"Imunorregulação na aterosclerose: um estudo de sequenciamento de RNA de célula"
9 de junho de 2025 atualizado por: Carlos Vicente Serrano Junior, Hospital Israelita Albert Einstein
A imunorregulação arquitetônica em doença aterosclerótica: uma abordagem de sequenciamento de RNA de célula única e abordagem de biologia espacial
A aterosclerose é a principal causa de eventos cardiovasculares agudos, como infarto do miocárdio e derrame, e é um fator de risco significativo para a mortalidade cardiovascular.
O entendimento detalhado dos mecanismos imunológicos e transformações celulares envolvidas na patogênese da aterosclerose ainda é limitado, e o uso de sequenciamento de RNA de célula única (SCRNaseq) revelou novas funções celulares e subpopulações associadas à progressão da doença.
Este estudo tem como objetivo identificar subpopulações celulares, vias moleculares e alterações na expressão gênica relacionadas ao desenvolvimento da aterosclerose nas artérias coronárias humanas.
Usando SCRNaseq, o estudo busca caracterizar o cenário transcriptômico das células presentes em placas ateroscleróticas e identificar assinaturas moleculares que revelam predisposições individuais a fenótipos específicos, como suscetibilidade à doença e resposta a terapias.
A pesquisa será realizada no Hospital Albert Einstein Israel em São Paulo e envolverá amostras de artérias coronárias e placas ateroscleróticas dos corações explantados de pacientes submetidos a transplantes cardíacos, bem como de material descartado da cirurgia de vínculo coronário de vínculos (CABG).
Com um tamanho estimado da amostra de 20 a 30 placas, os dados obtidos permitirão uma análise detalhada dos mecanismos moleculares envolvidos na aterosclerose, contribuindo para o desenvolvimento de alvos terapêuticos específicos.
Visão geral do estudo
Status
Ainda não está recrutando
Condições
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
Este é um estudo observacional prospectivo que será conduzido com amostras de artérias coronárias e placas ateroscleróticas do coração explantado de pacientes com cardiomiopatia isquêmica que foram submetidos a transplantes cardíacos, bem como de material descartado da cirurgia de enxerto por meio de artro de coronário.
As amostras de placa aterosclerótica serão recuperadas das artérias coronárias durante a cirurgia de transplante ou o procedimento de CRM e transportado para o laboratório dentro de 2 horas.
As artérias selecionadas serão dissecadas e avaliadas microscopicamente, e as amostras serão fixadas em formalina, incorporadas em parafina e coradas para análise histológica.
O tecido será dissociado enzimaticamente para obter células individuais, que serão filtradas e avaliadas quanto à viabilidade celular.
As células serão submetidas a seqüenciamento de RNA de célula única (SCRNaseq) com o objetivo de analisar cerca de 5.000 a 10.000 células por amostra.
O tamanho da amostra será de 20 a 30 placas, com o objetivo de capturar as principais populações celulares e realizar uma análise robusta.
Tipo de estudo
Observacional
Inscrição (Estimado)
30
Contactos e Locais
Esta seção fornece os detalhes de contato para aqueles que conduzem o estudo e informações sobre onde este estudo está sendo realizado.
Contato de estudo
- Nome: Carlos Vicente Serrano, PhD
- Número de telefone: +55 (11) 2151-5408
- E-mail: carlos.sjunior@einstein.br
Locais de estudo
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SP
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São Paulo, SP, Brasil, 05652-900
- Hospital israelita Albert Einstein
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Critérios de participação
Os pesquisadores procuram pessoas que se encaixem em uma determinada descrição, chamada de critérios de elegibilidade. Alguns exemplos desses critérios são a condição geral de saúde de uma pessoa ou tratamentos anteriores.
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
- Adulto
- Adulto mais velho
Aceita Voluntários Saudáveis
Não
Método de amostragem
Amostra de Probabilidade
População do estudo
Pacientes diagnosticados com cardiomiopatia isquêmica devido à aterosclerose avançada, em transplante cardíaco.
Descrição
Critérios de inclusão:
- Pacientes diagnosticados com cardiomiopatia isquêmica devido à aterosclerose avançada, em transplante cardíaco;
- Pacientes com doença arterial coronariana submetida à cirurgia de enxerto de desvio de artéria coronariana (CRM). "
- Com idades entre 40 e 75 anos;
- Formulário de consentimento informado assinado.
Critérios de exclusão:
- Pacientes com doenças inflamatórias ou autoimunes sistêmicas;
- História do câncer nos últimos 5 anos ou malignidade ativa;
- Uso recente (nos últimos 6 meses) da terapia imunossupressora.
Plano de estudo
Esta seção fornece detalhes do plano de estudo, incluindo como o estudo é projetado e o que o estudo está medindo.
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
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Placas coronárias do coração explantado
As artérias selecionadas serão dissecadas e avaliadas microscopicamente, e as amostras serão fixadas em formalina, incorporadas em parafina e coradas para análise histológica.
O tecido será dissociado enzimaticamente para obter células individuais, que serão filtradas e avaliadas quanto à viabilidade celular.
As células serão submetidas a seqüenciamento de RNA de célula única (SCRNaseq) com o objetivo de analisar cerca de 5.000 a 10.000 células por amostra.
O tamanho da amostra será de 20 a 30 placas, com o objetivo de capturar as principais populações celulares e realizar uma análise robusta.
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Reprocessamento A normalização dos dados, a redução da dimensionalidade e o cluster serão realizados usando o pacote Seurat (com base em R). Os tipos de células serão identificados com base na expressão do gene do marcador canônico. Identificação da subpopulação celular Os clusters serão anotados com base em assinaturas de tipos de células conhecidas (por exemplo, células endoteliais, células do músculo liso, macrófagos, etc.). A análise diferencial da expressão gênica será realizada para identificar genes associados à doença. Enriquecimento de caminho e função A análise de enriquecimento do conjunto de genes (GSEA) e análises de via (por exemplo, KEGG, Reactome) serão realizadas para investigar os processos biológicos e as vias que impulsionam a aterosclerose. Controle de qualidade As leituras de sequenciamento serão avaliadas quanto à qualidade usando o FastQC, e as leituras de baixa qualidade serão filtradas. O software Cell Ranger (10X genômica) será usado para alinhar leituras ao genoma humano e quantificar a expressão gênica no nível de célula única. |
O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Concentração de clusters de células específicas e subpopulações de macrófagos / linfocitos: Crie um atlas de célula única de alta resolução de placas ateroscleróticas.
Prazo: Através da conclusão do estudo, uma média de 1 ano e meio.
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Determine a concentração de aglomerados celulares com uma determinação específica de subpopulações inflamatórias para criar um atlas de célula única de alta resolução de placas ateroscleróticas, revelando alterações transcricionais específicas para células associadas à doença.
Os resultados podem identificar novos alvos terapêuticos para intervenção na aterosclerose e aumentar a compreensão de sua patogênese molecular.
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Através da conclusão do estudo, uma média de 1 ano e meio.
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Concentração de interleucinas e subtipos celulares pelo citômetro Fluxo para identificação de assinaturas moleculares na aterosclerose
Prazo: Através da conclusão do estudo, uma média de 1 ano e meio.
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O objetivo secundário é identificar assinaturas moleculares que revelam predisposições individuais a fenótipos específicos, como suscetibilidade à aterosclerose, resposta a terapias e outras características de saúde, estabelecendo as bases para medicina de precisão e estudos de saúde da população no Brasil, determinando concentrações específicas de moléculas pró-inflamatórias e anti-inflamatórias e tipos de células.
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Através da conclusão do estudo, uma média de 1 ano e meio.
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Colaboradores e Investigadores
É aqui que você encontrará pessoas e organizações envolvidas com este estudo.
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Publicações e links úteis
A pessoa responsável por inserir informações sobre o estudo fornece voluntariamente essas publicações. Estes podem ser sobre qualquer coisa relacionada ao estudo.
Publicações Gerais
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- Serrano CV Jr, de Mattos FR, Pitta FG, Nomura CH, de Lemos J, Ramires JAF, Kalil-Filho R. Association between Neutrophil-Lymphocyte and Platelet-Lymphocyte Ratios and Coronary Artery Calcification Score among Asymptomatic Patients: Data from a Cross-Sectional Study. Mediators Inflamm. 2019 Mar 26;2019:6513847. doi: 10.1155/2019/6513847. eCollection 2019.
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Datas de registro do estudo
Essas datas acompanham o progresso do registro do estudo e os envios de resumo dos resultados para ClinicalTrials.gov. Os registros do estudo e os resultados relatados são revisados pela National Library of Medicine (NLM) para garantir que atendam aos padrões específicos de controle de qualidade antes de serem publicados no site público.
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Estimado)
25 de junho de 2025
Conclusão Primária (Estimado)
25 de outubro de 2026
Conclusão do estudo (Estimado)
25 de abril de 2027
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
24 de fevereiro de 2025
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
28 de fevereiro de 2025
Primeira postagem (Real)
6 de março de 2025
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
10 de junho de 2025
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
9 de junho de 2025
Última verificação
1 de junho de 2025
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- AteroImunoHIAE
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
SIM
Descrição do plano IPD
Os dados do SCRNA-Seq e os scripts R utilizados na análise deste estudo estarão disponíveis no autor correspondente, mediante solicitação.
Tipo de informação de suporte de compartilhamento de IPD
- PROTOCOLO DE ESTUDO
- SEIVA
- CSR
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Não
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
Não
produto fabricado e exportado dos EUA
Não
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