Фаза I и фармакологическое исследование гидрата камптотецин-20-O-пропионата (CZ48) у пациентов с солидными опухолями или лимфомой

CZ48 является аналогом ингибитора топоизомеразы I камптотецина (CPT). CPT — это алкалоид, извлеченный из китайского дерева Camptotheca acuminata. Только изомер S (природная форма) является биологически активным. Неповрежденное кольцо Е-лактона, которое имеет тенденцию сохраняться в кислой среде, необходимо для противоопухолевой активности. Более того, открытая часть лактонного кольца имеет тенденцию повышать токсичность [1-3]. В фазах I и II испытаний, проведенных в 1970-1972 гг. с натриевой солью СРТ (позднее было показано, что она в значительной степени неактивна), токсичность включала миелосупрессию, диарею и цистит [2, 3].

С наблюдением в 1984 году, что механизм действия CPT заключается в ингибировании топоизомеразы I [1], возобновление интереса к препарату привело к разработке множества аналогов, некоторые из которых имели более высокую эффективность, чем исходное лекарство. Некоторые производные растворимы в воде, такие как Camptosar® (иринотекан, CPT-11) и Hycamptin® (топотекан), которые в настоящее время одобрены для использования в США при раке толстой кишки и раке яичников соответственно. Исследования показали, что замены в положениях С-9 и С-10 повышают активность и могут придавать растворимость в воде. В целом водорастворимые аналоги имеют пониженную противораковую активность в доклинических моделях.

Нерастворимый в воде нативный камптотецин (CPT) вызывал диарею, которая оказалась токсичностью, ограничивающей дозу. Измерения показали очень низкий уровень СРТ замкнутого лактонового кольца в плазме субъектов, получавших это соединение [4]. Позже это было объяснено демонстрацией того, что CPT связывается с человеческим альбумином, действие которого способствует раскрытию лактонового кольца [5]. Мышиный альбумин гораздо менее эффективен в этой активности, что объясняет большую противоопухолевую активность, наблюдаемую в моделях на мышах.

В отличие от CPT, CZ48, инкубированный in vitro с плазмой человека и исследованный in vivo, сохраняет существенную концентрацию замкнутого лактонового кольца в плазме. Похоже, он действует как пролекарство. Удаление боковой цепи эндогенными эстеразами высвобождает активное лекарство СРТ. Злокачественные клетки имеют высокое содержание эстеразы и быстро превращают пролекарство в активное исходное лекарство. Доклинические исследования свидетельствуют о сохранении противораковой активности и снижении токсичности, вероятно, потому, что пролекарство в системном кровотоке не обладает активностью или малоактивно. Следовательно, доставка более высоких концентраций аналога СРТ с замкнутым лактоновым кольцом внутрь опухолевых клеток должна усиливать противоопухолевую активность. Это исследование дает возможность оценить эту гипотезу.

- ОБЗОР СТРАТЕГИИ НЕКЛИНИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ

Все неклинические фармакологические, фармакокинетические и токсикологические исследования, описанные в настоящем документе, были проведены Фондом исследований рака CHRISTUS Stehlin или для него. Для исследований, проводимых в соответствии с правилами GLP, местонахождение записей для проверки будет включено/будет включено в каждый отчет об исследовании. Для исследований, не соответствующих GLP, записи об исследованиях хранятся в файле по адресу:

Фонд исследования рака КРИСТУС Стелин, 1315 St. Джозеф Паркуэй, Люкс № 1818 Хьюстон, Техас 77002

Было проведено несколько экспериментов для изучения первичной фармакодинамики (т.е. эффективности и действенности) CZ48 в отношении различных линий опухолей как in vitro, так и in vivo. В свете предполагаемой популяции пациентов Фазы I пакет фармакологических исследований безопасности CZ48 был ограничен оценкой сердечно-сосудистой системы in vitro и in vivo. Никаких вторичных фармакодинамических или фармакодинамических исследований лекарственного взаимодействия с CZ48 не проводилось.

Примечание. Во всех исследованиях GLP чистота CZ48, определенная валидированными методами ВЭЖХ, составляет 98,9%. Для этих исследований препарат готовили в виде 0,5% водной суспензии карбоксиметилцеллюлозы средней плотности (КМЦ). Для всех не-GLP исследований лекарство (чистота 98%) готовили в виде суспензии в хлопковом масле (за исключением не-GLP-исследования, проведенного Covance, в котором также использовали состав CMC).

Исследования, характеризующие фармакокинетику и токсикокинетику CZ48 и его активного метаболита камптотецина после однократного или многократного введения, проводились на мышах и собаках. Исследования с повторными дозами представляли собой токсикокинетические оценки, проводимые в рамках основной токсикологической программы с использованием проверенных биоаналитических методов. Обширных исследований распределения CZ48 не проводилось; однако оценивали распределение лекарственного средства в тканях опухоли, печени и почек мышей с опухолями. Было проведено несколько исследований метаболизма in vitro и in vivo для изучения метаболического превращения CZ48 в его активную часть, камптотецин. Исследования экскреции ограничивались измерением CZ48 в фекалиях голых мышей после однократного введения. Исследования фармакокинетического взаимодействия с CZ48 не проводились.

Программа токсикологии CZ48 состояла из поисковых (не GLP) исследований по определению диапазона доз на мышах и собаках и окончательной (GLP) токсичности и токсикокинетических исследований у обоих видов. Основные токсикологические исследования, проведенные с CZ48, использовали предполагаемый клинический путь и график введения. Кроме того, два исследования (не GLP) были проведены на мышах для оценки общей переносимости длительного введения высоких доз CZ48.