Uno studio multicentrico di coorte e biomarcatori per una migliore cura dei pazienti con tubercolosi extrapolmonare (mEX-TB)

Contesto: secondo l'Organizzazione mondiale della sanità (OMS), 10 milioni di persone si sono ammalate di tubercolosi (TB) nel 2019 e 1,4 milioni di persone sono morte per questa malattia. Tra gli agenti infettivi, Mycobacterium tuberculosis (MTB) rimane la principale causa di mortalità e morbilità in tutto il mondo. Il controllo della malattia è sempre più complicato a causa del crescente numero di infezioni con ceppi resistenti a più farmaci. In Germania, abbiamo assistito a un forte aumento di nuovi casi (7,3 casi per 100.000) nel 2015. Dal 2016 al 2017 l'incidenza è diminuita, mentre i numeri nel 2018 (5.429 sono stati riportati casi di tubercolosi; 6,5 casi per 100.000) mantenuti quasi invariati. I migranti provenienti da aree ad alta incidenza rappresentano la maggior parte di tutti i pazienti con tubercolosi (67,1% nel 2019). Mentre la tubercolosi polmonare (PTB) è la manifestazione più comune, qualsiasi altro organo può essere coinvolto. La TB extrapolmonare (EPTB) costituisce il 27,8% (1.321) di tutti i casi in Germania. Mentre l'incidenza complessiva della tubercolosi sta diminuendo nei paesi industrializzati, la percentuale di EPTB è costantemente in aumento in Germania e in altri paesi europei. Le ragioni di ciò non sono completamente comprese. Un ampio studio retrospettivo condotto in Cina ha mostrato una percentuale significativamente più elevata di tubercolosi resistenti a più farmaci tra i pazienti con EPTB rispetto ai pazienti con PTB. Ciò evidenzia chiaramente la necessità di migliorare le misure di controllo dell'EPTB al fine di evitare lo sviluppo della resistenza ai farmaci e di raggiungere l'obiettivo dell'eradicazione della tubercolosi a livello nazionale e internazionale (ad es. Who end-TB-Strategy) che è ulteriormente sfidato dalla pandemia SARS-CoV-2. Il progetto MEX-TB si concentra su EPTB con l'obiettivo principale di ottimizzare la gestione clinica dei pazienti EPTB. Verrà istituita una prospettiva di coorte clinica di EPTB, coinvolgendo più ricercatori e siti clinici (Francoforte, Heidelberg, Borstel, Amburgo, Bonn, Colonia), che ci consentirà di condurre studi clinici e traslazionali dettagliati che affrontano questa entità della malattia.

Descrizione:

La popolazione dello studio, la progettazione della ricerca e i metodi di ricerca dei pazienti adulti di nuova diagnosi di EPTB (n = 150) saranno prospetticamente arruolati allo studio. I pazienti PTB (n = 30) saranno anche inclusi e fungono da gruppo di controllo per testare la fattibilità tecnica. Inoltre, verrà aggiunto un gruppo di controllo sano (n = 30), principalmente per affrontare l'obiettivo 1. I dati clinici verranno raccolti utilizzando questionari standardizzati durante l'intero periodo di trattamento per ciascun individuo.

Inoltre, i fluidi corporei (sangue, urina) saranno raccolti e conservati in una biobanca centrale (Colonia). Tuttavia, non tutti i centri che contribuiscono saranno in grado di fornire cellule mononucleate periferiche di alta qualità (PBMC) per lo stoccaggio. Per non perdere pazienti con raccolte di campioni incomplete, lo studio di coorte avrà diversi strati:

1. Pazienti EPTB (n = 100) con dati clinici (ad es. aumento di peso, risultati di imaging ecc.) E una raccolta completa di campioni bio (parametri di laboratorio di routine, cellule mononucleate periferiche del sangue (PBMC), tubi di paxgene RNA/DNA per firme geniche, conta assoluta e relativa CD4/CD8, contazione delle cellule CD4, vitamina D (25 (OH) D), URINE, PLASMA.
2. Pazienti EPTB (n = 50) con dati clinici (ad es. aumento di peso, risultati di imaging, risultati di microbiologia ecc.) Plus/meno una raccolta parziale di campioni di bio (ad es. Risultati di laboratorio di routine, vitamina D (25 (OH) D), paxgene, plasma)
3. Controlli sani (n = 30) e una raccolta completa di campioni bio come descritto per Stratum 1 a un timepoint.

Raccolta di dati I dati clinici e di laboratorio pseudonimizzati saranno registrati nei seguenti punti temporali: diagnosi/ iniziazione del trattamento (giorno 0/ +/- 7 giorni); 4 settimane dopo l'inizio del trattamento (+/- 7 giorni); 3 mesi dopo l'inizio del trattamento (+/- 7 giorni); 6 mesi dopo l'inizio del trattamento (+/- 7 giorni); 3 mesi dopo la fine del trattamento (+/- 7 giorni). Nei pazienti che richiedono un trattamento di oltre 6 mesi (cioè TB resistente alla droga, TB diffusa ecc.) Verranno raccolti regolarmente fino alla fine del trattamento. La pseudonimizzazione dei dati del paziente e l'acquisizione di biomateriali viene eseguita attraverso un generazione ID paziente. Verrà utilizzato un modulo di case report documento (CRF) per raccogliere i dati dei pazienti. I dati CRF verranno quindi trasferiti in un database elettronico.

Risultato:

I biomarcatori basati su laboratorio per la valutazione delle risposte terapeutiche simili alla conversione dell'espettorato utilizzate per il PTB non sono disponibili nella maggior parte dei casi di EPTB. I marcatori di infiammazione non specifici come la proteina C-reattiva (CRP) possono essere utilizzati per valutare la risposta precoce del trattamento. Valuteremo sistematicamente e longitudinalmente i parametri radiologici (dimensioni della lesione in CT, ecografia o risonanza magnetica), risultati di laboratorio e segni clinici (ad es. aumento di peso, meno dolore, assenza di febbre ecc.). Sfrutteremo quindi gli algoritmi di risposta appositamente valutati per i pazienti con EPTB che iniziano il trattamento anti-TB. Verrà utilizzata una combinazione di tre parametri clinici 1) miglioramento dei sintomi segnalati 2) aumento di peso (qualsiasi aumento di peso o aumento di peso ≥ 5%) 3) Regressione del gonfiore dei linfonodi, effusione pleurica o peritoneale o altri risultati locali, durante e dopo il trattamento. Una combinazione di questi parametri prevede un risultato favorevole o sfavorevole all'inizio del processo di trattamento.

Obiettivi:

Il nostro obiettivo è valutare la risposta al trattamento usando questi parametri, supportati da due medici ed esperti indipendenti nel settore (revisione cieca). I dati saranno correlati ai risultati dei biomarcatori basati sul sangue descritti di seguito. Gli obiettivi principali di questo studio sono lo sviluppo di biomarcatori specifici di EPTB per la migliore diagnostica EPTB e la valutazione delle risposte al trattamento correlando i parametri e le firme immunologiche e basate sul sangue con caratteristiche cliniche al basale e longitudinalmente. A tale scopo, il nostro studio biomarker si concentrerà su due obiettivi principali:

Obiettivo dello studio I: valutazione dei biomarcatori del sangue come strumenti diagnostici per espettorato EPTB o diagnostica di laboratorio a base di liquidi polmonari eseguiti con PTB non è possibile nella maggior parte dei casi di EPTB. Sono necessari biomarcatori a base di sangue.

• Ci concentreremo su due approcci: 1) firme di espressione genica derivate dal sangue associate alla tubercolosi; 2) Saggi basati su cellule T (ad es. Dosaggio TAM-TB).
• Per questo obiettivo, studiare prima i marcatori che sono già stati analizzati nei pazienti con PTB. Saremo inoltre in grado di studiare i marcatori specifici dell'EPTB in modo imparziale, se necessario.

Studio Obiettivo II: valutazione dei biomarcatori del sangue che prevedono la risposta o l'insufficienza e la cura del trattamento nell'EPTB

• Prevedere la cura o il rischio di fallimento del trattamento è cruciale per la gestione dell'EPTB. Varie definizioni di esito per PTB si basano su risultati di coltura e striscio che non è applicabile in EPTB. Il nostro obiettivo è correlare i biomarcatori a base di sangue con la risposta al trattamento che valuteremo con parametri clinici ben definiti.
• Per questo obiettivo continueremo con la nostra valutazione del plasma IP-10 come marcatore di risposta al trattamento semplice ed economico. Ulteriori marcatori a base di plasma sono stati descritti nella nostra proposta. Marcatori/firme più complessi (espressione genica tramite risposta RNA-Seq e T-cellule basate) verranno applicati utilizzando approcci tecnici simili a quelli sfruttati in AIM 1. Ci concentreremo principalmente sulle firme che sono già state valutate per PTB. L'obiettivo generale di questa unica coorte multicentrica di pazienti con EPTB è lo sviluppo.