Immunologiske effekter fra intranasale kitinmikropartikler (INCA)

STUDIESYNOPSIS Mål

Hoved

•For å vurdere effekten av intranasal dosering av kitinmikropartikler på neseslimhinneresponser med hensyn til konsentrasjonen av cytokiner (TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4 IL5, IL, 6, IL-8, IL-10 og IL-13) i neseskyllevæske sammenlignet med dosering med placebo.

Sekundær

• For å vurdere effekten av intranasal dosering av kitinmikropartikler på neseslimhinneresponser med hensyn til konsentrasjonen av cytokiner (TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4 IL5, IL, 6, IL-8, IL -10 og IL-13) i neseskyllevæske sammenlignet med dosering med aktiv kontroll.
• For å vurdere det totale eosinofiltall og cysteinylleukotrienkonsentrasjon i neseskyllevæske 4 og 8 timer etter dosering sammenlignet med før dosering.
• For å vurdere de totale nesesymptomskårene 4 og 8 timer etter dosering.
• For å vurdere sikkerheten og toleransen til kitin-mikropartikler dosert intranasalt.

Studere design

Denne studien er en enkeltdose, dobbelblind placebo og enkeltblind aktiv kontrollert 3-perioders cross-over-studie med en 2-ukers utvasking mellom hver behandling. Forsøkspersonene vil bli delt inn i 2-grupper for studien og randomisert til å motta en enkeltdose av enten intranasale kitin-mikropartikler eller placebo for de to første periodene og en enkelt dose av en aktiv kontrollartikkel, lipopolysakkarid (LPS), for tredje periode. Behandlingen for de to første periodene vil være dobbeltblindet og behandlingen for tredje perioden med LPS vil være enkeltblindet.

Hver enkeltdoseapplikasjon for kitinmikropartikler (cmp), placebo og den aktive kontrollartikkelen, LPS, skal omfatte to 0,1 ml avmålte sprayer i hvert nesebor. Det totale sprayvolumet for hver påføring er 0,4 ml tilsvarende en total enkeltdose for kitin på 2 mg (0,5 mg per 0,1 ml spray), og en total enkeltdose for LPS på 2 mg endotoksin fra Enterobacter agglomerans (0,5 mg per 0,1 ml spray).

Klimakammeret hvor doseringen skal utføres vil kjøre på 22°C med 3,5-4 luftskifter i timen med ren HEPA-filtrert luft ved en relativ fuktighet (RH) på 35-40 %

Studiepopulasjon

Studien vil involvere 12 friske forsøkspersoner som samsvarer med inklusjonskriteriene som er randomisert til behandlingene. Varigheten av hvert fags deltakelse vil være ca. 42 dager med åtte besøk inkludert screening og sikkerhetsoppfølging.

Behandlingsplan og metoder Studien skal omfatte tre cross-over behandlingsperioder, hvor hver forsøksperson (totalt 12) vil få enkeltdoser av cmp, placebo eller LPS (aktiv kontroll) i hver av de tre behandlingsperiodene. Studien er utformet slik at LPS skal doseres i den siste perioden for å redusere eventuelle problemer med overføring.

Screening skal finne sted i en periode på ca. 2-6 uker før dosering. Etter å ha innhentet informert samtykke, vil hvert forsøksperson gjennomgå et screeningbesøk for å gjennomgå inkluderings-/ekskluderingskriteriene og bekrefte kvalifisering. Hvert forsøksperson vil deretter bli tildelt en av to doseringsgrupper (6 forsøkspersoner per gruppe) for hver av de tre studieperiodene for å koordinere doseringen ved klinikken. Den første screeningen vil identifisere 4-8 ekstra forsøkspersoner (totalt opptil 20 screenede) som vil bli inkludert bare hvis en av de opprinnelig randomiserte forsøkspersonene faller ut av studien. Personer som erstattes vil bli randomisert for behandling og vil bli pålagt å gjennomgå alle tre behandlingsperiodene.

For periode 1, på dag 0, vil den første doseringsgruppen bli randomisert til å motta enten cmp eller placebo. Forsøkspersonene vil bli innlagt på klinikken kl. 8.30 for å akklimatisere seg, motta en klinisk vurdering før dosering og bekrefte kvalifisering. Doseringen skal starte kl. 10:00 med vurdering utført i henhold til prosedyrene definert nedenfor. Forsøkspersonene vil forbli i klinikken til ca. 20:00. Påfølgende dag (dag 1) vil de samme forsøkspersonene få en sikkerhetsoppfølging på telefonintervju. På dag 2 vil den andre doseringsgruppen randomiseres til å motta enten cmp eller placebo, og vil igjen motta en sikkerhetsoppfølging på telefonintervju neste dag (dag 3). For periode 2, på dag 14, vil den første doseringsgruppen motta dosen som ikke tidligere er tildelt, enten cmp eller placebo, og vil motta en sikkerhetsoppfølging på telefonintervju dagen etter (dag 15). På dag 16 vil den andre doseringsgruppen også motta dosen som ikke tidligere er tildelt, enten cmp eller placebo, og vil igjen motta en sikkerhetsoppfølging på telefonintervju dagen etter (dag 17). For periode 3 vil LPS doseres til den første doseringsgruppen på dag 28 og til den andre doseringsgruppen på dag 30; med telefonintervju sikkerhetsoppfølging på henholdsvis dag 29 og 31.

Etter det siste doseringsbesøket vil forsøkspersonene motta en sikkerhetsvurdering ved slutten av studien ved telefonintervju på dag 42 (+/- 2 dager), som vil inkludere kontroller av uønskede hendelser.

Hver forsøksperson vil bli pålagt å gi 10 ml blod for hematologisk vurdering ved screening og i behandlingsperiodene 1, 2 og 3. Totalt 40 ml blod vil bli tappet for hvert individ for hele varigheten av studien.

Fordosering

1. Sikkerhetsvurdering i form av fysisk undersøkelse, inkludert munn, nese og lunger
2. Symptom spørreskjema
3. Blod tatt for hematologiske tester

4. Neseskylling ved neseoliventesten med personene som sitter med hodet bøyd fremover i 60 sekunder.

   Etter dosering

5. Måling av nasale symptomscore etter 4 og 8 timer
6. Akustisk rhinometritest utført etter 4 og 8 timer
7. Neseskylling ved neseoliventesten med personene som sitter med hodet bøyd fremover i 60 sekunder utført etter 4 og 8 timer
8. Symptomspørreskjema utført etter 4 og 8 timer
9. Sikkerhetsovervåking: vitale tegn, hjertefrekvens, blodtrykk utført etter 2, 6 timer
10. Oppfølgende sikkerhetsintervju utført 24 timer etter dosering (påfølgende dag) som inkluderer bivirkningsregistrering og samtidig medikamentsjekk.

Primære endepunktendringer i nivåer (maksimal konsentrasjon) av TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL5, IL-6, IL-8, IL-10 og IL-13 i neseskyllingsprøver etter intranasal dosering med cmp sammenlignet med placebo.

Sekundære endepunktsendringer i nivåer (maksimal konsentrasjon) av TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL5, IL-6, IL-8 IL-10 og IL-13 i neseskyllingsprøver etter intranasale dosering med cmp sammenlignet med lipopolysakkarid aktiv kontroll.

Endring fra baseline:

1. totalt antall eosinofiler og cysteinylleukotrienkonsentrasjon i neseskyllevæske etter intranasal dosering med cmp
2. total nesesymptomskår ved 4 og 8 timer etter intranasal dosering med cmp

Sikkerhet vil bli vurdert ved hjelp av bivirkninger, vitale tegn og nasal akustisk rhinometri etter dosering med cmp versus placebo.

Statistisk vurdering For cytokiner og celletall blir konsentrasjonene målt, og de log-transformerte dataene analysert med en ANOVA-modell inkludert studiedag og eksponering som fast faktor og deltakere som en tilfeldig faktor. Disse variablene er beskrevet av geometrisk gjennomsnitt, variasjonskoeffisient (CV), relativ forskjell mellom eksponeringer inkludert 95 % konfidensintervall (CI) og p-verdi.

På grunn av tak- og gulvproblemer i dataene, heterogenitet i (innenfor deltaker) variasjonen, eller brudd på antakelsen om normalfordelte data, er det ikke hensiktsmessig å analysere alle dataene for utfallene som symptomskårene (endring fra baseline) med ANOVAer. Her vil ikke-parametriske tester bli brukt. En Wilcoxon Rank sum test vil bli brukt for å sammenligne gruppene.

Subjektive symptomer ved baseline er beskrevet av medianen og interkvartilområdet. Dataene for 'endring i neseskår' er beskrevet med boksplott. Den øvre tilstøtende verdien i plottene er det største datapunktet mindre enn 75. persentil pluss 3/2 ganger interkvartilområdet. Den nedre tilstøtende verdien er definert på lignende måte.

For å sammenligne placebo og cmp-eksponeringen og ta hensyn til en mulig "læringseffekt" vil dataene bli analysert med en standardteknikk som tar hensyn til designet (cross-over). Deltakerne vil bli delt inn i to grupper på grunn av de to mulige eksponeringsordenene; én gruppe bestående av deltakere som har blitt eksponert for placeboeksponering før cmp-eksponeringen; og en annen gruppe deltakere som ble eksponert for cmp før placeboeksponeringen. Hypotesen om ingen forskjell mellom cmp og placeboeksponering vil bli testet ved å sammenligne de to gruppene med hensyn til forskjellene mellom den første og den andre målingen. En Wilcoxon Rank sum test brukes til å sammenligne de to gruppene. På lignende måte vil vi teste hypotesen om 'ingen effekt av læring'.