Vyhodnocení bezpečnosti a účinnosti fágové terapie u infekcí vyvolaných bakteriemi rezistentními na léčiva: Průzkumná, prospektivní jednoramenná studie (Phage Therapy)

Toto je iniciovaná výzkumníkem, prospektivní, jednoramenná průzkumná klinická studie provedená na Klinice infekčních nemocí, Přidružené nemocnice Nanjing Drum Tower Lékařské fakulty Univerzity v Nankingu. Studie si klade za cíl systematicky vyhodnotit bezpečnost a účinnost personalizované koktejlové fágové terapie u pacientů s infekcemi močových cest (IMC) způsobenými rezistentními bakteriemi, což řeší nenaplněnou klinickou potřebu alternativních léčebných postupů v souvislosti s globálním šířením antibiotické rezistence.

1. Odpůvodnění studie Celosvětová úmrtnost spojená s infekcemi rezistentními bakteriemi dosáhla v roce 2019 4,95 milionu, přičemž 1,27 milionu úmrtí bylo přímo přičítáno této příčině. Projekce naznačují, že toto číslo by se do roku 2050 mohlo bez účinných zásahů zvýšit na 10 milionů ročně. Vývoj nových antibiotik výrazně zaostává za vznikem rezistentních kmenů, protože většina nově schválených látek jsou deriváty stávajících antibiotik se zavedenými mechanismy rezistence. Fágová terapie, využívající přirozenou specifitu bakteriofágů k lyzi cílových bakterií bez poškození lidských buněk nebo komenzální mikroflóry, se ukázala jako slibná alternativa. Klinické důkazy z více než 6 300 celosvětových případů a systematické přehledy potvrzují její příznivý bezpečnostní profil (7,5 % výskyt nežádoucích příhod vs. 14,9 % u konvenčních antibiotik) a účinnost (78,8 % míra klinického zlepšení, 86,7 % míra eradikace patogena). Tato studie navazuje na tato zjištění, aby ověřila klinickou použitelnost personalizované fágové terapie pro rezistentní IMC.

2. Design a rozsah studie

   • Typ studie: Prospektivní, jednoramenná, průzkumná studie bez kontrolní skupiny (odůvodněno etickými důvody a nedostatkem standardizovaných kontrolních protokolů pro novou fágovou terapii).
   • Velikost vzorku: 6 způsobilých pacientů (stanoveno na základě předchozích klinických údajů a kapacity instituce).
   • Doba trvání studie: Každý účastník prochází obdobím screeningu (≤7 dnů), léčebným obdobím (2–3 dny) a obdobím sledování (2–4 týdny), s celkovou dobou pozorování až 5 týdnů.
   • Místo studie: Klinika infekčních nemocí, Přidružená nemocnice Nanjing Drum Tower Lékařské fakulty Univerzity v Nankingu (Nanking, Čína).
3. Kritéria způsobilosti 3.1 Kritéria pro zařazení

1. Věk 18–65 let.
2. Pacienti s infekcemi močových cest způsobenými rezistentními bakteriemi (na základě výsledků testů citlivosti z naší nemocnice nebo jiných terciárních nemocnic třídy A).

3. Patogenní bakterie infikující pacienta musí splňovat jednu z následujících podmínek:

   a) Patogenní bakterie jsou rezistentní ke klíčovým antibiotikům:

   • Acinetobacter baumannii: rezistentní na karbapenemy;

     • Enterobacteriaceae (např. Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli): rezistentní na karbapenemy nebo cefalosporiny; ② Pseudomonas aeruginosa: rezistentní na karbapenemy;

       ③ Enterokoky: rezistentní na vankomycin;

       ④ Staphylococcus aureus: rezistentní na meticilin nebo vankomycin;

       • Stenotrophomonas maltophilia. Odkaz na Seznam prioritních bakteriálních patogenů WHO, 2024 b) Patogenní bakterie jsou in vitro citlivé na klíčová antibiotika, ale léčba takovými antibiotiky je neúčinná nebo vykazuje nevýznamnou účinnost (cílové bakteriální infekce pacienta přetrvává 7 dní nebo déle a infekce nelze eradikovat i přes podávání antibiotik během tohoto období).

         c) Použití klíčových antibiotik, na která jsou patogenní bakterie citlivé, je omezeno (např. potenciální orgánová toxicita způsobená antibiotiky nebo alergie pacienta na taková antibiotika).

4. Lze vybrat alespoň jeden lyzující fág cílící na patogenní bakterie.
5. Pacient snáší procedury intravezikální perfuze pomocí močového katétru, retrográdní pyeloperfuze pomocí ureterálního katétru nebo pyeloperfuze pomocí perkutánní nefrostomické trubice a souhlasí s přijetím trvalého nebo intermitentního katetrizace během léčebného období.
6. Subjekt a jeho rodinní příslušníci (nebo zákonný zástupce) plně přečetli a porozuměli relevantním informacím a podepsali informovaný souhlas.

3.2 Kritéria pro vyloučení

1. Bakteriální infekce kontrolovatelná konvenční antibiotickou terapií.
2. Přítomnost nedrenovaného abscesu nebo obstrukce močových cest.
3. Těžké poškození ledvin (eGFR <30 ml/min/1,73m²).
4. Současné selhání orgánů (srdce, játra, plíce atd.).
5. Těžká autoimunitní onemocnění.
6. Nejsou k dispozici fágy aktivní proti infikujícímu patogenu.
7. Další stavy, které vyšetřovatel považuje za nevhodné.

4. Podrobnosti o intervenci 4.1 Příprava fágů

• Testovaný produkt: Personalizovaný fágový koktejl poskytnutý společností Chuangshiji (Šanghaj) Biotechnology Co., Ltd., sestávající z lyzujících fágů cílených na specifický patogen účastníka. Formulace je čištěna a balena ve zařízeních splňujících GMP, se specifikací 5 ml/lahev a titrem ≥10⁷ PFU/ml.
• Fágové párování: Patogeny izolované od účastníků jsou odeslány do spolupracující laboratoře pro vysokokapacitní fágový screening pomocí metody dvojité vrstvy agarové plotny nebo testu likvidační křivky. Preferovaná je metoda Next Evolution Phage-Typing (NEPT) pro kombinaci primárních a sekundárních fágů, která zabraňuje vzniku fág-rezistentních bakterií.
• Kontrola kvality: Každá šarže podléhá testu sterility (48hodinová kultivace na krevních agarových plotnách bez růstu bakterií) a ověření titru pomocí cílového patogenu účastníka (≥10⁷ PFU/ml, dle skupinové normy T/SHPPA 028-2024).

4.2 Podávání

Způsoby léčby jsou vybírány na základě místa infekce:

• Intravezikální perfuze (pro dolní IMC): 50 ml fágového koktejlu (v případě potřeby naředěného Ringerovým roztokem) je infundováno pomocí močového katétru. Katétr je po podání na 30 minut zaškrcen, poté odstraněn nebo uvolněn. Dávkování se opakuje každých 12 hodin pro celkem 4–6 dávek (2–3denní kúra).

4.3 Souběžné léky Antibiotika mohou být podávána na základě testování citlivosti a klinického úsudku. Pokud nejsou k dispozici žádná citlivá antibiotika, použije se metoda Synergismu neaktivního antibiotika a bakteriofágu (NABS) k identifikaci antibiotik se synergickými účinky s fágy.

5. Výsledné měřítka 5.1 Bezpečnostní výsledky

• Primární bezpečnostní cíle: Výskyt, závažnost a kauzalita nežádoucích příhod (AE) a závažných nežádoucích příhod (SAE) během léčby a sledování. Klíčové sledované události zahrnují:

  o Reakce související s bakteriolýzou (např. syndrom uvolnění endotoxinu: horečka >39 °C, hypotenze).

  • Imunogenní reakce (např. vyrážka, dušnost, anafylaxe).
• Bezpečnostní hodnocení: Vitální funkce (denně během léčby); laboratorní testy (kompletní krevní obraz, funkce jater/ledvin, CRP, prokalcitonin, cytokiny) v základním stavu, 1., 3., 5. a 7. den po léčbě; a klinická pozorování pro AE.

5.2 Výsledky účinnosti

• Primární cíl účinnosti: Míra eradikace patogena, definovaná jako:

  o Negativní kultivace moči na cílový patogen ve dvou po sobě jdoucích vzorcích, nebo

  o ≥10násobné snížení bakteriální zátěže (absolutní kvantifikace) nebo ≥2stupňové snížení v semikvantifikaci (metoda 4-kvadrantového setí), pokud patogen přetrvává.

  • Hodnocení se provádí v základním stavu a 1., 3., 5., 7. den po léčbě.

• Sekundární cíl účinnosti: Míra ústupu klinických příznaků, hodnocená jako:

  o Úplný ústup: Vymizení dysurie, častého močení, urgentního močení, lumbaga a horečky; normální močový nález (leukocyty <5/HPF, dusitany negativní); negativní kultivace moči.

  o Částečný ústup: Zlepšení příznaků s mírnými zbytkovými abnormalitami.

  o Hodnocení se provádí při každé návštěvě sledování (1., 2., 3., 4. týden po léčbě).

  6. Bezpečnostní monitoring a etická ochrana

• Řízení AE/SAE: Všechny AE jsou dokumentovány, sledovány a hodnoceny dle kritérií CTCAE. SAE (např. úmrtí, život ohrožující události, hospitalizace) jsou hlášeny Etické komisi (IRB) do 24 hodin.
• Etická shoda: Studie je v souladu s Helsinskou deklarací a pokyny GCP. Protokol byl schválen Lékařskou etickou komisí Přidružené nemocnice Nanjing Drum Tower Lékařské fakulty Univerzity v Nankingu. Účastníci mohou kdykoli odstoupit bez postihu.

• Monitoring bezpečnosti dat: Hlavní vyšetřovatel provádí pravidelné přezkumy akumulovaných bezpečnostních dat k posouzení rovnováhy rizika a přínosu a v případě potřeby doporučuje pokračování nebo ukončení studie.

  7. Časový harmonogram studie

• Leden 2026 – Červen 2026: Screening pacientů, zařazení, léčba a sledování.
• Červenec 2026 – Srpen 2026: Analýza dat a dokončení zprávy o studii.