (ILD). IL-11:tä neutraloivan vasta-aineen on osoitettu vähentävän keuhkojen tulehdusta ja fibroosia bleomysiinin aiheuttamassa keuhkofibroosissa hiirimallissa. Tässä tutkimuksessa IL-11:n on myös osoitettu ilmentyvän ihmisen keuhkojen näytteissä, joilla on IPF. Mekanismin on osoitettu olevan yhteydessä fibroblastien lisääntymisen ja aktiivisuuden vähenemiseen.

Erilaisia ​​keuhkofibroosin alatyyppejä sairastavien yksilöiden tunnistaminen voi perustua oireisiin, keuhkojen toimintakokeisiin, radiologiaan tai jopa keuhkobiopsiaan. Kaikki nämä menetelmät ovat kuitenkin melko subjektiivisia ja joskus invasiivisia, mutta silti epäselviä. Jotta voidaan tunnistaa yksittäisiä potilaita, joiden IL-11:llä voi olla rooli heidän sairausprosesseissaan, tutkijat ehdottavat IL-11:n käyttöä EBC:ssä biomarkkerina näiden potilaiden tunnistamiseksi.

Tämän pilottitutkimuksen suunnittelu on; prospektiivinen, yksihaarainen, ei-interventiotutkimus, joka sisältää invasiivisia tutkimuksia

1. Menettelyt/tutkimukset
2. Verenotto (laskimopunktio)
3. Uloshengitetyn hengityksen kondensaatin (EBC) keruumenetelmä – tähän sisältyi sisään- ja uloshengitys kertakäyttölaitteen kautta (kuten hengittäminen kylmään lasiin kondensaatin muodostamiseksi) ulkoisella jäähdytinlaitteella. R Tube -aloitussarja on täydellinen kertakäyttöinen EBC-keräyssarja, joka on FDA:n hyväksymä Yhdysvalloissa. Sitä on käytetty monissa kliinisissä tutkimuksissa. Tutkijat suosivat täysin kertakäyttöisiä sarjoja (eivät vain suukappaletta).

Laboratoriomenetelmä IL-11:n havaitsemiseen ja kvantitointiin (ELISA) – Tutkijat käyttävät Human IL-11 Quantikine ELISA -kittiä (#D1100, R&D Systems) IL-11-pitoisuuksien mittaamiseen seerumissa/plasmassa ja EBC:ssä. Professori Cookin työryhmä on käyttänyt tätä immunomääritystä IL-11-pitoisuuksien tarkkaan kvantifiointiin 31,2 - 2 000 pg/ml määritysalueilla tutkimuksissa, ja sillä on samanlainen havaitsemisalue kuin toisella IL-11 ELISA -sarjalla, jota käytetään aikaisemmassa julkaisussa, jossa määritettiin IL-11-pitoisuudet seerumissa ja EBC:ssä. Jokainen ELISA-sarja mahdollistaa samanaikaisen havaitsemisen jopa 96 näytteestä (mukaan lukien kaksoiskappaleet ja standardit). Määrityksessä käytetään kvantitatiivista sandwich-ELISA-tekniikkaa. Tutkijat voivat myös käyttää samanlaista tekniikkaa tutkiakseen kaikkia muita interleukiineja, jotka osallistuvat keuhkofibroosiin.

EBC:n käyttö IL-11:n havaitsemiseen on aiemmin osoitettu olevan mahdollista ja havaittavissa terveillä vapaaehtoisilla. Tuossa sarjassa osoitettiin, että IL-11-tasot lisääntyivät merkittävästi potilailla, joilla oli NSCLC. Tutkijoiden on ensin toistettava IL-11:n havaitsemisen toteutettavuus terveiden vapaaehtoisten EBC:ssä ja käytettävä tätä vertailualueena IL-11:n tasoille fibroosipotilaiden EBC:ssä. IL-11:n on aiemmin osoitettu olevan havaittavissa haimatulehdusta sairastavien ihmispotilaiden seerumista myös ELISA-pakkausten avulla. Jos näin on, tutkijat voivat ehdottaa IL-11:n käyttöä seulontatyökaluna sellaisten potilaiden tunnistamiseksi, jotka voivat hyötyä IL-11:tä neutraloivasta vasta-aineesta, kun sitä on saatavilla ihmisillä.

Muita interleukiineja, joiden on osoitettu myötävaikuttavan keuhkofibroosiin, ovat IL-1B ja IL-5 rottaeläinmalleissa edistämällä tulehdusta. IL-9, IL-10 ja IL-17 toisaalta suojaavat keuhkofibroosilta. IL-12 estää kollageenisynteesiä. IL-2:n, IL-4:n, IL-6:n, IL-13:n, IL-18:n ja IL-37:n on myös osoitettu edistävän keuhkofibroosia solujen lisääntymisen ja fibroblastien aktivoitumisen kautta suoran tulehduksen sijaan. Vielä tärkeämpää on, että IL-2:n, IL-6:n, IL-8:n, IL-10:n ja IL-12:n on osoitettu lisääntyneen IPF-potilaiden seerumeissa verrattuna terveisiin vapaaehtoisiin.