Imunidade inata treinada induzida por desafio com alto teor de gordura (Estudo SHAKE)

Justificativa: A aterosclerose é caracterizada por uma inflamação persistente da parede arterial.

Os macrófagos derivados de monócitos são as células imunes mais abundantes nas placas ateroscleróticas. Foi recentemente demonstrado que não apenas as células imunes do sistema imune adaptativo, mas também as células imunes inatas são capazes de adotar um fenótipo pró-inflamatório de longo prazo mediante estimulação. Essa memória inespecífica das células imunes inatas é mediada pela reprogramação epigenética e metabólica e é chamada de "imunidade inata treinada". Descobertas anteriores de nosso laboratório mostraram que não apenas componentes bacterianos, como LPS, mas também partículas pró-aterogênicas, como LDL oxidado, podem induzir imunidade treinada em monócitos. Curiosamente, esse efeito de memória da imunidade treinada indica que mesmo gatilhos temporários podem induzir a inflamação persistente na aterosclerose.

As lipoproteínas ricas em triglicerídeos (TRL) foram identificadas como um importante fator de risco independente para aterosclerose. Além disso, níveis plasmáticos elevados dessas lipoproteínas estão associados a marcadores pró-inflamatórios aumentados. Os TRLs, no entanto, são caracterizados por níveis plasmáticos alternados, com breves elevações após refeições (contendo gordura). Notavelmente, uma refeição rica em gordura não apenas contribui para o aumento transitório dos níveis plasmáticos de TRL, mas também induz uma breve elevação nos níveis de LPS por aumentar brevemente a permeabilidade do intestino.

Nosso objetivo agora é investigar se uma única refeição rica em gordura pode induzir imunidade inata treinada, uma vez que esse conceito pode explicar como breves efeitos pós-prandiais podem se traduzir em um fenótipo de monócitos pró-inflamatório e pró-aterogênico de longo prazo.

Objetivo: O objetivo principal é determinar se uma refeição rica em gordura pode induzir um fenótipo de monócito pró-inflamatório persistente, caracterizado por um aumento da capacidade de produção de citocinas após estimulação ex vivo. Os objetivos secundários são a reprogramação metabólica e epigenética dos monócitos nesses momentos, bem como a capacidade do soro, isolado antes e 1-6h após uma carga oral de gordura, para induzir um aumento na produção de citocinas em monócitos humanos saudáveis.

Desenho do estudo: Estudo de intervenção randomizado cruzado com alto teor de gordura.

População do estudo: Voluntários humanos saudáveis, com idade entre 18 e 40 anos.

Intervenção: Um único desafio com alto teor de gordura (milkshake contendo 95g de gordura) e um shake 'controle' (comparável a um café da manhã médio).

Principais parâmetros/pontos finais do estudo: O sangue será coletado em t=0h (antes) e em t=1h, t=2h, t=4h, t=6h, t=24 e t=72h após uma carga oral de gordura e no mesmos pontos de tempo após uma agitação de 'controle'. O endpoint primário é a produção de monócitos TNFα após estimulação ex vivo com LPS no ponto de tempo de 72h. Pontos finais secundários adicionais são a produção de outras citocinas e quimiocinas após estimulação ex vivo em t=0h, t=4h, t=24h e t=72h, o fenótipo inflamatório dos monócitos conforme avaliado por análise de citometria de fluxo e capacidade de produção de citocina persistente induzida por soro.