Влияние пародонтологического лечения на уровни гепсидина и гемоглобина в сыворотке крови

С апреля по октябрь 2013 года было проведено нерандомизированное интервенционное исследование с участием пациентов в клиниках пародонтологии Федерального университета штата Мараньян, Сан-Луис, Бразилия. Выборка была отобрана из 125 человек в соответствии с критериями приемлемости. Были сформированы две группы: экспериментальная группа (33 человека) здоровые пациенты, за исключением наличия хронического пародонтита в запущенной стадии, и контрольная группа (30 человек) больные без системного заболевания, подтвержденного физикально-биохимическим исследованием, и без хронического пародонтита.

Исследование было одобрено Комитетом по этике исследований человека Федерального университета Мараньян, Сан-Луис, Массачусетс, Бразилия в соответствии с протоколом № 23115-010215/2011-16. Все участники подписали форму согласия.

Размер выборки был определен на основе предыдущих исследований связи между хроническим пародонтитом и маркерами системного воспаления.

Все участники получили набор для гигиены полости рта, посетили мотивационную речь с инструкциями по чистке зубов щеткой и зубной нитью, а позже их направили на стоматологическую помощь.

При первом посещении была проверена медицинская карта для отбора добровольцев без предварительно диагностированных системных заболеваний, дополнительно проведены общий и пародонтологический клинический осмотр, доставлен сборщик мочи, прием препаратов [альбендазол 400 мг однократно]. Через 15 дней субъектов, отвечающих первоначальным критериям отбора, отправляли на сбор крови и мочи для оценки биохимических маркеров. По результатам лабораторных исследований испытуемые сохранялись или исключались после верификации лиц с диагнозом системных заболеваний, ранее не выявленных.

Анамнез и пародонтологическое обследование проводились одним обученным врачом. Были собраны текущий и прошлый медицинский и стоматологический анамнез, семейный анамнез, социальные данные, лекарства, возможные изменения менструального цикла, измерение артериального давления, веса, роста, и индекс массы тела.

Также было проведено клиническое обследование полости рта для диагностики состояния пародонта участников. Затем они были направлены на стоматологическую помощь в соответствии с их потребностями в лечении.

После использованной терапии через 90 дней после лечения было проведено новое клиническое обследование состояния полости рта всех участников. В этот же период выполнен забор новой крови для переоценки биохимических маркеров.

Клиническое пародонтологическое обследование с использованием пародонтального зонда типа Вильямса в шести точках на зуб (мезиощечной, среднещечной, ит-вестибулярной, дистальноязычной, среднеязычной, мезиолингвальной), проводимое одним наблюдателем, хирургом-стоматологом, специалистом по пародонтологии и предварительно обученным . Коэффициент согласованности между исследователями составил 0,81 для глубины зондирования и 0,77 для уровня клинической фиксации. Оценивались следующие клинические параметры: глубина зондирования (PD), рецессия десны (GR), уровень клинического прикрепления (CAL), индекс видимого налета (VPI), кровоточивость при зондировании (BOP). Это же исходное обследование было повторено через 90 дней после первоначального обследования и включало те же клинические пародонтальные параметры.

У лиц, имевших не менее двух зубов с глубиной зондирования ≥ 5 мм и уровнем клинического прикрепления ≥ 6 мм, связанным с наличием кровотечения при зондировании, в одном и том же месте через 30 секунд после первого введения зонда диагностировали пародонтит.

Образцы крови (20 мл) собирали в пробирки с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) через 12 часов натощак. Остаток крови с антикоагулянтом ЭДТА центрифугировали в течение 10 минут при 3000 об/мин для отделения плазмы, делили на аликвоты и хранили при -70 до дальнейшего анализа концентраций IL-6.

Были проведены следующие лабораторные исследования: общий холестерин, глюкоза натощак, триглицериды, альбумин, глутаматоксалаттрансаминаза, креатинин, мочевая кислота, скорость оседания эритроцитов (СОЭ), СРБ, ИЛ-6, гепсидин, сывороточное железо, ферритин, насыщение трансферрина, кровь. параметры (гемоглобин, гематокрит, средний объем эритроцитов - MCV, MCH) и анализ мочи на аномальные элементы и осадок (EAS).

Сыворотку получали добавлением венозной крови в пробирку с активатором свертывания крови. После центрифугирования в течение 15 минут при 1800 об/мин отделяли сыворотку. Сыворотку отбирали на аликвоты для колориметрической оценки ферритина методом хемилюминесценции; сывороточного железа и феррозина и индекса насыщения трансферрина по модифицированной методике Гудвина. Нефелометрический анализ использовали для дозировок С-реактивного белка, а сыворотку хранили при -70°С, оставаясь для анализа на гепсидин.

IL-6 и гепсидин оценивали методом иммуноанализа с использованием набора ELISA согласно инструкции производителя. Показания были сделаны автоматическим считывателем микропланшетов, и поглощение было считано при длине волны 450 нм в спектрофотометре.

Для статистического анализа исследователи использовали статистическое программное обеспечение. Первоначально проводился описательный анализ с использованием показателей частоты, среднего и стандартного отклонения, медианы и межквартильного диапазона. Категориальные переменные сравнивались между группами с использованием критерия хи-квадрат. Нормальное распределение числовых переменных оценивали по критерию Шапиро-Уилка. Был проведен логический анализ для оценки влияния пародонтологического лечения на переменные анализа крови, маркеры воспаления, железо и пародонтальные параметры с использованием парного t-критерия Стьюдента или критерия Уилкоксона и сравнения соответствующей абсолютной дельты между группами с использованием критерия Манна-Уитни. тест. Уровень значимости был установлен на уровне 5%.