Impacto da intensidade do exercício no condicionamento físico, nas vesículas extracelulares, na inflamação e no metabolismo (CEX)

Este estudo está sendo realizado pelo Laboratório de Metabolismo e Inflamação do Exercício do campus da Universidade da Colúmbia Britânica em Kelowna, Colúmbia Britânica. Os participantes que atenderem aos critérios de inclusão preencherão primeiro um formulário de consentimento informado. Os participantes também preencherão formulários para determinar seu nível de atividade. As mulheres também preencherão um questionário sobre o ciclo menstrual - mas não serão obrigadas a começar em um determinado dia do ciclo. Os participantes terão seus dados antropométricos registrados (altura, peso, composição corporal), fornecerão uma amostra de sangue em jejum e serão submetidos a um teste de exercício máximo para determinar seu limiar de lactato e seu consumo máximo de oxigênio (VO2pico).

O exame de sangue será usado para medir vários marcadores. Primeiro, o sangue total será analisado em um analisador hematológico padrão para determinar a contagem de glóbulos brancos, contagem de glóbulos vermelhos, hemoglobina e plaquetas. Em segundo lugar, as amostras de sangue serão transformadas em plasma pobre em plaquetas e armazenadas para análise em lote. A análise do plasma incluirá a medição de citocinas plasmáticas: interleucina (IL) -6, IL-10, agonista do receptor de IL-1, fator de necrose tumoral alfa (TNF-alfa) e vesículas extracelulares plasmáticas. Vesículas extracelulares (EVs) serão isoladas usando cromatografia de exclusão de tamanho (SEC) e medidas quanto ao tamanho e concentração usando detecção de pulso resistiva ajustável (Izon Exoid, Izon USA). O fenótipo e a origem do EV serão determinados por citometria de nanofluxo (CytoFlex S, Beckman Coulter, EUA). O microácido ribonucleico EV (miRNA) será determinado pela extração de miRNA de EVs isolados e concentrados (centrifugação em alta velocidade de 25.000 x g por 1 hora a 20 graus Celsius). O miRNA extraído será medido por PCR (BioRad, EUA).

O exercício máximo ocorrerá em cicloergômetro estacionário (Lode Excalibur, Lode, Holanda). O ergômetro é ajustado para ser ideal para cada participante. Os participantes são equipados com um monitor de frequência cardíaca com cinta torácica (Polar, Finlândia) e uma máscara facial para coletar e determinar a quantidade de consumo de O2 e produção de CO2¬. As medidas de lactato serão coletadas do sangue capilar da ponta do dedo e medidas com um analisador de lactato (Nova, EUA) durante os últimos 30 segundos de cada etapa, assim como uma classificação de esforço percebido (PSE). O protocolo envolve permanecer estacionário no ergômetro por 2 minutos. Seguindo as medidas iniciais, os participantes completarão 2 minutos de aquecimento a 50 watts (W) e, em seguida, estágios de 3 minutos em cargas de trabalho consecutivamente mais altas (aumentos de 20 W para mulheres, aumentos de 30 W para homens). Os participantes pedalam de 60 a 80 rotações por minuto (rpm) pelo tempo que puderem. Quando eles caírem abaixo ou não conseguirem manter um mínimo de 50 rpm, o teste será encerrado.

Após o teste, o limiar de lactato determinado como uma combinação ponderada do método log-log e do método Dmax será calculado. A ponderação consiste em 75% do valor log-log e 25% do valor Dmax conforme calculado no pacote R "lactater". Usando seus limiares de lactato, são determinadas prescrições específicas de exercícios.

A randomização do grupo é concluída usando uma proporção de 2:2:1 de treinamento contínuo de intensidade moderada (MICT), treinamento contínuo de intensidade pesada (HICT) e controle (CTRL). Um cálculo de poder usando um alfa de 0,05, poder de 0,8 e um tamanho de efeito médio usando mudanças no VO2pico na literatura sugere que 52 participantes precisarão completar o estudo.

Para o grupo MICT, os participantes pedalarão na resistência associada a 70% da resistência em seu primeiro limiar de lactato (LT1), de modo que se o limiar de lactato ocorresse em 110W, eles pedalariam inicialmente em 77W (0,7 * 110W). No grupo HICT, os participantes pedalarão no delta de 10% do seu limiar de lactato e maior resistência alcançada ao final do teste. Por exemplo, um participante com limiar de lactato de 110W, que chegasse a 260W, pedalaria a 125W (260W - 110W = 150W), (150W * 0,1 = 15W), (15W + 110W= 125W). Cada alocação é correspondente ao gasto energético, de modo que os homens gastarão 350 kcal e as mulheres gastarão 300 kcal.

À medida que o participante avança no teste, ele experimentará um aumento na resistência à medida que se adapta ao protocolo de treinamento. O valor de lactato associado à sua alocação será mantido durante todo o período. Por exemplo, na 2ª semana, se o lactato cair 10% ou mais, a resistência aumentará 10%. O tempo de cada sessão também será modificado com base no valor de VO2 associado ao seu teste de limiar.

Após a última sessão de sua participação, agendaremos o pós-teste para o que normalmente seria a data da próxima sessão. Além disso, todos os pós-testes são concluídos entre 48 e 72 horas após a última sessão. O pós-teste e o pré-teste são de natureza idêntica.