Impacto do Tratamento Periodontal nos Níveis Séricos de Hepcidina e Hemoglobina

Realizou um estudo de intervenção não randomizado de abril a outubro de 2013, com indivíduos nas clínicas de periodontia da Universidade Federal do Maranhão, São Luís, Brasil. A amostra foi selecionada de um total de 125 indivíduos, de acordo com os critérios de elegibilidade. Dois grupos foram formados: grupo experimental (33 indivíduos) pacientes saudáveis, exceto pela presença de periodontite crônica em estágio avançado, e grupo controle (30 indivíduos) pacientes sem doença sistêmica comprovada por exame físico e bioquímico e sem periodontite crônica.

O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa com Seres Humanos da Universidade Federal do Maranhão, São Luís, MA, Brasil sob o protocolo número 23115-010215/2011-16. Todos os participantes assinaram o termo de consentimento.

O tamanho da amostra foi definido com base em estudos anteriores sobre a associação entre periodontite crônica e marcadores inflamatórios sistêmicos.

Todos os participantes receberam um kit de higiene bucal, assistiram a uma palestra motivacional com orientações sobre escovação e uso do fio dental e, posteriormente, foram encaminhados para atendimento odontológico.

Na primeira visita, foi verificado o prontuário para seleção de voluntários sem doenças sistêmicas pré-diagnosticadas, além de exame clínico geral e periodontal, entrega do coletor de urina e ingestão de medicamentos [Albendazol 400 mg em dose única]. Após 15 dias, os indivíduos que atenderam aos critérios iniciais de seleção foram encaminhados para coleta de sangue e urina para avaliação de marcadores bioquímicos. De acordo com os resultados dos exames laboratoriais, os sujeitos foram mantidos ou excluídos após verificação daqueles diagnosticados com doenças sistêmicas não identificadas anteriormente.

A anamnese e o exame periodontal foram realizados por um único examinador treinado. Foram coletados os antecedentes médico e odontológico atual e pregresso, antecedentes familiares, dados sociais, medicamentos, possíveis alterações do fluxo menstrual, aferição da pressão arterial, peso, altura, e índice de massa corporal.

O exame clínico bucal também foi realizado para diagnosticar o estado periodontal dos participantes. Em seguida, foram encaminhados para atendimento odontológico, de acordo com suas necessidades de tratamento.

Após a terapia utilizada, novo exame clínico da saúde bucal de todos os participantes foi realizado 90 dias após o tratamento. No mesmo período, nova coleta de sangue foi realizada para reavaliação dos marcadores bioquímicos.

O exame clínico periodontal utilizou sonda periodontal tipo Williams em seis sítios por dente (mésio-vestibular, médio-vestibular, it-vestibular, disto-lingual, médio-lingual, mésio-lingual), realizado por um único observador, cirurgião-dentista, especialista em periodontia e previamente treinado . O coeficiente de concordância intraexaminador foi de 0,81 para profundidade de sondagem e 0,77 para nível clínico de inserção. Os seguintes parâmetros clínicos foram avaliados: profundidade de sondagem (PD), recessão gengival (GR), nível de inserção clínica (CAL), índice de placa visível (VPI), sangramento à sondagem (BOP). Este mesmo exame inicial foi repetido 90 dias após o exame inicial e incluiu os mesmos parâmetros clínicos periodontais.

Indivíduos que apresentavam pelo menos dois dentes com profundidade de sondagem ≥ 5 mm e nível clínico de inserção ≥ 6 mm, associados à presença de sangramento à sondagem, no mesmo local, 30 segundos após a primeira inserção da sonda, foram diagnosticados com periodontite.

Amostras de sangue (20ml) foram coletadas em tubos de ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) após 12 horas de jejum. O restante do sangue anticoagulado com EDTA foi centrifugado por 10 minutos a 3000 rpm para separar o plasma, aliquotado e armazenado a -70 até análise posterior das concentrações de IL-6.

Foram realizados os seguintes exames laboratoriais: colesterol total, glicemia de jejum, triglicérides, albumina, glutamato oxalato transaminase, creatinina, ácido úrico, velocidade de hemossedimentação (VHS), PCR, IL-6, hepcidina, ferro sérico, ferritina, saturação de transferrina, sangue parâmetros (hemoglobina, hematócrito, volume corpuscular médio - MCV, MCH) e urinálise para elementos anormais e sedimento (EAS).

O soro foi obtido pela adição de sangue venoso em um tubo contendo um ativador de coagulação. Após centrifugação por 15 minutos a 1800 rpm, o soro foi separado. O soro foi alíquotado para avaliação colorimétrica da ferritina pela técnica de quimioluminescência; ferro sérico e técnica de Ferrozine e índice de saturação de transferrina, técnica modificada de Goodwin. A nefelometria foi utilizada para dosagens de proteína C-reativa e o soro foi armazenado a -70 °C restante para análise da hepcidina.

A IL-6 e a hepcidina foram avaliadas pela técnica de imunoensaio utilizando kit ELISA, de acordo com as instruções do fabricante. As leituras foram feitas pelo leitor automático de microplacas e a absorbância foi lida em um comprimento de onda de 450 nm no espectrofotômetro.

Para análise estatística, os investigadores usaram um software estatístico. Inicialmente, realizou-se análise descritiva por meio de medidas de frequência, média e desvio padrão, mediana e intervalo interquartílico. As variáveis ​​categóricas foram comparadas entre os grupos por meio do teste qui-quadrado. A distribuição normal das variáveis ​​numéricas foi avaliada pelo teste de Shapiro-Wilk. A análise inferencial foi feita para avaliar o impacto do tratamento periodontal nas variáveis ​​hemograma, marcadores inflamatórios, ferro e parâmetros periodontais, utilizou-se o teste t de Student pareado ou o teste de Wilcoxon, e comparando-se o delta absoluto correspondente entre os grupos utilizando o teste de Mann-Whitney teste. O nível de significância adotado foi de 5%.