Valutazione della Sicurezza ed Efficacia della Terapia Fagica per Infezioni Batteriche Farmacoresistenti: Uno Studio Esplorativo, Prospettico a Braccio Singolo (Phage Therapy)

Questo è uno studio clinico esplorativo, prospettico, a braccio singolo, iniziato dallo sperimentatore, condotto presso il Dipartimento di Malattie Infettive dell'Ospedale Affiliato Nanjing Drum Tower della Scuola di Medicina dell'Università di Nanjing. Lo studio mira a valutare sistematicamente la sicurezza e l'efficacia della terapia personalizzata con cocktail di fagi in pazienti con infezioni del tratto urinario (UTI) causate da batteri farmaco-resistenti, affrontando l'esigenza clinica insoddisfatta di trattamenti alternativi in mezzo alla diffusione globale della resistenza agli antibiotici.

1. Razionale dello studio La mortalità globale associata a infezioni batteriche farmaco-resistenti ha raggiunto 4,95 milioni nel 2019, con 1,27 milioni di decessi direttamente attribuiti a questa causa. Le proiezioni indicano che questo numero potrebbe salire a 10 milioni all'anno entro il 2050 senza interventi efficaci. Lo sviluppo di nuovi antibiotici rimane molto indietro rispetto all'emergere di ceppi farmaco-resistenti, poiché la maggior parte degli agenti di nuova approvazione sono derivati di antibiotici esistenti con meccanismi di resistenza consolidati. La terapia fagica, che sfrutta la specificità naturale dei batteriofagi per lisare i batteri target senza danneggiare le cellule umane o il microbiota commensale, è emersa come una promettente alternativa. Le evidenze cliniche provenienti da oltre 6.300 casi globali e revisioni sistematiche confermano il suo profilo di sicurezza favorevole (tasso di eventi avversi del 7,5% vs. 14,9% per gli antibiotici convenzionali) e l'efficacia (tasso di miglioramento clinico del 78,8%, tasso di eliminazione del patogeno dell'86,7%). Questo studio si basa su questi risultati per convalidare l'applicabilità clinica della terapia fagica personalizzata per le UTI farmaco-resistenti.

2. Design e ambito dello studio

   • Tipo di studio: Studio prospettico, a braccio singolo, esplorativo senza un gruppo di controllo (giustificato da considerazioni etiche e dalla mancanza di protocolli di controllo standardizzati per la nuova terapia fagica).
   • Dimensione del campione: 6 pazienti eleggibili (determinata sulla base di dati clinici precedenti e della capacità istituzionale).
   • Periodo dello studio: Ogni partecipante subisce un periodo di screening (≤7 giorni), un periodo di trattamento (2-3 giorni) e un periodo di follow-up (2-4 settimane), con una durata totale di osservazione fino a 5 settimane.
   • Sede dello studio: Dipartimento di Malattie Infettive, Ospedale Affiliato Nanjing Drum Tower della Scuola di Medicina dell'Università di Nanjing (Nanjing, Cina).
3. Criteri di eleggibilità 3.1 Criteri di inclusione

1. Età compresa tra 18 e 65 anni.
2. Pazienti con infezioni del tratto urinario causate da batteri farmaco-resistenti (basato sui risultati del test di sensibilità ai farmaci del nostro ospedale o di altri ospedali terziari di grado A).

3. I batteri patogeni infettati dal paziente devono soddisfare una delle seguenti condizioni:

   a) I batteri patogeni sono resistenti agli antibiotici chiave:

   • Acinetobacter baumannii: resistente ai carbapenemi;

     • Enterobacteriaceae (es. Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli): resistente ai carbapenemi o alle cefalosporine; ② Pseudomonas aeruginosa: resistente ai carbapenemi;

       ③ Enterococchi: resistente alla vancomicina;

       ④ Staphylococcus aureus: resistente alla meticillina o alla vancomicina;

       • Stenotrophomonas maltophilia. Riferimento alla Lista dei Patogeni Batterici Prioritari dell'OMS, 2024 b) I batteri patogeni sono sensibili agli antibiotici chiave in vitro, ma il trattamento con tali antibiotici è inefficace o mostra un'efficacia insignificante (l'infezione batterica target del paziente persiste per 7 giorni o più, e l'infezione non può essere eradicata nonostante la somministrazione di antibiotici durante questo periodo).

         c) L'uso di antibiotici chiave a cui i batteri patogeni sono sensibili è limitato (es. potenziale tossicità d'organo causata dagli antibiotici, o il paziente è allergico a tali antibiotici).

4. Almeno un fago litico che colpisca i batteri patogeni può essere individuato.
5. Il paziente può tollerare le procedure di perfusione endovescicale tramite catetere urinario, pieloperfusione retrograda tramite catetere ureterale o pieloperfusione tramite tubo di nefrostomia percutanea, e accetta di ricevere cateterizzazione permanente o intermittente durante il periodo di trattamento.
6. Il soggetto e i suoi familiari (o tutore legale) hanno letto e compreso pienamente le informazioni rilevanti e hanno firmato il modulo di consenso informato.

3.2 Criteri di esclusione

1. Infezione batterica controllabile con terapia antibiotica convenzionale.
2. Presenza di ascesso o ostruzione del tratto urinario non drenato.
3. Grave compromissione renale (eGFR <30 mL/min/1.73m²).
4. Insufficienza d'organo concomitante (cuore, fegato, polmone, ecc.).
5. Gravi malattie autoimmuni.
6. Nessun fago disponibile attivo contro il patogeno infettante.
7. Altre condizioni ritenute non idonee dallo sperimentatore.

4. Dettagli dell'intervento 4.1 Preparazione dei fagi

• Prodotto di prova: Cocktail di fagi personalizzato fornito da Chuangshiji (Shanghai) Biotechnology Co., Ltd., costituito da fagi litici che colpiscono il patogeno specifico del partecipante. La formulazione è purificata e confezionata in strutture conformi alle GMP, con una specifica di 5 mL/vial e un titolo ≥10⁷ PFU/mL.
• Abbinamento dei fagi: I patogeni isolati dai partecipanti vengono inviati a un laboratorio collaborativo per lo screening ad alto rendimento di fagi utilizzando il saggio a doppio strato di agar o il saggio della curva di uccisione liquida. Il metodo Next Evolution Phage-Typing (NEPT) è preferito per combinare fagi primari e secondari, prevenendo l'emergere di batteri resistenti ai fagi.
• Controllo qualità: Ogni lotto subisce test di sterilità (coltura di 48 ore su piastre di agar sangue senza crescita batterica) e verifica del titolo utilizzando il patogeno target del partecipante (≥10⁷ PFU/mL, secondo lo standard di gruppo T/SHPPA 028-2024).

4.2 Somministrazione

Le vie di trattamento sono selezionate in base alla sede dell'infezione:

• Perfusione endovescicale (per UTI inferiori): 50 mL di cocktail di fagi (diluito con soluzione di Ringer se necessario) vengono infusi tramite catetere urinario. Il catetere viene bloccato per 30 minuti dopo la somministrazione, quindi rimosso o sbloccato. La dose viene ripetuta ogni 12 ore per 4-6 dosi totali (ciclo di 2 o 3 giorni).

4.3 Farmaci concomitanti Gli antibiotici possono essere somministrati in base al test di sensibilità e al giudizio clinico. Se non sono disponibili antibiotici suscettibili, viene utilizzato il metodo Non-active Antibiotic and Bacteriophage Synergism (NABS) per identificare antibiotici con effetti sinergici con i fagi.

5. Misure di esito 5.1 Esiti di sicurezza

• Endpoint primari di sicurezza: Incidenza, gravità e causalità degli eventi avversi (AE) e degli eventi avversi gravi (SAE) durante il trattamento e il follow-up. Gli eventi monitorati chiave includono:

  o Reazioni correlate alla batteriolisi (es. sindrome da rilascio di endotossine: febbre >39°C, ipotensione).

  • Reazioni immunogeniche (es. eruzione cutanea, dispnea, anafilassi).
• Valutazioni di sicurezza: Segni vitali (quotidiani durante il trattamento); test di laboratorio (emocromo completo, funzionalità epatica/renale, PCR, procalcitonina, citochine) al basale, Giorno 1, 3, 5 e 7 post-trattamento; e osservazioni cliniche per AE.

5.2 Esiti di efficacia

• Endpoint primario di efficacia: Tasso di eliminazione del patogeno, definito come:

  o Coltura urinaria negativa per il patogeno target in due campioni consecutivi, o

  o ≥10 volte riduzione del carico batterico (quantificazione assoluta) o ≥2 gradi di riduzione nella semiquantificazione (metodo della strisciatura a 4 quadranti) se il patogeno persiste.

  • Le valutazioni vengono condotte al basale e ai Giorni 1, 3, 5, 7 post-trattamento.

• Endpoint secondario di efficacia: Tasso di risoluzione dei sintomi clinici, valutato come:

  o Risoluzione completa: Scomparsa di disuria, frequenza, urgenza, lombalgia e febbre; esame delle urine normale (leucociti <5/HPF, nitriti negativi); coltura urinaria negativa.

  o Risoluzione parziale: Miglioramento dei sintomi con lievi anomalie residue.

  o Le valutazioni vengono eseguite ad ogni visita di follow-up (Settimane 1, 2, 3, 4 post-trattamento).

  6. Monitoraggio della sicurezza e protezione etica

• Gestione AE/SAE: Tutti gli AE sono documentati, tracciati e classificati secondo i criteri CTCAE. I SAE (es. morte, eventi pericolosi per la vita, ospedalizzazione) sono segnalati al Comitato di Revisione Istituzionale (IRB) entro 24 ore.
• Conformità etica: Lo studio è conforme alla Dichiarazione di Helsinki e alle linee guida GCP. Il protocollo è stato approvato dal Comitato Etico Medico dell'Ospedale Affiliato Nanjing Drum Tower della Scuola di Medicina dell'Università di Nanjing. I partecipanti possono ritirarsi in qualsiasi momento senza penalità.

• Monitoraggio della sicurezza dei dati: Lo sperimentatore principale conduce revisioni regolari dei dati di sicurezza accumulati per valutare l'equilibrio rischio-beneficio e raccomandare la continuazione o la cessazione dello studio se necessario.

  7. Tempistica dello studio

• Gennaio 2026 - Giugno 2026: Screening, arruolamento, trattamento e follow-up dei pazienti.
• Luglio 2026 - Agosto 2026: Analisi dei dati e completamento del rapporto di studio.