Otimização do protocolo de isolamento para vesículas extracelulares (VEs) do líquido folicular humano
Antecedentes: As vesículas extracelulares (VEs) são vesículas ligadas à membrana encontradas em todos os fluidos biológicos, contendo várias moléculas regulatórias, incluindo microRNAs (miRNAs). Foi sugerido que os VEs no líquido folicular humano (o fluido que cercam o oócito dentro do ovário) desempenham um papel crucial no desenvolvimento de oócitos através desses miRNAs. No entanto, existem vários métodos para isolar esses VEs do fluido folicular. Antes que pesquisas adicionais possam ser conduzidas sobre a fisiopatologia e as aplicações potenciais de diagnóstico e terapêuticas desses VEs e seu conteúdo, a técnica ideal de isolamento deve ser determinada para estudos futuros.
Cada método tem suas vantagens e desvantagens, e a pureza e eficiência podem variar entre espécies e diferentes fluidos biológicos. Existem apenas um número limitado de estudos comparando as várias técnicas de aplicação no líquido folicular humano.
Objetivo: Este estudo comparará as três técnicas mais usadas para isolar EVs: baseada em tamanho, baseada em sedimentação (ultracentrifugação diferencial) e técnicas de isolamento baseadas em flutuabilidade.
Metodologia:
Neste estudo prospectivo, o líquido folicular será coletado de quatro pacientes submetidos à recuperação de oócitos transvaginais após estimulação ovariana no Hospital Universitário de Ghent. Pacientes com mais de 40 anos de idade ou com endometriose, adenomiose ou SOP (síndrome do ovário policístico) não serão incluídos neste estudo. Durante o procedimento de recuperação de oócitos, o líquido folicular será coletado de 2-4 oócitos por paciente. Como o líquido folicular não é usado no tratamento do paciente (material residual), ele não afeta o tratamento.
Após a coleta, as três técnicas de isolamento serão aplicadas a cada amostra. As técnicas serão comparadas em termos de pureza (ausência de contaminação) e eficiência (concentração de EV) usando microscopia eletrônica de transmissão, análise de rastreamento de nanopartículas e Western blotting.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Tipo de estudo
Inscrição (Estimado)
Estágio
- Não aplicável
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: Dominic Stoop, Prof. dr.
- Número de telefone: + 329 332 34 42
- E-mail: arg.studies@uzgent.be
Estude backup de contato
- Nome: Eva Decroos, Dr.
- Número de telefone: +329 332 67 56
- E-mail: arg.studies@uzgent.be
Locais de estudo
-
-
-
Ghent, Bélgica, 9000
- Recrutamento
- Ghent University Hospital
-
Contato:
- Eva Decroos, MD
- Número de telefone: +3293326756
- E-mail: eva.decroos@uzgent.be
-
Contato:
- Kathleen Wijnant, MSc
- Número de telefone: +3293323442
- E-mail: arg.studies@uzgent.be
-
Investigador principal:
- Dominic Stoop, Prof. dr.
-
-
Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
- Adulto
Aceita Voluntários Saudáveis
Descrição
Critérios de inclusão:
- Pacientes planejados para uma recuperação de oócitos no Hospital Universitário de Ghent.
Critérios de exclusão:
- Diagnóstico de endometriose/adenomiose
- Diagnóstico de SOP (síndrome do ovário policístico)
- Contaminação do sangue macroscópico na recuperação de oócitos
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Finalidade Principal: Ciência básica
- Alocação: N / D
- Modelo Intervencional: Atribuição de grupo único
- Mascaramento: Nenhum (rótulo aberto)
Armas e Intervenções
Grupo de Participantes / Braço |
Intervenção / Tratamento |
|---|---|
|
Experimental: Grupo de intervenção
|
Ultracentrifugação diferencial
Ultracentrifugação de gradiente de densidade optiprep ™
Cromatografia de exclusão de tamanho
Técnicas combinadas
|
O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
|
Purety
Prazo: 3 meses
|
Puryt of EV Isolation
|
3 meses
|
Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
|
Eficiência
Prazo: 3 meses
|
Eficiência em termos de número de partículas
|
3 meses
|
|
Eficiência de RNA
Prazo: 6 meses
|
Eficiência em termos de pontuação de Rin
|
6 meses
|
Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
Conclusão Primária (Estimado)
Conclusão do estudo (Estimado)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Real)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- ONZ-2024-0419
- G096624N (Número de outro subsídio/financiamento: FWO)
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
produto fabricado e exportado dos EUA
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