Immunologische Wirkungen von intranasalen Chitin-Mikropartikeln (INCA)

SYNOPSIS DER STUDIE Ziele

Primär

•Um die Auswirkungen der intranasalen Dosierung von Chitin-Mikropartikeln auf die Reaktionen der Nasenschleimhaut in Bezug auf die Konzentration von Zytokinen (TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL5, IL, 6, IL-8, IL-10 und IL-13) in Nasenspülflüssigkeit im Vergleich zur Dosierung mit Placebo.

Sekundär

• Um die Auswirkungen einer intranasalen Dosierung von Chitin-Mikropartikeln auf die Reaktionen der Nasenschleimhaut in Bezug auf die Konzentration von Zytokinen (TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL5, IL, 6, IL-8, IL -10 und IL-13) in Nasenspülflüssigkeit im Vergleich zur Dosierung mit aktiver Kontrolle.
• Bewertung der Gesamtzahl der Eosinophilen und der Cysteinyl-Leukotrien-Konzentration in der Nasenspülflüssigkeit 4 und 8 Stunden nach der Verabreichung im Vergleich zur Vorbehandlung.
• Bewertung der gesamten nasalen Symptomwerte 4 und 8 Stunden nach der Einnahme.
• Bewertung der Sicherheit und Verträglichkeit von intranasal verabreichten Chitin-Mikropartikeln.

Studiendesign

Bei dieser Studie handelt es sich um eine doppelblinde, placebo- und einfachblinde, aktiv kontrollierte 3-Perioden-Crossover-Studie mit Einzeldosis und einem 2-wöchigen Washout zwischen jeder Behandlung. Die Probanden werden für die Studie in 2 Gruppen eingeteilt und randomisiert, um eine Einzeldosis von entweder intranasalen Chitin-Mikropartikeln oder Placebo für die ersten beiden Perioden und eine Einzeldosis eines aktiven Kontrollartikels, Lipopolysaccharid (LPS), zu erhalten die dritte Periode. Die Behandlung für die ersten beiden Perioden ist doppelblind und die Behandlung für die dritte Periode mit LPS ist einfach verblindet.

Jede Einzeldosisanwendung für Chitin-Mikropartikel (cmp), Placebo und den aktiven Kontrollartikel, LPS, umfasst zwei 0,1 ml dosierte Sprühstöße in jedes Nasenloch. Das Gesamtsprühvolumen für jede Anwendung beträgt 0,4 ml, was einer Gesamteinzeldosis von 2 mg Chitin (0,5 mg pro 0,1 ml Sprühstoß) und einer Gesamteinzeldosis von 2 mg Endotoxin aus Enterobacter agglomerans (0,5 mg pro 0,1 ml Spray).

Die Klimakammer, in der die Dosierung durchgeführt werden soll, wird bei 22 °C mit 3,5-4 Luftwechseln pro Stunde mit sauberer HEPA-gefilterter Luft bei einer relativen Luftfeuchtigkeit (RH) von 35-40 % betrieben.

Studienpopulation

An der Studie werden 12 gesunde Probanden teilnehmen, die den Einschlusskriterien entsprechen und zu den Behandlungen randomisiert werden. Die Dauer der Teilnahme jedes Probanden beträgt ca. 42 Tage mit acht Besuchen, einschließlich Screening und Sicherheitsnachsorge.

Behandlungsplan und Methoden Die Studie soll drei Cross-Over-Behandlungsperioden umfassen, in denen jede Person (insgesamt 12) in jeder der drei Behandlungsperioden Einzeldosen von cmp, Placebo oder LPS (aktive Kontrolle) erhält. Die Studie wurde so konzipiert, dass LPS in der letzten Periode dosiert wird, um mögliche Probleme mit einer Verschleppung zu mildern.

Das Screening soll in einem Zeitraum von ca. 2-6 Wochen vor der Verabreichung stattfinden. Nach Erhalt der Einverständniserklärung wird jeder Proband einem Screening-Besuch unterzogen, um die Einschluss-/Ausschlusskriterien zu überprüfen und die Eignung zu bestätigen. Jeder Proband wird dann für jeden der drei Studienzeiträume einer von zwei Dosierungsgruppen (6 Probanden pro Gruppe) zugeordnet, um die Dosierung in der Klinik zu koordinieren. Das anfängliche Screening wird 4-8 zusätzliche Probanden identifizieren (insgesamt bis zu 20 gescreente), die nur dann eingeschlossen werden, wenn einer der ursprünglich randomisierten Probanden aus der Studie ausscheidet. Probanden, die ersetzt werden, werden für die Behandlung randomisiert und müssen sich allen drei Behandlungsperioden unterziehen.

Für Periode 1, am Tag 0, wird die erste Dosierungsgruppe randomisiert, um entweder cmp oder Placebo zu erhalten. Die Probanden werden um 8:30 Uhr in die Klinik aufgenommen, um sich zu akklimatisieren, eine klinische Bewertung vor der Dosierung zu erhalten und die Eignung zu bestätigen. Die Dosierung soll um 10:00 Uhr beginnen, wobei die Bewertung gemäß den unten definierten Verfahren durchgeführt wird. Die Probanden bleiben in der Klinik bis c. 20:00 Uhr. Am folgenden Tag (Tag 1) erhalten die gleichen Probanden ein telefonisches Sicherheits-Follow-up-Interview. Am Tag 2 wird die zweite Dosierungsgruppe randomisiert, um entweder cmp oder Placebo zu erhalten, und erhält am folgenden Tag (Tag 3) erneut eine telefonische Sicherheitsnachsorge. Für Periode 2, an Tag 14, erhält die erste Dosierungsgruppe die zuvor nicht zugewiesene Dosis, entweder cmp oder Placebo, und erhält am folgenden Tag (Tag 15) eine telefonische Sicherheitsnachsorge. Am Tag 16 erhält die zweite Dosierungsgruppe ebenfalls die zuvor nicht zugewiesene Dosis, entweder cmp oder Placebo, und erhält am folgenden Tag (Tag 17) erneut eine telefonische Sicherheitsbefragung. Für Periode 3 wird LPS der ersten Dosierungsgruppe am Tag 28 und der zweiten Dosierungsgruppe am Tag 30 verabreicht; mit einem telefonischen Sicherheits-Follow-up-Interview an den Tagen 29 bzw. 31.

Nach dem letzten Dosierbesuch erhalten die Probanden am Ende der Studie eine Sicherheitsbewertung per Telefoninterview am Tag 42 (+/- 2 Tage), die Prüfungen auf unerwünschte Ereignisse umfasst.

Jeder Proband muss 10 ml Blut für die hämatologische Untersuchung beim Screening und in den Behandlungsperioden 1, 2 und 3 bereitstellen. Für die gesamte Dauer der Studie werden jedem Probanden insgesamt 40 ml Blut entnommen.

Vordosierung

1. Sicherheitsbewertung in Bezug auf die körperliche Untersuchung, einschließlich Mund, Nase und Lunge
2. Symptomfragebogen
3. Blutabnahme für hämatologische Untersuchungen

4. Nasenspülung durch den nasalen Oliventest, wobei die Personen 60 Sekunden lang mit nach vorne gebeugtem Kopf sitzend durchgeführt werden

   Nachdosierung

5. Messung der nasalen Symptomwerte nach 4 und 8 Stunden
6. Akustischer Rhinometrietest nach 4 und 8 Stunden durchgeführt
7. Nasenspülung durch den nasalen Oliventest, bei dem die Personen 60 Sekunden lang mit nach vorne gebeugtem Kopf sitzen und nach 4 und 8 Stunden durchgeführt werden
8. Symptomfragebogen nach 4 und 8 Stunden durchgeführt
9. Sicherheitsüberwachung: Vitalfunktionen, Herzfrequenz, Blutdruck nach 2, 6 Stunden
10. Follow-up-Sicherheitsinterview, das 24 Stunden nach der Verabreichung (am Folgetag) durchgeführt wird, einschließlich der Aufzeichnung unerwünschter Ereignisse und der Überprüfung der begleitenden Medikation.

Primärer Endpunkt Änderungen der Spiegel (maximale Konzentration) von TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL5, IL-6, IL-8, IL-10 und IL-13 in folgenden Nasenspülproben intranasale Dosierung mit cmp im Vergleich zu Placebo.

Sekundärer Endpunkt Veränderungen der Spiegel (maximale Konzentration) von TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL5, IL-6, IL-8, IL-10 und IL-13 in Nasenspülungsproben nach intranasaler Verabreichung Dosierung mit cmp im Vergleich zur Lipopolysaccharid-Aktivkontrolle.

Änderung gegenüber der Grundlinie:

1. die Gesamtzahl der Eosinophilen und die Cysteinyl-Leukotrien-Konzentration in der Nasenspülflüssigkeit nach intranasaler Verabreichung von cmp
2. Gesamtbewertung der nasalen Symptome 4 und 8 Stunden nach der intranasalen Verabreichung von cmp

Die Sicherheit wird anhand der unerwünschten Ereignisse, der Vitalfunktionen und der nasalen akustischen Rhinometrie nach der Verabreichung von cmp im Vergleich zu Placebo bewertet.

Statistische Bewertung Für die Zytokine und Zellzahlen werden die Konzentrationen gemessen und die logarithmisch transformierten Daten mit einem ANOVA-Modell einschließlich Studientag und Exposition als fester Faktor und Teilnehmer als Zufallsfaktor analysiert. Diese Variablen werden durch das geometrische Mittel, den Varianzkoeffizienten (VK), die relative Differenz zwischen den Expositionen, einschließlich 95 %-Konfidenzintervall (KI), und den p-Wert beschrieben.

Aufgrund von Decken- und Bodenproblemen in den Daten, Heterogenität in der Variation (innerhalb der Teilnehmer) oder Verletzungen der Annahme normalverteilter Daten ist es nicht angemessen, alle Daten der Endpunkte wie die Symptomwerte (Veränderung gegenüber dem Ausgangswert) zu analysieren. mit ANOVA. Hier werden nichtparametrische Tests angewendet. Ein Wilcoxon-Rangsummentest wird verwendet, um die Gruppen zu vergleichen.

Subjektive Symptome zu Studienbeginn werden durch den Median und den Interquartilbereich beschrieben. Die Daten für die „Veränderung der nasalen Werte“ werden durch Box-Plots beschrieben. Der obere benachbarte Wert in den Diagrammen ist der größte Datenpunkt, der kleiner als das 75. Perzentil plus 3/2 Mal der Interquartilbereich ist. Der untere Nachbarwert wird auf ähnliche Weise definiert.

Um die Placebo- und die cmp-Exposition zu vergleichen und um einen möglichen „Lerneffekt“ zu berücksichtigen, werden die Daten mit einer Standardtechnik unter Berücksichtigung des Designs (Cross-Over) analysiert. Die Teilnehmer werden aufgrund der zwei möglichen Belichtungsreihenfolgen in zwei Gruppen eingeteilt; eine Gruppe bestehend aus Teilnehmern, die vor der cmp-Exposition einer Placebo-Exposition ausgesetzt waren; und eine andere Gruppe von Teilnehmern, die vor der Placebo-Exposition cmp ausgesetzt waren. Die Hypothese, dass es keinen Unterschied zwischen cmp- und Placebo-Exposition gibt, wird getestet, indem die beiden Gruppen in Bezug auf die Unterschiede zwischen der ersten und der zweiten Messung verglichen werden. Ein Wilcoxon-Rank-Summentest wird verwendet, um die beiden Gruppen zu vergleichen. In ähnlicher Weise werden wir die Hypothese „kein Lerneffekt“ testen.