Immunologiske effekter fra intranasale kitinmikropartikler (INCA)

STUDIESYNOPSIS Mål

Primær

•At vurdere virkningerne af intranasal dosering af kitinmikropartikler på næseslimhinderesponser med hensyn til koncentrationen af ​​cytokiner (TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4 IL5, IL, 6, IL-8, IL-10 og IL-13) i næseskylningsvæske sammenlignet med dosering med placebo.

Sekundær

• At vurdere virkningerne af intranasal dosering af kitinmikropartikler på næseslimhinderesponser med hensyn til koncentrationen af ​​cytokiner (TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4 IL5, IL, 6, IL-8, IL -10 og IL-13) i næseskylningsvæske sammenlignet med dosering med aktiv kontrol.
• At vurdere det totale eosinofiltal og cysteinylleukotrienkoncentration i næseskyllevæske 4 og 8 timer efter dosering sammenlignet med før dosering.
• At vurdere de samlede nasale symptomscore 4 og 8 timer efter dosering.
• At vurdere sikkerheden og tolerabiliteten af ​​kitin-mikropartikler doseret intranasalt.

Studere design

Denne undersøgelse er en enkeltdosis, dobbeltblind placebo og enkeltblind aktivt kontrolleret 3-perioders cross-over-studie med en 2-ugers udvaskning mellem hver behandling. Forsøgspersonerne vil blive opdelt i 2-grupper til undersøgelsen og randomiseret til at modtage en enkeltdosis af enten intranasale kitin-mikropartikler eller placebo i de første to perioder og en enkelt dosis af en aktiv kontrolartikel, lipopolysaccharid (LPS), for tredje periode. Behandlingen for de første to perioder vil være dobbeltblindet, og behandlingen for den tredje periode med LPS vil være enkeltblindet.

Hver enkelt dosispåføring af kitinmikropartikler (cmp), placebo og den aktive kontrolartikel, LPS, skal omfatte to 0,1 ml afmålte sprays i hvert næsebor. Det samlede sprayvolumen for hver påføring er 0,4 ml svarende til en samlet enkeltdosis for kitin på 2 mg (0,5 mg pr. 0,1 ml spray) og en samlet enkeltdosis for LPS på 2 mg endotoksin fra Enterobacter agglomerans (0,5 mg pr. 0,1 ml spray).

Klimakammeret, hvor doseringen skal udføres, vil køre ved 22°C med 3,5-4 luftskift i timen med ren HEPA-filtreret luft ved en relativ luftfugtighed (RH) på 35-40 %

Studiepopulation

Undersøgelsen vil involvere 12 raske forsøgspersoner, der overholder inklusionskriterierne randomiseret til behandlingerne. Varigheden af ​​hvert forsøgspersons deltagelse vil være ca. 42 dage med otte besøg inklusive screening og sikkerhedsopfølgning.

Behandlingsplan og metoder Undersøgelsen skal omfatte tre cross-over behandlingsperioder, hvor hver forsøgsperson (12 i alt) vil modtage enkeltdoser af cmp, placebo eller LPS (aktiv kontrol) i hver af de tre behandlingsperioder. Undersøgelsen er designet således, at LPS skal doseres i den sidste periode for at afbøde eventuelle problemer med overførsel.

Screening skal finde sted i en periode på ca. 2-6 uger før dosering. Efter at have indhentet informeret samtykke vil hvert forsøgsperson gennemgå et screeningsbesøg for at gennemgå inklusions-/eksklusionskriterierne og bekræfte berettigelse. Hvert forsøgsperson vil derefter blive tildelt en af ​​to doseringsgrupper (6 forsøgspersoner pr. gruppe) for hver af de tre undersøgelsesperioder for at koordinere doseringen på klinikken. Den indledende screening vil identificere 4-8 yderligere forsøgspersoner (i alt op til 20 screenede), som kun vil blive inkluderet, hvis en af ​​de oprindeligt randomiserede forsøgspersoner dropper ud af undersøgelsen. Forsøgspersoner, der udskiftes, vil blive randomiseret til behandling og skal gennemgå alle tre behandlingsperioder.

For periode 1, på dag 0, vil den første doseringsgruppe blive randomiseret til at modtage enten cmp eller placebo. Forsøgspersoner vil blive indlagt i klinikken kl. 8:30 for at akklimatisere sig, modtage en klinisk vurdering før dosering og bekræfte egnethed. Dosering skal starte kl. 10:00 med vurdering udført i overensstemmelse med procedurerne defineret nedenfor. Forsøgspersoner forbliver i klinikken indtil ca. 20:00. Den følgende dag (dag 1) vil de samme forsøgspersoner modtage en sikkerhedsopfølgning på telefonsamtale. På dag 2 vil den anden doseringsgruppe blive randomiseret til at modtage enten cmp eller placebo, og igen modtage en sikkerhedsopfølgning på telefoninterview den følgende dag (dag 3). For periode 2, på dag 14, vil den første doseringsgruppe modtage den dosis, der ikke tidligere er tildelt, hverken cmp eller placebo, og vil modtage en sikkerhedsopfølgning på telefoninterview den følgende dag (dag 15). På dag 16 vil den anden doseringsgruppe også modtage den dosis, der ikke tidligere er tildelt, enten cmp eller placebo og vil igen modtage en sikkerhedsopfølgning på telefoninterview den følgende dag (dag 17). For periode 3 vil LPS blive doseret til den første doseringsgruppe på dag 28 og til den anden doseringsgruppe på dag 30; med en telefoninterview sikkerhedsopfølgning på henholdsvis dag 29 og 31.

Efter det sidste doseringsbesøg vil forsøgspersonerne modtage en sikkerhedsvurdering ved afslutningen af ​​undersøgelsen ved telefoninterview på dag 42 (+/- 2 dage), som vil omfatte kontrol af bivirkninger.

Hvert forsøgsperson skal give 10 ml blod til hæmatologisk vurdering ved screening og ved behandlingsperiode 1, 2 og 3. Der vil blive udtaget i alt 40 ml blod for hver forsøgsperson i hele undersøgelsens varighed.

Fordosering

1. Sikkerhedsvurdering i form af fysisk undersøgelse, herunder mund, næse og lunger
2. Symptom spørgeskema
3. Blod udtaget til hæmatologiske tests

4. Næseskylning ved næseoliventest med personerne, der sidder med hovedet bøjet fremad i 60 sekunder

   Efter dosering

5. Måling af nasale symptomscore efter 4 og 8 timer
6. Akustisk rhinometri test udført efter 4 og 8 timer
7. Næseskylning ved næseoliventest med personerne siddende med hovedet bøjet fremad i 60 sekunder udført efter 4 og 8 timer
8. Symptomspørgeskema udført efter 4 og 8 timer
9. Sikkerhedsovervågning: vitale tegn, hjertefrekvens, blodtryk udført efter 2, 6 timer
10. Opfølgende sikkerhedssamtale udført 24 timer efter dosering (følgende dag), som inkluderer registrering af bivirkninger og samtidig medicinkontrol.

Primært slutpunkt Ændringer i niveauer (maksimal koncentration) af TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL5, IL-6, IL-8, IL-10 og IL-13 i næseskylningsprøver efter intranasal dosering med cmp sammenlignet med placebo.

Sekundære endepunktsændringer i niveauer (maksimal koncentration) af TNF-alfa, IFN-gamma, IL-1b, IL-4, IL5, IL-6, IL-8 IL-10 og IL-13 i næseskylningsprøver efter intranasale dosering med cmp sammenlignet med lipopolysaccharid aktiv kontrol.

Ændring fra baseline:

1. det totale eosinofiltal og cysteinylleukotrienkoncentration i næseskyllevæske efter intranasal dosering med cmp
2. total nasale symptomscore efter 4 og 8 timer efter intranasal dosering med cmp

Sikkerheden vil blive vurderet ved hjælp af bivirkninger, vitale tegn og nasal akustisk rhinometri efter dosering med cmp versus placebo.

Statistisk vurdering For cytokiner og celletællinger måles koncentrationerne, og de log-transformerede data analyseres med en ANOVA-model inklusive studiedag og eksponering som fast faktor og deltagere som en tilfældig faktor. Disse variabler beskrives ved det geometriske middelværdi, varianskoefficient (CV), relativ forskel mellem eksponeringer inklusive 95 % konfidensinterval (CI) og p-værdi.

På grund af loft- og gulvproblemer i dataene, heterogenitet i (inden for deltagerens) variation eller overtrædelser af antagelsen om normalfordelte data, er det ikke hensigtsmæssigt at analysere alle data for resultaterne, såsom symptomscorerne (ændring fra baseline) med ANOVA'er. Her vil ikke-parametriske test blive anvendt. En Wilcoxon Rank sum test vil blive brugt til at sammenligne grupperne.

Subjektive symptomer ved baseline er beskrevet af medianen og interkvartilområdet. Dataene for 'ændring i næseresultater' er beskrevet af boksplot. Den øverste tilstødende værdi i plottene er det største datapunkt mindre end 75. percentil plus 3/2 gange interkvartilområdet. Den nederste tilstødende værdi er defineret på lignende måde.

For at sammenligne placebo og cmp-eksponeringen og under hensyntagen til en mulig 'læringseffekt' vil dataene blive analyseret ved hjælp af en standardteknik under hensyntagen til designet (cross-over). Deltagerne vil blive opdelt i to grupper på grund af de to mulige eksponeringsordrer; en gruppe bestående af deltagere, der har været udsat for placeboeksponering før cmp-eksponeringen; og en anden gruppe deltagere, der var blevet udsat for cmp før placeboeksponeringen. Hypotesen om ingen forskel mellem cmp og placebo eksponering vil blive testet ved at sammenligne de to grupper med hensyn til forskellene mellem den første og den anden måling. En Wilcoxon Rank sum test bruges til at sammenligne de to grupper. På lignende måde vil vi teste hypotesen om 'ingen effekt af læring'.