Um estudo multicêntrico de coorte e biomarcador para melhorar os pacientes com tuberculose extrapulmonar (mEX-TB)

Antecedentes: De acordo com a Organização Mundial da Saúde (OMS), 10 milhões de pessoas adoeceram com tuberculose (TB) em 2019 e 1,4 milhão de pessoas morreram dessa doença. Entre os agentes infecciosos, Mycobacterium tuberculosis (MTB) continua sendo a principal causa de mortalidade e morbidade em todo o mundo. O controle da doença é cada vez mais complicado devido ao crescente número de infecções com cepas resistentes a vários medicamentos. Na Alemanha, testemunhamos um aumento acentuado de novos casos (7,3 casos por 100.000) em 2015. De 2016 a 2017, a incidência diminuiu, enquanto os números em 2018 (5.429 casos relatados pela TB; 6,5 casos por 100.000) permaneceram quase inalterados. Os migrantes de áreas de alta incidência representam a maioria de todos os pacientes com TB (67,1% em 2019). Embora a TB pulmonar (PTB) seja a manifestação mais comum, qualquer outro órgão pode estar envolvido. A TB extrapulmonar (EPTB) constitui 27,8% (1.321) de todos os casos na Alemanha. Embora a incidência geral de TB esteja diminuindo nos países industrializados, a proporção de EPTB tem aumentado constantemente na Alemanha e em outros países europeus. As razões para isso não são totalmente compreendidas. Um extenso estudo retrospectivo realizado na China mostrou uma proporção significativamente maior de TB resistente a vários medicamentos entre pacientes com EPTB do que entre pacientes com PTB. Isso destaca claramente a necessidade de medidas aprimoradas de controle EPTB, a fim de evitar o desenvolvimento da resistência a medicamentos e atingir o objetivo de erradicação da TB em nível nacional e internacional (por exemplo. OMS-TB-Strategy), que é ainda mais desafiado pela pandemia SARS-CoV-2. O projeto MEX-TB se concentra no EPTB com o principal objetivo de otimizar o gerenciamento clínico de pacientes com EPTB. Uma coorte clínica prospectiva do EPTB será estabelecida, envolvendo vários pesquisadores e locais clínicos (Frankfurt, Heidelberg, Borstel, Hamburgo, Bonn, Colônia), que nos permitirá realizar estudos clínicos e translacionais detalhados que abordam esta entidade da doença.

Descrição:

A população do estudo, o desenho da pesquisa e os métodos de pesquisa em pacientes adultos recentemente diagnosticados com EPTB (n = 150) serão prospectivamente inscritos no estudo. Os pacientes com PTB (n = 30) também serão incluídos e servirão como um grupo controle para testar a viabilidade técnica. Além disso, um grupo de controle saudável (n = 30) será adicionado, principalmente para abordar o objetivo 1. Os dados clínicos serão coletados usando questionários padronizados durante todo o período de tratamento para cada indivíduo.

Além disso, os fluidos corporais (sangue, urina) serão coletados e armazenados em um biobank central (Colônia). No entanto, nem todos os centros contribuintes serão capazes de fornecer células mononucleares do sangue periférico de alta qualidade (PBMCs) para armazenamento. Para não perder pacientes com coleções de amostras incompletas, o estudo de coorte terá vários estratos:

1. Pacientes com EPTB (n = 100) com dados clínicos (por exemplo, Ganho de peso, resultados de imagem etc.) e uma coleção completa de amostras de bio (parâmetros de laboratório de rotina, células mononucleares do sangue periférico (PBMCs), tubos de RNA/DNA de paxgene para assinaturas de genes, contagem de células CD4/CD8 absoluta e relativa, vitamina D (25 (OH) d), urina, plasma)
2. Pacientes com EPTB (n = 50) com dados clínicos (por exemplo Ganho de peso, resultados de imagem, resultados de microbiologia etc.) mais/menos uma coleção parcial de amostras de biografia (por exemplo Resultados do laboratório de rotina, vitamina D (25 (OH) D), Paxgene, Plasma)
3. Controles saudáveis ​​(n = 30) e uma coleção completa de amostras de biografia, conforme descrito para o estrato 1 em um ponto de tempo.

Coleta de dados pseudonimizados dados clínicos e laboratoriais serão registrados nos seguintes momentos: iniciação de diagnóstico/ tratamento (dia 0/ +/- 7 dias); 4 semanas após o início do tratamento (+/- 7 dias); 3 meses após o início do tratamento (+/- 7 dias); 6 meses após o início do tratamento (+/- 7 dias); 3 meses após o final do tratamento (+/- 7 dias). Em pacientes que necessitam de tratamento de mais de 6 meses (ou seja, TB resistente a vários medicamentos, TB disseminada etc.) Os dados serão coletados regularmente até o final do tratamento. A pseudonimização dos dados do paciente e a aquisição de biomateriais é realizada através de um gerador de identificação de pacientes. Um formulário de relato de caso em papel (CRF) será usado para coletar dados do paciente. Os dados do CRF serão transferidos para um banco de dados eletrônico.

Resultado:

Os biomarcadores baseados em laboratório para avaliar respostas de tratamento semelhantes à conversão de escarro usados ​​para PTB não estão disponíveis na maioria dos casos de EPTB. Marcadores de inflamação inespecíficos, como a proteína C reativa (PCR), podem ser utilizados para avaliar a resposta precoce do tratamento. Avaliaremos sistematicamente e longitudinalmente parâmetros radiológicos (tamanho da lesão na TC, ultrassonografia ou ressonância magnética), achados de laboratório e sinais clínicos (por exemplo, Ganho de peso, menos dor, ausência de febre etc.). Em seguida, exploraremos os algoritmos de resposta avaliados especificamente para pacientes com EPTB iniciando o tratamento anti-TB. Uma combinação de três parâmetros clínicos será usada 1) Melhoria nos sintomas relatados 2) Ganho de peso (qualquer ganho de peso ou ≥ 5% de ganho de peso) 3) Regressão do inchaço linfonodal, derrame pleural ou peritoneal ou outros achados locais, durante e após o tratamento. Uma combinação desses parâmetros prevê um resultado favorável ou desfavorável no início do processo de tratamento.

Mira:

Nosso objetivo é avaliar a resposta do tratamento usando esses parâmetros, suportados por dois clínicos e especialistas independentes no campo (revisão cega). Os dados serão correlacionados com as descobertas de biomarcadores baseadas em sangue descritas abaixo. Os principais objetivos deste estudo são o desenvolvimento de biomarcadores específicos do EPTB para melhorar o diagnóstico EPTB e a avaliação das respostas ao tratamento, correlacionando parâmetros imunológicos e sanguíneos e assinaturas com características clínicas na linha de base e longitudinalmente. Para esse fim, nosso estudo de biomarcadores se concentrará em dois objetivos principais:

OBJETIO DO ESTUDO I: Avaliação de biomarcadores sanguíneos como ferramentas de diagnóstico para o escarro EPTB ou diagnóstico laboratorial baseado em fluidos pulmonar, conforme realizado com PTB, na maioria dos casos de EPTB. São necessários biomarcadores à base de sangue.

• Focaremos em duas abordagens: 1) assinaturas de expressão de genes derivados do sangue associados à tuberculose; 2) Ensaios baseados em células T (p. Ensaio tam-tb).
• Para esse objetivo, primeiro investigaremos marcadores que já foram analisados ​​em pacientes com PTB. Também poderemos investigar marcadores específicos do EPTB de maneira imparcial, se necessário.

Estudo Objetivo II: Avaliação de biomarcadores sanguíneos Prevendo a resposta ou falha do tratamento e cura no EPTB

• A previsão da cura ou o risco de falha no tratamento é crucial para o gerenciamento do EPTB. Várias definições de resultado para PTB são baseadas em resultados de cultura e mancha que não são aplicáveis ​​no EPTB. Nosso objetivo é correlacionar os biomarcadores sanguíneos com a resposta do tratamento que avaliaremos com parâmetros clínicos bem definidos.
• Para esse objetivo, continuaremos com nossa avaliação do plasma IP-10 como um marcador de resposta ao tratamento simples e econômico. Marcadores adicionais baseados em plasma foram descritos em nossa proposta. Marcadores/assinaturas mais complexos (expressão gênica via RNA-seq e resposta de células T baseadas em resposta de células T) serão aplicadas usando abordagens técnicas semelhantes às exploradas no objetivo 1. Focaremos principalmente em assinaturas que já foram avaliadas para o PTB. O objetivo abrangente desta coorte multicêntrica única de pacientes com EPTB é o desenvolvimento.