Estudo Prospectivo do Papel Prognóstico e Preditivo das Células Tumorais Circulantes em Pacientes com Carcinoma Espinocelular de Orofaringe: CTCO (Circulating Tumor Cells in the Oropharynx) (CTCO)

Os cânceres de cabeça e pescoço (HNSCC) são principalmente cânceres de células escamosas representados por tumores do trato aerodigestivo superior. Estágios localmente avançados (estágios III e IV) representam 50 a 70% de todas as apresentações. Os três principais fatores de risco são tabagismo, álcool e infecção orofaríngea pelo vírus do papiloma humano (HPV).

Além do status de HPV, não há biomarcador para o prognóstico em pacientes com HSNCC. Células tumorais circulantes (CTCs) podem fornecer informações "em tempo real" sobre o comportamento do tumor e já são usadas em vários tipos de câncer (cólon, pulmão). Sua detecção tem sensibilidade limitada e os biomarcadores não podem ser usados ​​para o diagnóstico precoce, mas podem ser úteis durante o acompanhamento para avaliar a recorrência tumoral precoce local, regional ou metastática.

Utilizando amostras de sangue em diferentes momentos (no diagnóstico, após o tratamento inicial e durante o seguimento), poderemos medir a variação na quantificação e estabelecer um papel preditivo dessas CTCs para a resposta ao tratamento.

Nossa hipótese é que as CTCs podem ter um papel fundamental, além do exame clínico e radiológico, na detecção precoce de recidivas tumorais.

Acreditamos que a consideração conjunta de parâmetros clínicos, estratégia de tratamento e quantificação de CTCs pode otimizar o acompanhamento e o manejo do paciente.

O sistema de extração CTC, ClearCell® FX da Biolidics, é um sistema automatizado de enriquecimento microfluídico. Tem a vantagem de recuperar CTCs totalmente intactas e viáveis ​​de uma amostra de sangue padrão. O princípio de classificação suave permite preservar a integridade celular e, portanto, a expressão de antígenos de superfície. As CTCs assim isoladas podem então ser recultivadas ou analisadas por imunocoloração. Esta técnica de alto desempenho, em operação desde dezembro de 2017 no Departamento de Bioquímica da Pr Claire Rodriguez-Lafrasse (HCL), demonstrou sua utilidade no câncer de pulmão.

A análise transcriptômica de CTCs pode ser realizada na escala de uma célula após o isolamento das CTCs. As CTCs podem então ser sequenciadas em RNAseq em massa (conjunto de células) ou célula por célula em nosso sequenciador Illumina (Nextseq), a fim de definir a heterogeneidade do tumor. A análise do transcriptoma fornece informações sobre o estado da célula quanto à sua posição na transição epitelio-mesenquimal graças a uma assinatura molecular por fenótipo. Uma caracterização livre de priori é, portanto, possível graças ao RNAseq single-cell. Esta técnica altamente sensível e inovadora permitirá o estudo do perfil de expressão gênica das CTCs.