Caracterização do Padrão de Metilação em Células Germinativas Humanas de Pacientes Submetidos a Tratamento com ICSI

Embora mais de cinco milhões de crianças tenham sido concebidas em todo o mundo por meio de Técnicas de Reprodução Assistida (ARTs), pouco se sabe sobre os efeitos potenciais da ART na vida adulta. Até agora, o foco da pesquisa reprodutiva é baseado na taxa de sucesso do tratamento de infertilidade. Há evidências crescentes de que a exposição a substâncias ambientais, a idade do paciente ou as condições de cultura in vitro no início do desenvolvimento estão associadas a um risco aumentado ao longo da vida de doenças metabólicas e outras doenças comuns. Esses riscos aumentados de doenças provavelmente se devem a mudanças epigenéticas induzidas pelo ambiente, levando à desregulação de genes e cascatas de sinalização. Estes incluem a síndrome de Beckwith-Wiedemann e Angelman.

A modificação epigenética mais bem estudada neste contexto é a metilação do DNA, que regula a expressão gênica de maneira temporal e altamente coordenada. Estudos preliminares já mostraram que o aumento da idade do pai influencia o padrão de metilação no esperma e no sangue do cordão umbilical de crianças. Além disso, a injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) também deixa assinaturas epigenéticas no sangue do cordão umbilical. Ao contrário do esperma, pouco se sabe sobre a metilação dos ovócitos humanos e sua suscetibilidade a fatores ambientais. A principal razão para isso é a dificuldade de coletar oócitos humanos em número suficiente para análise de todo o genoma. O objetivo deste estudo é analisar o padrão de metilação de oócitos imaturos, que não são adequados para posterior tratamento com ICSI, de mulheres com fertilidade diminuída. Os produtos da expressão gênica e também a metilação do próprio DNA podem ser investigados usando métodos de sequenciamento de DNA recentemente desenvolvidos. Com base nos resultados de um grande número de oócitos de diferentes mulheres, é possível avaliar o risco de fatores individuais, como a idade da paciente, bem como correlações entre a ocorrência de alterações na expressão gênica e o desejo não realizado de ter filhos. Além disso, os padrões de metilação em espermatozoides de 20 pacientes serão examinados como referência.