Оценка безопасности и эффективности фаговой терапии при лекарственно-устойчивых бактериальных инфекциях: разведочное проспективное однорукое исследование (Phage Therapy)

Это инициированное исследователем, проспективное, однорукавное разведывательное клиническое исследование, проводимое на кафедре инфекционных заболеваний, в Аффилированной больнице Нанкинской башни с барабаном Нанкинского университета медицинской школы. Исследование направлено на систематическую оценку безопасности и эффективности персонализированной коктейльной терапии фагами у пациентов с инфекциями мочевыводящих путей (ИМП), вызванными лекарственно-устойчивыми бактериями, удовлетворяя неудовлетворенную клиническую потребность в альтернативных методах лечения на фоне глобального распространения устойчивости к антибиотикам.

1. Обоснование исследования Глобальная смертность, связанная с лекарственно-устойчивыми бактериальными инфекциями, достигла 4,95 млн в 2019 году, при этом 1,27 млн смертей были непосредственно отнесены к этой причине. Прогнозы указывают, что это число может вырасти до 10 млн ежегодно к 2050 году без эффективных вмешательств. Разработка новых антибиотиков значительно отстает от появления лекарственно-устойчивых штаммов, поскольку большинство недавно одобренных агентов являются производными существующих антибиотиков с установленными механизмами устойчивости. Фаговая терапия, использующая естественную специфичность бактериофагов для лизиса целевых бактерий без вреда для человеческих клеток или комменсальной микробиоты, стала перспективной альтернативой. Клинические данные более чем 6300 глобальных случаев и систематические обзоры подтверждают ее благоприятный профиль безопасности (частота нежелательных явлений 7,5% против 14,9% для традиционных антибиотиков) и эффективность (частота клинического улучшения 78,8%, частота элиминации патогена 86,7%). Это исследование основывается на этих выводах для валидации клинической применимости персонализированной фаговой терапии для лекарственно-устойчивых ИМП.

2. Дизайн и объем исследования

   • Тип исследования: Проспективное, однорукавное, разведывательное исследование без контрольной группы (обосновано этическими соображениями и отсутствием стандартизированных контрольных протоколов для новой фаговой терапии).
   • Размер выборки: 6 подходящих пациентов (определен на основе предыдущих клинических данных и возможностей учреждения).
   • Период исследования: Каждый участник проходит период скрининга (≤7 дней), период лечения (2-3 дня) и период наблюдения (2-4 недели), с общей продолжительностью наблюдения до 5 недель.
   • Место исследования: Кафедра инфекционных заболеваний, Аффилированная больница Нанкинской башни с барабаном Нанкинского университета медицинской школы (Нанкин, Китай).
3. Критерии приемлемости 3.1 Критерии включения

1. Возраст 18-65 лет.
2. Пациенты с инфекциями мочевыводящих путей, вызванными лекарственно-устойчивыми бактериями (на основе результатов тестов на чувствительность к лекарствам из нашей больницы или других больниц третичного уровня класса А).

3. Патогенные бактерии, инфицирующие пациента, должны соответствовать одному из следующих условий:

   a) Патогенные бактерии устойчивы к ключевым антибиотикам:

   • Acinetobacter baumannii: карбапенем-устойчивый;

     • Enterobacteriaceae (например, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli): карбапенем- или цефалоспорин-устойчивый; ② Pseudomonas aeruginosa: карбапенем-устойчивый;

       ③ Enterococci: ванкомицин-устойчивый;

       ④ Staphylococcus aureus: метициллин- или ванкомицин-устойчивый;

       • Stenotrophomonas maltophilia. Ссылка на Список приоритетных бактериальных патогенов ВОЗ, 2024 г. b) Патогенные бактерии чувствительны к ключевым антибиотикам in vitro, но лечение такими антибиотиками неэффективно или показывает незначительную эффективность (целевая бактериальная инфекция пациента сохраняется в течение 7 дней или более, и инфекция не может быть искоренена, несмотря на введение антибиотиков в течение этого периода).

         c) Использование ключевых антибиотиков, к которым патогенные бактерии чувствительны, ограничено (например, потенциальная органная токсичность, вызванная антибиотиками, или пациент аллергичен к таким антибиотикам).

4. Может быть отобран хотя бы один литический фаг, нацеленный на патогенные бактерии.
5. Пациент может переносить процедуры внутрипузырной перфузии через мочевой катетер, ретроградной пиелоперфузии через мочеточниковый катетер или пиелоперфузии через чрескожную нефростомическую трубку, и согласен получать постоянную или интермиттирующую катетеризацию в течение периода лечения.
6. Субъект и его члены семьи (или законный опекун) полностью прочитали и поняли соответствующую информацию и подписали форму информированного согласия.

3.2 Критерии исключения

1. Бактериальная инфекция, контролируемая с помощью традиционной антибиотикотерапии.
2. Наличие недренированного абсцесса или обструкции мочевыводящих путей.
3. Тяжелое нарушение функции почек (рСКФ <30 мл/мин/1,73м²).
4. Сопутствующая органная недостаточность (сердечная, печеночная, легочная и т.д.).
5. Тяжелые аутоиммунные заболевания.
6. Отсутствие доступных фагов, активных против инфицирующего патогена.
7. Другие состояния, признанные исследователем неподходящими.

4. Детали вмешательства 4.1 Подготовка фага

• Исследуемый продукт: Персонализированный фаговый коктейль, предоставленный Chuangshiji (Шанхай) Biotechnology Co., Ltd., состоящий из литических фагов, нацеленных на конкретный патоген участника. Формулировка очищена и упакована на объектах, соответствующих требованиям GMP, со спецификацией 5 мл/флакон и титром ≥10⁷ БОЕ/мл.
• Подбор фага: Патогены, выделенные от участников, отправляются в совместную лабораторию для высокопроизводительного скрининга фагов с использованием двухслойного агарового планшета или анализа кривой жидкого уничтожения. Предпочтительным является метод Next Evolution Phage-Typing (NEPT) для комбинирования первичных и вторичных фагов, предотвращая появление фагоустойчивых бактерий.
• Контроль качества: Каждая партия проходит тестирование на стерильность (48-часовая культура на кровяных агаровых планшетах без роста бактерий) и проверку титра с использованием целевого патогена участника (≥10⁷ БОЕ/мл, в соответствии с групповым стандартом T/SHPPA 028-2024).

4.2 Введение

Маршруты лечения выбираются на основе локализации инфекции:

• Внутрипузырная перфузия (для нижних ИМП): 50 мл фагового коктейля (разбавленного раствором Рингера при необходимости) вводится через мочевой катетер. Катетер зажимается на 30 минут после введения, затем удаляется или разжимается. Дозирование повторяется каждые 12 часов для 4-6 общих доз (курс 2 или 3 дня).

4.3 Сопутствующие лекарства Антибиотики могут вводиться на основе тестирования чувствительности и клинического суждения. Если нет доступных чувствительных антибиотиков, используется метод синергизма неактивных антибиотиков и бактериофагов (NABS) для идентификации антибиотиков с синергетическими эффектами с фагами.

5. Исходные показатели 5.1 Показатели безопасности

• Первичные конечные точки безопасности: Частота, тяжесть и причинно-следственная связь нежелательных явлений (НЯ) и серьезных нежелательных явлений (СНЯ) во время лечения и наблюдения. Ключевые отслеживаемые события включают:

  o Реакции, связанные с бактериолизом (например, синдром высвобождения эндотоксина: лихорадка >39°C, гипотензия).

  • Иммуногенные реакции (например, сыпь, одышка, анафилаксия).
• Оценки безопасности: Жизненные показатели (ежедневно во время лечения); лабораторные тесты (общий анализ крови, функция печени/почек, СРБ, прокальцитонин, цитокины) на исходном уровне, День 1, 3, 5 и 7 после лечения; и клинические наблюдения за НЯ.

5.2 Показатели эффективности

• Первичная конечная точка эффективности: Частота элиминации патогена, определяемая как:

  o Отрицательный посев мочи на целевой патоген в двух последовательных образцах, или

  o ≥10-кратное снижение бактериальной нагрузки (абсолютное количественное определение) или ≥2-степенное снижение в полуколичественном определении (метод посева на 4 квадранта), если патоген сохраняется.

  • Оценки проводятся на исходном уровне и Дни 1, 3, 5, 7 после лечения.

• Вторичная конечная точка эффективности: Частота разрешения клинических симптомов, оцениваемая как:

  o Полное разрешение: Исчезновение дизурии, частоты, ургентности, люмбалгии и лихорадки; нормальный анализ мочи (лейкоциты <5/HPF, нитрит отрицательный); отрицательный посев мочи.

  o Частичное разрешение: Улучшение симптомов с легкими остаточными аномалиями.

  o Оценки выполняются на каждом визите наблюдения (Недели 1, 2, 3, 4 после лечения).

  6. Мониторинг безопасности и этическая защита

• Управление НЯ/СНЯ: Все НЯ документируются, отслеживаются и классифицируются в соответствии с критериями CTCAE. СНЯ (например, смерть, угрожающие жизни события, госпитализация) сообщаются в Институциональный наблюдательный совет (IRB) в течение 24 часов.
• Этическое соответствие: Исследование соответствует Хельсинкской декларации и руководствам GCP. Протокол был одобрен Комитетом по медицинской этике Аффилированной больницы Нанкинской башни с барабаном Нанкинского университета медицинской школы. Участники могут отказаться в любое время без штрафа.

• Мониторинг безопасности данных: Главный исследователь проводит регулярные обзоры накопленных данных безопасности для оценки баланса риск-польза и рекомендует продолжение или прекращение исследования при необходимости.

  7. График исследования

• Январь 2026 - июнь 2026: Скрининг пациентов, включение, лечение и наблюдение.
• Июль 2026 - август 2026: Анализ данных и завершение отчета исследования.