Wytrenowana odporność wrodzona wywołana wyzwaniem wysokotłuszczowym (badanie SHAKE)

Uzasadnienie: Miażdżyca charakteryzuje się utrzymującym się stanem zapalnym ściany tętnicy.

Makrofagi pochodzące z monocytów są najbardziej licznymi komórkami odpornościowymi w blaszkach miażdżycowych. Niedawno wykazano, że nie tylko komórki układu odporności nabytej, ale także komórki odporności wrodzonej są zdolne do przyjęcia długotrwałego fenotypu prozapalnego po stymulacji. Ta niespecyficzna pamięć wrodzonych komórek odpornościowych odbywa się za pośrednictwem przeprogramowania epigenetycznego i metabolicznego i jest określana jako „wytrenowana odporność wrodzona”. Wcześniejsze odkrycia z naszego laboratorium wykazały, że nie tylko składniki bakteryjne, takie jak LPS, ale także cząsteczki proaterogenne, takie jak utleniony LDL, mogą indukować wytrenowaną odporność monocytów. Co ciekawe, ten efekt pamięciowy wytrenowanej odporności wskazuje, że nawet tymczasowe wyzwalacze mogą indukować uporczywe zapalenie w miażdżycy.

Lipoproteiny bogate w triglicerydy (TRL) zostały zidentyfikowane jako ważny niezależny czynnik ryzyka miażdżycy. Ponadto podwyższone poziomy tych lipoprotein w osoczu są związane ze zwiększonymi markerami prozapalnymi. TRL charakteryzują się jednak naprzemiennymi poziomami w osoczu, z krótkimi podwyższeniami po posiłkach (zawierających tłuszcz). Warto zauważyć, że wysokotłuszczowy posiłek nie tylko przyczynia się do przejściowego wzrostu poziomu TRL w osoczu, ale także indukuje krótkotrwały wzrost poziomu LPS poprzez krótkotrwałe zwiększenie przepuszczalności jelit.

Naszym celem jest teraz zbadanie, czy pojedynczy wysokotłuszczowy posiłek może wywoływać wytrenowaną wrodzoną odporność, ponieważ ta koncepcja może wyjaśniać, w jaki sposób krótkie efekty poposiłkowe mogą przekładać się na długotrwały prozapalny i pro-miażdżycowy fenotyp monocytów.

Cel: Głównym celem jest ustalenie, czy wysokotłuszczowy posiłek może indukować trwały prozapalny fenotyp monocytów, charakteryzujący się zwiększoną zdolnością do produkcji cytokin po stymulacji ex vivo. Drugorzędnymi celami są metaboliczne i epigenetyczne przeprogramowanie monocytów w tych punktach czasowych, jak również zdolność surowicy, wyizolowanej przed i 1-6 godzin po doustnym obciążeniu tłuszczem, do indukowania zwiększonej produkcji cytokin w zdrowych ludzkich monocytach.

Projekt badania: Randomizowane, krzyżowe badanie interwencyjne z prowokacją wysokotłuszczową.

Badana populacja: zdrowi ochotnicy w wieku od 18 do 40 lat.

Interwencja: Pojedyncze wyzwanie wysokotłuszczowe (koktajl mleczny zawierający 95 g tłuszczu) i koktajl „kontrolny” (porównywalny do przeciętnego śniadania).

Główne parametry badania/punkty końcowe: Krew zostanie pobrana w t=0h (przed) oraz w t=1h, t=2h, t=4h, t=6h, t=24 i t=72h po obciążeniu ustnym tłuszczem i w w tych samych punktach czasowych po wstrząsaniu „kontrolnym”. Pierwszorzędowym punktem końcowym jest wytwarzanie monocytów TNFα po stymulacji ex vivo LPS w 72-godzinnym punkcie czasowym. Dodatkowymi drugorzędowymi punktami końcowymi są wytwarzanie innych cytokin i chemokin po stymulacji ex vivo w t=0h, t=4h, t=24h i t=72h, fenotyp zapalny monocytów oceniany za pomocą analizy cytometrii przepływowej i indukowana przez surowicę trwała zdolność wytwarzania cytokin.