Ocena bezpieczeństwa i skuteczności terapii fagowej w leczeniu zakażeń bakteryjnych opornych na leki: badanie eksploracyjne, prospektywne, jednoramienne (Phage Therapy)

To jest badanie kliniczne inicjowane przez badacza, prospektywne, jednoramienne, eksploracyjne, przeprowadzane w Klinice Chorób Zakaźnych Szpitala Nanjing Drum Tower, Afiliowanego z Wydziałem Medycznym Uniwersytetu w Nankinie. Celem badania jest systematyczna ocena bezpieczeństwa i skuteczności spersonalizowanej terapii koktajlem fagowym u pacjentów z zakażeniami układu moczowego (ZUM) wywołanymi przez bakterie lekooporne, w odpowiedzi na niezaspokojoną potrzebę kliniczną alternatywnych metod leczenia w kontekście globalnego rozprzestrzeniania się oporności na antybiotyki.

1. Uzasadnienie badania Globalna śmiertelność związana z zakażeniami bakteriami lekoopornymi osiągnęła 4,95 miliona w 2019 roku, z czego 1,27 miliona zgonów bezpośrednio przypisano tej przyczynie. Prognozy wskazują, że liczba ta może wzrosnąć do 10 milionów rocznie do 2050 roku bez skutecznych interwencji. Rozwój nowych antybiotyków znacznie opóźnia się w stosunku do pojawiania się szczepów lekoopornych, ponieważ większość nowo zatwierdzonych środków to pochodne istniejących antybiotyków z ustalonymi mechanizmami oporności. Terapia fagowa, wykorzystująca naturalną specyficzność bakteriofagów do lizy docelowych bakterii bez szkody dla komórek ludzkich lub komensalnej mikrobioty, wyłoniła się jako obiecująca alternatywa. Dowody kliniczne z ponad 6300 przypadków na świecie oraz przeglądy systematyczne potwierdzają jej korzystny profil bezpieczeństwa (7,5% częstość zdarzeń niepożądanych vs. 14,9% dla konwencjonalnych antybiotyków) i skuteczność (78,8% wskaźnik poprawy klinicznej, 86,7% wskaźnik eliminacji patogenu). Niniejsze badanie opiera się na tych ustaleniach, aby zweryfikować kliniczną przydatność spersonalizowanej terapii fagowej w lekoopornych ZUM.

2. Projekt i zakres badania

   • Typ badania: Prospektywne, jednoramienne, eksploracyjne badanie bez grupy kontrolnej (uzasadnione względami etycznymi oraz brakiem ustandaryzowanych protokołów kontrolnych dla nowatorskiej terapii fagowej).
   • Wielkość próby: 6 kwalifikujących się pacjentów (określona na podstawie wcześniejszych danych klinicznych i możliwości instytucji).
   • Okres badania: Każdy uczestnik przechodzi okres kwalifikacji (≤7 dni), okres leczenia (2-3 dni) oraz okres obserwacji (2-4 tygodnie), z całkowitym czasem obserwacji do 5 tygodni.
   • Miejsce badania: Klinika Chorób Zakaźnych Szpitala Nanjing Drum Tower, Afiliowanego z Wydziałem Medycznym Uniwersytetu w Nankinie (Nankin, Chiny).
3. Kryteria kwalifikacji 3.1 Kryteria włączenia

1. Wiek 18-65 lat.
2. Pacjenci z zakażeniami układu moczowego wywołanymi przez bakterie lekooporne (na podstawie wyników testów wrażliwości z naszego szpitala lub innych szpitali klasy A trzeciego stopnia).

3. Bakterie chorobotwórcze zakażające pacjenta muszą spełniać jeden z poniższych warunków:

   a) Bakterie chorobotwórcze są oporne na kluczowe antybiotyki:

   • Acinetobacter baumannii: oporny na karbapenemy;

     • Enterobacteriaceae (np. Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli): oporny na karbapenemy lub cefalosporyny; ③ Pseudomonas aeruginosa: oporny na karbapenemy;

       ④ Enterokoki: oporne na wankomycynę;

       ⑤ Staphylococcus aureus: oporny na metycylinę lub wankomycynę;

       • Stenotrophomonas maltophilia. Odwołanie do listy priorytetowych patogenów bakteryjnych WHO, 2024 b) Bakterie chorobotwórcze są wrażliwe na kluczowe antybiotyki in vitro, ale leczenie takimi antybiotykami jest nieskuteczne lub wykazuje nieznaczną skuteczność (celowe zakażenie bakteryjne pacjenta utrzymuje się przez 7 dni lub dłużej, a zakażenia nie można wyeliminować pomimo podawania antybiotyków w tym okresie).

         c) Stosowanie kluczowych antybiotyków, na które bakterie chorobotwórcze są wrażliwe, jest ograniczone (np. potencjalna toksyczność narządowa spowodowana antybiotykami lub alergia pacjenta na takie antybiotyki).

4. Można wyselekcjonować co najmniej jeden lityczny fag celujący w bakterie chorobotwórcze.
5. Pacjent toleruje procedury dootrzewnowego wlewu przez cewnik moczowy, wstecznego wlewu przez cewnik moczowodowy lub wlewu przez przezskórną nefrostomię oraz zgadza się na założenie stałego lub przerywanego cewnikowania w okresie leczenia.
6. Badany i jego rodzina (lub opiekun prawny) w pełni zapoznali się i zrozumieli odpowiednie informacje oraz podpisali formularz świadomej zgody.

3.2 Kryteria wyłączenia

1. Zakażenie bakteryjne możliwe do opanowania konwencjonalną terapią antybiotykową.
2. Obecność nieodwodnionego ropnia lub niedrożności dróg moczowych.
3. Cieżkie upośledzenie czynności nerek (eGFR <30 mL/min/1.73m²).
4. Współistniejąca niewydolność narządów (serca, wątroby, płuc itp.).
5. Cieżkie choroby autoimmunologiczne.
6. Brak dostępnych fagów aktywnych wobec zakażającego patogenu.
7. Inne stany uznane przez badacza za nieodpowiednie.

4. Szczegóły interwencji 4.1 Przygotowanie fagów

• Produkt testowy: Spersonalizowany koktajl fagowy dostarczony przez Chuangshiji (Shanghai) Biotechnology Co., Ltd., składający się z litycznych fagów celujących w specyficzny patogen uczestnika. Formulacja jest oczyszczona i pakowana w obiektach zgodnych z GMP, o specyfikacji 5 mL/fiolka i miano ≥10⁷ PFU/mL.
• Dopasowanie fagów: Patogeny wyizolowane od uczestników są wysyłane do współpracującego laboratorium w celu przesiewowego badania fagów wysokoprzepustowego przy użyciu testu dwuwarstwowej płytki agarowej lub testu krzywej zabijania w płynie. Preferowana jest metoda NEPT (Next Evolution Phage-Typing) do łączenia fagów pierwotnych i wtórnych, zapobiegając pojawianiu się bakterii opornych na fagi.
• Kontrola jakości: Każda partia przechodzi badanie sterylności (48-godzinna hodowla na płytkach z krwią bez wzrostu bakterii) i weryfikację miana przy użyciu docelowego patogenu uczestnika (≥10⁷ PFU/mL, zgodnie ze standardem grupy T/SHPPA 028-2024).

4.2 Podanie

Trasy leczenia są wybierane na podstawie lokalizacji zakażenia:

• Wlew dootrzewnowy (dla dolnych ZUM): 50 mL koktajlu fagowego (rozcieńczonego roztworem Ringera w razie potrzeby) jest wlewane przez cewnik moczowy. Cewnik jest zaciskany na 30 minut po podaniu, następnie usuwany lub odpinany. Podawanie powtarza się co 12 godzin przez 4-6 dawek łącznie (2- lub 3-dniowy cykl).

4.3 Leki towarzyszące Antybiotyki mogą być podawane na podstawie testów wrażliwości i oceny klinicznej. Jeśli nie ma dostępnych wrażliwych antybiotyków, stosuje się metodę NABS (Non-active Antibiotic and Bacteriophage Synergism) do identyfikacji antybiotyków o działaniu synergistycznym z fagami.

5. Miary wyników 5.1 Wyniki bezpieczeństwa

• Pierwszorzędowe punkty końcowe bezpieczeństwa: Częstość występowania, ciężkość i przyczynowość zdarzeń niepożądanych (AE) i poważnych zdarzeń niepożądanych (SAE) podczas leczenia i obserwacji. Kluczowe monitorowane zdarzenia obejmują:

  o Reakcje związane z bakteriolizą (np. zespół uwalniania endotoksyny: gorączka >39℃, niedociśnienie).

  • Reakcje immunogenne (np. wysypka, duszność, anafilaksja).
• Oceny bezpieczeństwa: Parametry życiowe (codziennie podczas leczenia); badania laboratoryjne (morfologia krwi, funkcja wątroby/nerek, CRP, prokalcytonina, cytokiny) na początku, w dniu 1, 3, 5 i 7 po leczeniu; oraz obserwacje kliniczne pod kątem AE.

5.2 Wyniki skuteczności

• Pierwszorzędowy punkt końcowy skuteczności: Wskaźnik eliminacji patogenu, zdefiniowany jako:

  o Ujemna hodowla moczu dla docelowego patogenu w dwóch kolejnych próbkach, lub

  o ≥10-krotne zmniejszenie liczby bakterii (ilości bezwzględnej) lub ≥2-stopniowe zmniejszenie w półilościowym oznaczeniu (metoda posiewu na 4 kwadraty) jeśli patogen utrzymuje się.

  • Oceny przeprowadza się na początku oraz w dniach 1, 3, 5, 7 po leczeniu.

• Drugorzędowy punkt końcowy skuteczności: Wskaźnik ustąpienia objawów klinicznych, oceniany jako:

  o Całkowite ustąpienie: Zanik bolesnego oddawania moczu, częstomoczu, parcia naglącego, bólu lędźwiowego i gorączki; prawidłowy wynik ogólny moczu (leukocyty <5/HPF, azotyny ujemne); ujemna hodowla moczu.

  o Częściowe ustąpienie: Poprawa objawów z łagodnymi pozostałymi nieprawidłowościami.

  o Oceny przeprowadza się podczas każdej wizyty kontrolnej (tygodnie 1, 2, 3, 4 po leczeniu).

  6. Monitorowanie bezpieczeństwa i ochrona etyczna

• Postępowanie z AE/SAE: Wszystkie AE są dokumentowane, śledzone i klasyfikowane według kryteriów CTCAE. SAE (np. zgon, zdarzenia zagrażające życiu, hospitalizacja) są zgłaszane do Komisji Etyki Instytucjonalnej (IRB) w ciągu 24 godzin.
• Zgodność etyczna: Badanie jest zgodne z Deklaracją Helsińską i wytycznymi GCP. Protokół został zatwierdzony przez Komisję Etyki Medycznej Szpitala Nanjing Drum Tower, Afiliowanego z Wydziałem Medycznym Uniwersytetu w Nankinie. Uczestnicy mogą wycofać się w dowolnym momencie bez konsekwencji.

• Monitorowanie bezpieczeństwa danych: Główny badacz przeprowadza regularne przeglądy zgromadzonych danych bezpieczeństwa w celu oceny równowagi korzyści i ryzyka oraz rekomendacji kontynuacji lub zakończenia badania w razie potrzeby.

  7. Harmonogram badania

• Styczeń 2026 - Czerwiec 2026: Kwalifikacja, rekrutacja, leczenie i obserwacja pacjentów.
• Lipiec 2026 - Sierpień 2026: Analiza danych i ukończenie raportu z badania.