Efeitos imunológicos das micropartículas intranasais de quitina (INCA)

SINOPSE DO ESTUDO Objetivos

primário

• Avaliar os efeitos da dosagem intranasal de micropartículas de quitina nas respostas da mucosa nasal em relação à concentração de citocinas (TNF-alfa, IFN-gama, IL-1b, IL-4 IL5, IL, 6, IL-8, IL-10 e IL-13) no fluido de lavagem nasal em comparação com a dosagem com placebo.

Secundário

• Avaliar os efeitos da dosagem intranasal de micropartículas de quitina nas respostas da mucosa nasal com relação à concentração de citocinas (TNF-alfa, IFN-gama, IL-1b, IL-4 IL5, IL, 6, IL-8, IL -10 e IL-13) no fluido de lavagem nasal em comparação com a dosagem com controle ativo.
• Avaliar a contagem total de eosinófilos e a concentração de cisteinil leucotrieno no fluido de lavagem nasal 4 e 8 horas após a administração em comparação com a pré-administração.
• Avaliar os escores totais de sintomas nasais 4 e 8 horas após a administração.
• Avaliar a segurança e a tolerabilidade das micropartículas de quitina administradas por via intranasal.

Design de estudo

Este estudo é um placebo duplo-cego de dose única e um estudo cruzado de 3 períodos controlado ativo simples-cego com uma lavagem de 2 semanas entre cada tratamento. Os indivíduos serão divididos em 2 grupos para o estudo e randomizados para receber uma dose única de micropartículas de quitina intranasal ou placebo nos dois primeiros períodos e uma dose única de um artigo de controle ativo, lipopolissacarídeo (LPS), para o terceiro período. O tratamento dos dois primeiros períodos será duplo-cego e o tratamento do terceiro período com LPS será simples-cego.

Cada aplicação de dose única para micropartículas de quitina (cmp), placebo e o artigo de controle ativo, LPS, deve incluir dois sprays medidos de 0,1 ml em cada narina. O volume total de pulverização para cada aplicação é de 0,4 ml, equivalente a uma dose única total de quitina de 2 mg (0,5 mg por pulverização de 0,1 ml) e uma dose única total de LPS de 2 mg de endotoxina de Enterobacter agglomerans (0,5 mg por pulverização de 0,1 ml).

A câmara climática onde a dosagem será realizada funcionará a 22°C com 3,5-4 trocas de ar por hora com ar limpo filtrado por HEPA a uma umidade relativa (UR) de 35-40%

População do estudo

O estudo envolverá 12 indivíduos saudáveis ​​em conformidade com os critérios de inclusão randomizados para os tratamentos. A duração da participação de cada participante será de cerca de 42 dias, com oito visitas, incluindo triagem e acompanhamento de segurança.

Plano de tratamento e métodos O estudo deve incluir três períodos de tratamento cruzados, onde cada indivíduo (12 no total) receberá doses únicas de cmp, placebo ou LPS (controle ativo) em cada um dos três períodos de tratamento. O estudo foi projetado de forma que o LPS seja dosado no último período, de modo a mitigar quaisquer problemas potenciais com transferência.

A triagem deve ocorrer em um período de cerca de 2 a 6 semanas antes da dosagem. Depois de obter o consentimento informado, cada sujeito passará por uma visita de triagem para revisar os critérios de inclusão/exclusão e confirmar a elegibilidade. Cada indivíduo será então atribuído a um dos dois grupos de dosagem (6 indivíduos por grupo) para cada um dos três períodos de estudo, a fim de coordenar a dosagem na Clínica. A triagem inicial identificará 4-8 indivíduos adicionais (total de até 20 rastreados) que serão incluídos apenas se um dos indivíduos originalmente randomizados abandonar o estudo. Os indivíduos que forem substituídos serão randomizados para tratamento e deverão passar por todos os três períodos de tratamento.

Para o período 1, no dia 0, o primeiro grupo de dosagem será randomizado para receber cmp ou placebo. Os indivíduos serão admitidos na Clínica às 8h30 para se aclimatarem, receberem avaliação clínica pré-dosagem e confirmarem a elegibilidade. A dosagem deve começar às 10:00h com avaliação conduzida de acordo com os procedimentos definidos abaixo. Os sujeitos permanecerão na Clínica até c. 20:00h. No dia seguinte (dia 1), os mesmos sujeitos receberão uma entrevista telefônica de acompanhamento de segurança. No dia 2, o segundo grupo de dosagem será randomizado para receber cmp ou placebo, novamente recebendo uma entrevista telefônica de acompanhamento de segurança no dia seguinte (dia 3). Para o período 2, no dia 14, o primeiro grupo de dosagem receberá a dose não designada anteriormente, cmp ou placebo e receberá uma entrevista telefônica de acompanhamento de segurança no dia seguinte (dia 15). No dia 16, o segundo grupo de dosagem também receberá a dose não designada anteriormente, cmp ou placebo e novamente receberá uma entrevista telefônica de acompanhamento de segurança no dia seguinte (dia 17). Para o período 3, LPS será administrado ao primeiro grupo de dosagem no dia 28 e ao segundo grupo de dosagem no dia 30; com acompanhamento de segurança por entrevista por telefone nos dias 29 e 31, respectivamente.

Após a última visita de dosagem, os indivíduos receberão uma avaliação de segurança de final de estudo por entrevista telefônica no dia 42 (+/- 2 dias), que incluirá verificações de eventos adversos.

Cada indivíduo deverá fornecer 10 ml de sangue para avaliação hematológica na triagem e nos períodos de tratamento 1, 2 e 3. Um total de 40 ml de sangue será coletado para cada indivíduo durante toda a duração do estudo.

Pré-dosagem

1. Avaliação de segurança em termos de exame físico, incluindo boca, nariz e pulmões
2. Questionário de sintomas
3. Sangue coletado para exames hematológicos

4. Lavagem nasal pelo teste da azeitona nasal com as pessoas sentadas com a cabeça inclinada para a frente por 60 segundos realizada

   Pós-dosagem

5. Medição dos escores de sintomas nasais em 4 e 8 horas
6. Teste de rinometria acústica realizado em 4 e 8 horas
7. Lavagem nasal pelo teste da azeitona nasal com as pessoas sentadas com a cabeça inclinada para a frente por 60 segundos realizada em 4 e 8 horas
8. Questionário de sintomas realizado em 4 e 8 horas
9. Monitoramento de segurança: sinais vitais, frequência cardíaca, pressão arterial realizada em 2, 6 horas
10. Entrevista de segurança de acompanhamento realizada 24 horas após a dosagem (dia seguinte), que inclui registro de eventos adversos e verificação de medicação concomitante.

Desfecho primário Alterações nos níveis (concentração máxima) de TNF-alfa, IFN-gama, IL-1b, IL-4, IL5, IL-6, IL-8, IL-10 e IL-13 em amostras de lavagem nasal após dosagem intranasal com cmp em comparação com placebo.

Ponto final secundário Alterações nos níveis (concentração máxima) de TNF-alfa, IFN-gama, IL-1b, IL-4, IL5, IL-6, IL-8 IL-10 e IL-13 em amostras de lavagem nasal após intranasal dosagem com cmp em comparação com o controle ativo de lipopolissacarídeo.

Mudança da linha de base:

1. a contagem total de eosinófilos e a concentração de cisteinil leucotrieno no fluido de lavagem nasal após administração intranasal com cmp
2. pontuações totais de sintomas nasais em 4 e 8 horas após a administração intranasal com cmp

A segurança será avaliada usando os eventos adversos, sinais vitais e rinometria acústica nasal após a dosagem com cmp versus placebo.

Avaliação estatística Para as citocinas e contagens de células, as concentrações são medidas e os dados transformados em log analisados ​​com um modelo ANOVA incluindo dia de estudo e exposição como fator fixo e participantes como fator aleatório. Essas variáveis ​​são descritas pela média geométrica, coeficiente de variância (CV), diferença relativa entre as exposições, incluindo intervalo de confiança de 95% (IC) e valor-p.

Devido a problemas de teto e piso nos dados, heterogeneidade na variação (dentro do participante) ou violações da suposição de dados normalmente distribuídos, não é apropriado analisar todos os dados dos resultados, como os escores de sintomas (alteração da linha de base) com ANOVAs. Aqui testes não paramétricos serão aplicados. Um teste de soma de Wilcoxon Rank será usado para comparar os grupos.

Os sintomas subjetivos no início do estudo são descritos pela mediana e pela faixa interquartil. Os dados para 'mudança nas pontuações nasais' são descritos por box-plots. O valor adjacente superior nos gráficos é o maior ponto de dados menor que o percentil 75 mais 3/2 vezes o intervalo interquartil. O valor adjacente inferior é definido de maneira semelhante.

Para comparar a exposição ao placebo e ao cmp e tendo em conta um possível 'efeito de aprendizagem', os dados serão analisados ​​por uma técnica padrão tendo em conta o desenho (cross-over). Os participantes serão divididos em dois grupos devido às duas possíveis ordens de exposição; um grupo composto por participantes que foram expostos à exposição ao placebo antes da exposição ao cmp; e outro grupo de participantes expostos a cmp antes da exposição ao placebo. A hipótese de não haver diferença entre cmp e exposição ao placebo será testada comparando os dois grupos quanto às diferenças entre a primeira e a segunda medição. Um teste de soma de Wilcoxon Rank é usado para comparar os dois grupos. De maneira semelhante, testaremos a hipótese de 'nenhum efeito de aprendizagem'.