Az intranazális kitin mikrorészecskék immunológiai hatásai (INCA)

TANULMÁNY SZINOPSZIS Célok

Elsődleges

•A kitin mikrorészecskék intranazális adagolásának az orrnyálkahártya-válaszokra gyakorolt ​​hatásának felmérése a citokinek (TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4 IL5, IL, 6, IL-8, IL-10 és IL-13) az orröblítő folyadékban a placebóval végzett adagoláshoz képest.

Másodlagos

• A kitin mikrorészecskék intranazális adagolásának az orrnyálkahártya-válaszokra gyakorolt ​​hatásának felmérése a citokinek (TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4 IL5, IL, 6, IL-8, IL) koncentrációja tekintetében -10 és IL-13) az orröblítő folyadékban az aktív kontrollal történő adagoláshoz képest.
• Az összes eozinofil szám és a ciszteinil-leukotrién koncentráció meghatározása az orröblítő folyadékban az adagolás után 4 és 8 órával az adagolás előttihez képest.
• Az orr-tünetek összpontszámának értékelése az adagolás után 4 és 8 órával.
• Az intranazálisan adagolt kitin mikrorészecskék biztonságosságának és tolerálhatóságának felmérése.

Dizájnt tanulni

Ez a vizsgálat egy egyszeri dózisú, kettős vak placebóval és egyszeres vak aktív kontrollos, 3 periódusos keresztezett vizsgálat, 2 hetes kimosással az egyes kezelések között. A vizsgálat során az alanyokat 2 csoportra osztják, és randomizálják, hogy az első két periódusban egyszeri adag intranazális kitin-mikrorészecskéket vagy placebót kapjanak, valamint egyetlen adag aktív kontrollterméket, a lipopoliszacharidot (LPS). a harmadik periódus. Az első két periódusban végzett kezelés kettős vak, a harmadik periódus LPS-kezelése pedig egyszeres vak lesz.

A kitin mikrorészecskék (cmp), a placebó és az aktív kontroll cikk, az LPS minden egyes dózisának két 0,1 ml-es kimért permetet kell tartalmaznia mindkét orrlyukba. A teljes permetezési térfogat minden egyes alkalmazásnál 0,4 ml, ami megfelel a teljes egyszeri 2 mg-os kitin-dózisnak (0,5 mg/0,1 ml permetezés), valamint az LPS-re adott, összesen 2 mg Enterobacter agglomerans-ból származó endotoxin (0,5) egyszeri adagjának. mg/0,1 ml permet).

A klímakamra, ahol az adagolást végezni kell, 22°C-on üzemel, óránként 3,5-4 levegőcserével, tiszta HEPA-szűrős levegővel, 35-40% relatív páratartalom mellett.

Vizsgálati populáció

A vizsgálatban 12 egészséges alany vesz majd részt, akik megfelelnek a beválasztási kritériumoknak, véletlenszerűen a kezelésekre. Az egyes alanyok részvételének időtartama körülbelül 42 nap, nyolc látogatással, beleértve a szűrést és a biztonsági nyomon követést.

Kezelési terv és módszerek A vizsgálatnak három keresztezett kezelési periódusból kell állnia, ahol minden alany (összesen 12) egyszeri adag cmp-t, placebót vagy LPS-t (aktív kontroll) kap a három kezelési periódus mindegyikében. A tanulmányt úgy tervezték meg, hogy az LPS-t az utolsó időszakban kell adagolni, hogy csökkentsék az átvitellel kapcsolatos esetleges problémákat.

A szűrést kb. 2-6 héttel az adagolás előtt kell elvégezni. A tájékozott beleegyezés megszerzése után minden alany szűrővizsgálaton vesz részt a felvételi/kizárási kritériumok felülvizsgálata és a jogosultság megerősítése érdekében. Ezután minden egyes alanyt két adagolási csoport egyikébe kell besorolni (csoportonként 6 alany) mind a három vizsgálati időszakra, hogy összehangolják az adagolást a klinikán. A kezdeti szűrés során 4-8 további alanyt azonosítanak (összesen legfeljebb 20 szűrt személyt), akik csak akkor kerülnek bele, ha az eredetileg randomizált alanyok egyike kiesik a vizsgálatból. A lecserélt alanyokat véletlenszerűen besorolják a kezelésre, és mindhárom kezelési időszakon át kell esniük.

Az 1. periódusra, a 0. napon az első adagolócsoportot véletlenszerűen CMP-t vagy placebót kapják. Az alanyok 8:30-kor kerülnek be a Klinikára, hogy akklimatizálódjanak, megkapják az adagolás előtti klinikai értékelést és megerősítsék a jogosultságot. Az adagolást 10:00 órakor kell megkezdeni, az alábbiakban meghatározott eljárások szerint végzett értékeléssel. Az alanyok a Klinikán maradnak c. 20:00 óra. A következő napon (1. napon) ugyanazok az alanyok telefonos interjúban kapnak biztonsági nyomon követést. A 2. napon a második adagolócsoportot véletlenszerűen besorolják, hogy vagy CMP-t vagy placebót kapjanak, és a következő napon (3. napon) ismét telefonos interjút kapjanak a biztonsági követésről. A 2. periódusban, a 14. napon, az első adagoló csoport megkapja a korábban ki nem osztott dózist, akár CMP-t, akár placebót, és a következő napon (15. napon) telefonos interjút kapnak a biztonsági ellenőrzésről. A 16. napon a második adagolási csoport is megkapja a korábban ki nem osztott dózist, akár CMP-t, akár placebót, és a következő napon (17. napon) ismét telefonos interjút kap a biztonsági ellenőrzésről. A 3. periódusban az LPS-t az első adagolócsoportnak a 28. napon, a második adagolási csoportnak a 30. napon adjuk be; telefonos interjúval a biztonsági nyomon követéssel a 29. és 31. napon.

Az utolsó adagolási látogatást követően az alanyok a vizsgálat végén biztonsági értékelést kapnak telefonos interjú útján a 42. napon (+/- 2 nap), amely magában foglalja a nemkívánatos események ellenőrzését is.

Minden alanynak 10 ml vért kell szolgáltatnia a hematológiai értékeléshez a szűréskor és az 1., 2. és 3. kezelési időszakban. Összesen 40 ml vért vesznek minden alanyból a vizsgálat teljes időtartama alatt.

Előadagolás

1. Biztonsági értékelés a fizikális vizsgálat szempontjából, beleértve a szájat, az orrot és a tüdőt
2. Tünet kérdőív
3. Vérvétel hematológiai vizsgálatokhoz

4. Orrmosás az orr olajbogyó teszttel 60 másodpercig előrehajtott fejjel ülő személyeknél

   Utólagos adagolás

5. Az orrtünetek pontszámainak mérése 4 és 8 óra elteltével
6. Akusztikus rhinometria vizsgálat 4 és 8 óránál
7. Orrmosás az orr olajbogyó teszttel 60 másodpercig előrehajtott fejjel ülő személyeknél 4 és 8 óránál
8. Tüneti kérdőív 4 és 8 óránál
9. Biztonsági monitorozás: életjelek, pulzusszám, vérnyomás mérés 2, 6 óránál
10. Az adagolás után 24 órával (a következő napon) végzett nyomon követési biztonsági interjú, amely magában foglalja a nemkívánatos események rögzítését és az egyidejű gyógyszerellenőrzést.

Elsődleges végpont A TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL5, IL-6, IL-8, IL-10 és IL-13 szintjének (maximális koncentrációjának) változása az orrmosó mintákban intranazális adagolás CMP-vel a placebóhoz képest.

Másodlagos végpont A TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8 IL-10 és IL-13 szintjének (maximális koncentrációjának) változása intranazális beadást követő orrmosó mintákban cmp-vel történő adagolás a lipopoliszacharid aktív kontrollhoz képest.

Változás az alapvonalhoz képest:

1. a teljes eozinofilszám és a ciszteinil-leukotrién koncentráció az orröblítő folyadékban a CMP intranazális adagolását követően
2. összes orrtünet pontszám 4 és 8 órával a CMP intranazális adagolását követően

A biztonságosságot a nemkívánatos események, életjelek és nazális akusztikus rhinometria alapján értékelik a cmp adagolását követően a placebóval szemben.

Statisztikai értékelés A citokinek és a sejtszámok esetében a koncentrációkat megmérjük, és a log-transzformált adatokat ANOVA modellel elemezzük, beleértve a vizsgálati napot és az expozíciót fix faktorként és a résztvevőket véletlenszerű tényezőként. Ezeket a változókat a geometriai átlag, a variancia együttható (CV), a 95%-os konfidencia intervallumot (CI) tartalmazó expozíciók közötti relatív különbség és a p-érték írja le.

Az adatok mennyezeti és padlózati problémái, a (résztvevőn belüli) eltérések heterogenitása vagy a normál eloszlású adatok feltételezésének megsértése miatt nem helyénvaló elemezni az eredmények összes adatát, például a tünetpontszámokat (változás az alapvonalhoz képest). ANOVA-kkal. Itt nem paraméteres teszteket kell alkalmazni. A csoportok összehasonlítására Wilcoxon Rank összeg tesztet használunk.

A kiindulási szubjektív tüneteket a medián és az interkvartilis tartomány írja le. A „nazális pontszámok változásának” adatait box-plot-ok írják le. A diagramok felső szomszédos értéke a legnagyobb adatpont, amely kisebb, mint a 75. percentilis plusz a kvartilisek közötti tartomány 3/2-e. Az alsó szomszédos értéket hasonló módon határozzuk meg.

A placebo és a CMP-expozíció összehasonlítása érdekében, valamint egy lehetséges „tanulási hatás” figyelembevételével az adatokat standard technikával elemzik, figyelembe véve a tervezést (keresztezés). A résztvevőket a két lehetséges expozíciós sorrend miatt két csoportra osztják; az egyik csoport olyan résztvevőkből állt, akik a CMP-expozíció előtt placebónak voltak kitéve; és a résztvevők egy másik csoportja, akik a placebo-expozíció előtt cmp-nek voltak kitéve. Azt a hipotézist, miszerint nincs különbség a CMP és a placebo expozíció között, úgy teszteljük, hogy összehasonlítjuk a két csoportot az első és a második mérés közötti különbségek tekintetében. A két csoport összehasonlítására Wilcoxon Rank összegpróbát használunk. Hasonló módon teszteljük a „tanulásnak nincs hatása” hipotézist.