Vliv parodontologické léčby na sérové ​​hladiny hepcidinu a hemoglobinu

Od dubna do října 2013 provedla nerandomizovanou intervenční studii s jednotlivci na parodontologických klinikách Federální univerzity státu Maranhão, São Luís, Brazílie. Vzorek byl vybrán z celkem 125 jedinců podle kritérií způsobilosti. Byly vytvořeny dvě skupiny: experimentální skupina (33 jedinců) zdraví pacienti kromě přítomnosti chronické parodontitidy v pokročilém stadiu a kontrolní skupina (30 osob) pacienti bez systémového onemocnění prokázaného fyzikálním a biochemickým vyšetřením a bez chronické parodontitidy.

Studii schválila Etická komise pro lidský výzkum Federální univerzity v Maranhão, São Luís, MA, Brazílie pod číslem protokolu 23115-010215 / 2011-16. Všichni účastníci podepsali formulář souhlasu.

Velikost vzorku byla definována na základě předchozích studií o spojení mezi chronickou parodontitidou a systémovými zánětlivými markery.

Všichni účastníci obdrželi sadu ústní hygieny, zúčastnili se motivačního projevu s pokyny k čištění zubů a používání zubní nitě a později byli odesláni do péče o chrup.

Při první návštěvě byla provedena kontrola zdravotní dokumentace u vybraných dobrovolníků bez předem diagnostikovaných systémových onemocnění, dále celkové a parodontologické klinické vyšetření, dodání sběrače moči a příjem léků [Albendazol 400 mg jednorázově]. Po 15 dnech byli jedinci, kteří splnili počáteční kritéria výběru, odesláni na odběr krve a moči k vyhodnocení biochemických markerů. Podle výsledků laboratorních testů byly subjekty ponechány nebo vyloučeny po ověření těch, u kterých byla diagnostikována systémová onemocnění, která nebyla dříve identifikována.

Anamnézu a periodontální vyšetření prováděl jeden vyškolený vyšetřující lékař. Byla shromážděna aktuální i minulá lékařská a zubní anamnéza, rodinná anamnéza, sociální údaje, léky, možné změny menstruačního proudu, měření krevního tlaku, hmotnosti, výšky, a index tělesné hmotnosti.

Ústní klinické vyšetření bylo také provedeno k diagnostice parodontálního stavu účastníků. Poté byli posláni do péče o chrup, podle jejich léčebných potřeb.

Po použité terapii bylo 90 dní po léčbě provedeno nové klinické vyšetření orálního zdraví všech účastníků. Ve stejném období byl proveden nový odběr krve na přehodnocení biochemických markerů.

Při periodontálním klinickém vyšetření byla použita parodontální sonda typu Williams v šesti místech na zub (meziobukální, mid-bukální, it-vestibulární, distolingvální, středně-lingvální, mesiolingvální), prováděná jediným pozorovatelem, zubním chirurgem, specialistou na parodontologii a dříve vyškoleným . Koeficient shody mezi vyšetřovatelem byl 0,81 pro hloubku sondování a 0,77 pro úroveň klinického připojení. Byly hodnoceny následující klinické parametry: hloubka sondy (PD), gingivální recese (GR), úroveň klinického připojení (CAL), index viditelného plaku (VPI), krvácení při sondování (BOP). Toto stejné vyšetření na začátku bylo opakováno 90 dnů po počátečním vyšetření a zahrnovalo stejné klinické periodontální parametry.

Jedinci, kteří měli alespoň dva zuby s hloubkou sondy ≥ 5 mm a úrovní klinického uchycení ≥ 6 mm, spojenou s přítomností krvácení při sondování, na stejném místě, 30 sekund po první zaváděcí sondě, byli diagnostikováni s parodontitidou.

Vzorky krve (20 ml) byly odebírány do zkumavek s kyselinou ethylendiamintetraoctovou (EDTA) po 12 hodinách hladovění. Zbytek EDTA-antikoagulované krve byl centrifugován po dobu 10 minut při 3000 ot./min, aby se oddělila plazma, rozdělen na alikvoty a skladován při -70 °C do další analýzy koncentrací IL-6.

Byly provedeny následující laboratorní testy: celkový cholesterol, glukóza nalačno, triglyceridy, albumin, glutamát oxalát transamináza, kreatinin, kyselina močová, rychlost sedimentace erytrocytů (ESR), CRP, IL-6, hepcidin, sérové ​​železo, feritin, saturace transferinu, krev parametry (hemoglobin, hematokrit, střední korpuskulární objem - MCV, MCH) a analýza moči na abnormální elementy a sediment (EAS).

Sérum bylo získáno přidáním venózní krve do zkumavky obsahující aktivátor koagulace. Po centrifugaci po dobu 15 minut při 1800 otáčkách za minutu bylo sérum odděleno. Sérum bylo rozděleno do alikvotů pro kolorimetrické vyhodnocení feritinu chemiluminiscenční technikou; sérové ​​železo a Ferrozinová technika a index saturace transferinu, Goodwinova modifikovaná technika. Nefelometrické bylo použito pro C-reaktivní protein dávek a sérum bylo skladováno při -70 °C zbývající pro analýzu hepcidinu.

IL-6 a hepcidin byly hodnoceny technikou imunotestu s použitím soupravy ELISA podle pokynů výrobce. Odečet byl proveden automatickou čtečkou mikrodestiček a absorbance byla odečtena při vlnové délce 450 nm ve spektrofotometru.

Pro statistickou analýzu vyšetřovatelé použili statistický software. Nejprve byla provedena deskriptivní analýza prostřednictvím frekvenčních měření, střední a standardní odchylky, mediánu a mezikvartilového rozsahu. Kategorické proměnné byly porovnány mezi skupinami pomocí chí-kvadrát testu. Normální rozdělení numerických proměnných bylo hodnoceno Shapiro-Wilkovým testem. Inferenční analýza byla provedena za účelem posouzení dopadu periodontální léčby na proměnné krevního obrazu, zánětlivé markery, železo a periodontální parametry, použila se párový Studentův t test nebo Wilcoxonův test a porovnala se odpovídající absolutní delta mezi skupinami pomocí Mann-Whitneyho test. Hladina významnosti byla stanovena na 5 %.