Desenvolvimento de um Sistema de Cultura Hematopoiética in Vitro e Aplicação em Síndromes Mielodisplásicas. (HEMASTEM)

As síndromes mielodisplásicas (SMD) são hemopatias mielóides caracterizadas por hematopoiese clonal ineficaz, citopenias periféricas e uma predisposição para a ocorrência de leucemias mielóides agudas. Seu diagnóstico envolve uma avaliação citológica da medula, enquanto seu prognóstico, além de fatores extrínsecos dependentes do próprio paciente (idade, comorbidades), fatores intrínsecos. A avaliação citológica está sujeita a certa subjetividade desde qualitativa e o diagnóstico às vezes é difícil na ausência de marcador de clonalidade. Cada vez mais estudos enfatizam o interesse da citometria de fluxo (CMF) no diagnóstico de SMD: ao procurar aberrações qualitativas e/ou quantitativas da expressão de marcadores de membrana, o CMF permite estabelecer pontuações Diagnóstico que implementamos no laboratório . No entanto, esses estudos são baseados em um modelo estático que estuda as características fenotípicas dos pacientes em um determinado momento, mas não reflete realmente a hematopoiese ineficaz. Um modelo dinâmico para reprodução in vitro da hematopoiese seria uma ferramenta inovadora para o estudo de SMD. Este projeto visa desenvolver e padronizar um sistema de diferenciação em meio líquido de células-tronco hematopoiéticas (CSH) em células maduras, estudando cada estágio da diferenciação em termos de proliferação, apoptose e expressão fenotípica. As HSCs serão obtidas por triagem de CD34+ a partir da amostra medular no momento do diagnóstico: o investigador irá estudar a proliferação celular, a apoptose e a aquisição de marcadores de superfície, de forma a identificar as anomalias quantitativas e qualitativas associadas à diferenciação dos progenitores hematopoiéticos Smart. Isso deve permitir identificar fatores diagnósticos e prognósticos em termos de resposta ao tratamento, acutismo e sobrevida.